Fastställande av gemensamma analysmetoder för vin

Avis juridique important

Kommissionens förordning (EEG) nr 2676/90 av den 17 september 1990 om fastställande av gemensamma analysmetoder för vin Europeiska gemenskapernas officiella tidning nr L 272 , 03/10/1990 s. 0001 - 0192 Finsk specialutgåva Område 3 Volym 34 s. 0005 Svensk specialutgåva Område 3 Volym 34 s. 0005

KOMMISSIONENS FÖRORDNING (EEG) nr 2676/90 av den 17 september 1990 om fastställande av gemensamma analysmetoder för vin

EUROPEISKA GEMENSKAPERNAS RÅD HAR ANTAGIT DENNA FÖRORDNING

med beaktande av Fördraget om upprättandet av Europeiska ekonomiska gemenskapen,

med beaktande av kommissionens förslag,

med beaktande av rådets förordning (EEG) nr 822/87 av den 16 mars 1987 om den gemensamma organisationen av marknaden för vin(1), ändrad genom förordning (EEG) nr 1325/90(2), särskilt artikel 74 i denna, och

med beaktande av följande:

Skälen nedan är grundrättsaktens. Ändringsrättsakternas skäl: förordning (EEG) nr 2348/91 · förordning (EEG) nr 2645/92 · förordning (EG) nr 60/95 · förordning (EG) nr 69/96 · förordning (EG) nr 822/97 · förordning (EG) nr 761/1999 · förordning (EG) nr 1622/2000 · förordning (EG) nr 440/2003 · förordning (EG) nr 128/2004 · förordning (EG) nr 355/2005 · förordning (EG) nr 1293/2005 · förordning (EG) nr 606/2009.

Enligt artikel 74.1. i förordning (EEG) nr 822/87 skall analysmetoder fastställas för att bestämma sammansättningen av de produkter som anges i artikel 1 i samma förordning samt regler för kontroll av huruvida dessa produkter har utsatts för någon behandling som strider mot godkänt enologiskt förfarande.

Eftersom gemenskapen ännu inte har fastställt gränsvärden för substanser, vars förekomst visar att vissa enologiska metoder har tillämpats eller tabeller som gör det möjligt att jämföra analysdata, bör medlemsstaterna bemyndigas att fastställa dessa gränsvärden.

Artikel 13.1. i förordning (EEG) nr 822/87 innehåller bestämmelser om en analytisk undersökning som omfattar åtminstone en bedömning av de egenskaper hos det aktuella kvalitetsvinet fso som anges i bilagan till den förordningen.

Det är nödvändigt att införa enhetliga analysmetoder för kontroll av de uppgifter som anges i dokumentationen för de aktuella produkterna, så att uppgifterna blir korrekta och jämförbara. Dessa metoder bör därför vara obligatoriska för alla handelstransaktioner och alla kontrollåtgärder. Med hänsyn till de begränsade möjligheterna i detta avseende inom handeln bör ett begränsat antal rutinmetoder tillåtas, som gör det möjligt att snabbt och med tillräcklig säkerhet fastställa de nödvändiga faktorerna.

Allmänt erkända metoder, som de som utvecklats för 1954 års internationella konvention om standardisering av metoder för analys och bedömning av vin och som publicerats av Internationella vinkontoret i Recueil des méthodes internationales d'analyse des vins (samling av internationella metoder för vinanalys), bör i möjligaste mån bibehållas.

De vinanalysmetoder som används inom gemenskapen fastställdes i kommissionens förordning (EEG) nr 1108/82(3). Den vetenskapliga utvecklingen gör det nödvändigt att ersätta vissa av dessa metoder med sådana som är mer ändamålsenliga, ändra vissa metoder och införa nya, särskilt sådana som sedermera har godkänts av Internationella vinkontoret. Med hänsyn till det stora antalet ändringar och deras komplexitet bör alla analysmetoder samlas i en ny förordning och förordning (EEG) nr 1108/82 bör upphävas.

För att säkerställa jämförbarheten av de resultat som erhålls genom användning av de analysmetoder som avses i artikel 74 i förordning (EEG) nr 822/87 skall de av Internationella vinkontoret fastställda definitionerna av resultatens noggrannhet, repeterbarhet och reproducerbarhet användas.

Med hänsyn till de vetenskapliga framstegen å ena sidan och de officiella laboratoriernas tekniska utrustning å den andra, samt i syfte att förbättra dessa laboratoriers effektivitet och lönsamhet, bör automatiserade analysmetoder tillåtas under vissa omständigheter. Det måste dock föreskrivas att dessa automatiserade metoder i händelse av tvist inte kan ersätta referensmetoderna eller de allmänt använda metoderna.

Resultaten av densitetsbestämningar utförda med den automatiserade metoden, som bygger på principen för frekvensoscillatorn, är i fråga om noggrannhet, repeterbarhet och reproducerbarhet minst lika goda som de resultat som erhålls med de metoder som anges i punkt 1 i bilagan till denna förordning för bestämning av densitet eller specifik vikt. Enligt artikel 74.3. i förordning (EEG) nr 822/87 skall denna automatiserade metod sålunda anses vara likvärdig med de metoder som anges i bilagan till den här förordningen.

Den metod som beskrivs i kapitel 25 punkt 2.2.3.3.2 i bilagan till denna förordning för analys av den totala svaveldioxidhalten i vin och vinmust med en förmodad halt under 50 mg/l ger en bättre extraktion av denna substans än de metoder som beskrivs i kapitel 13 punkt 13.4 i bilagan till förordning (EEG) nr 1108/82. Den förstnämnda metoden ger ett högre värde för den totala svaveldioxidhalten i de analyserade produkterna. Denna halt kan, särskilt i vissa druvsafter, vara högre än den högsta tillåtna halten. För att undvika problem med avsättning av druvsaft som redan har framställts vid tidpunkten för denna förordnings ikraftträdande och till dess att produktionsprocesserna ändrats såatt bättre avsvavling uppnås av druvsaft vars jäsning avstannats genom tillsats av alkohol, bör det förfarande som beskrivs i den ovannämnda förordningen tillåtas under en övergångsperiod.

De åtgärder som avses i denna förordning är förenliga med yttrandet från Förvaltningskommittén för vin.

HÄRIGENOM FÖRESKRIVS FÖLJANDE.

EUROPEISKA GEMENSKAPERNAS RÅD HAR ANTAGIT DENNA FÖRORDNING

med beaktande av Fördraget om upprättandet av Europeiska ekonomiska gemenskapen,

med beaktande av kommissionens förslag,

med beaktande av rådets förordning (EEG) nr 822/87 av den 16 mars 1987 om den gemensamma organisationen av marknaden för vin, ändrad genom förordning (EEG) nr 1325/90, särskilt artikel 74 i denna, och

Enligt artikel 74.1. i förordning (EEG) nr 822/87 skall analysmetoder fastställas för att bestämma sammansättningen av de produkter som anges i artikel 1 i samma förordning samt regler för kontroll av huruvida dessa produkter har utsatts för någon behandling som strider mot godkänt enologiskt förfarande.

Eftersom gemenskapen ännu inte har fastställt gränsvärden för substanser, vars förekomst visar att vissa enologiska metoder har tillämpats eller tabeller som gör det möjligt att jämföra analysdata, bör medlemsstaterna bemyndigas att fastställa dessa gränsvärden.

Artikel 13.1. i förordning (EEG) nr 822/87 innehåller bestämmelser om en analytisk undersökning som omfattar åtminstone en bedömning av de egenskaper hos det aktuella kvalitetsvinet fso som anges i bilagan till den förordningen.

Det är nödvändigt att införa enhetliga analysmetoder för kontroll av de uppgifter som anges i dokumentationen för de aktuella produkterna, så att uppgifterna blir korrekta och jämförbara. Dessa metoder bör därför vara obligatoriska för alla handelstransaktioner och alla kontrollåtgärder. Med hänsyn till de begränsade möjligheterna i detta avseende inom handeln bör ett begränsat antal rutinmetoder tillåtas, som gör det möjligt att snabbt och med tillräcklig säkerhet fastställa de nödvändiga faktorerna.

Allmänt erkända metoder, som de som utvecklats för 1954 års internationella konvention om standardisering av metoder för analys och bedömning av vin och som publicerats av Internationella vinkontoret i Recueil des méthodes internationales d'analyse des vins (samling av internationella metoder för vinanalys), bör i möjligaste mån bibehållas.

De vinanalysmetoder som används inom gemenskapen fastställdes i kommissionens förordning (EEG) nr 1108/82. Den vetenskapliga utvecklingen gör det nödvändigt att ersätta vissa av dessa metoder med sådana som är mer ändamålsenliga, ändra vissa metoder och införa nya, särskilt sådana som sedermera har godkänts av Internationella vinkontoret. Med hänsyn till det stora antalet ändringar och deras komplexitet bör alla analysmetoder samlas i en ny förordning och förordning (EEG) nr 1108/82 bör upphävas.

För att säkerställa jämförbarheten av de resultat som erhålls genom användning av de analysmetoder som avses i artikel 74 i förordning (EEG) nr 822/87 skall de av Internationella vinkontoret fastställda definitionerna av resultatens noggrannhet, repeterbarhet och reproducerbarhet användas.

Med hänsyn till de vetenskapliga framstegen å ena sidan och de officiella laboratoriernas tekniska utrustning å den andra, samt i syfte att förbättra dessa laboratoriers effektivitet och lönsamhet, bör automatiserade analysmetoder tillåtas under vissa omständigheter. Det måste dock föreskrivas att dessa automatiserade metoder i händelse av tvist inte kan ersätta referensmetoderna eller de allmänt använda metoderna.

Resultaten av densitetsbestämningar utförda med den automatiserade metoden, som bygger på principen för frekvensoscillatorn, är i fråga om noggrannhet, repeterbarhet och reproducerbarhet minst lika goda som de resultat som erhålls med de metoder som anges i punkt 1 i bilagan till denna förordning för bestämning av densitet eller specifik vikt. Enligt artikel 74.3. i förordning (EEG) nr 822/87 skall denna automatiserade metod sålunda anses vara likvärdig med de metoder som anges i bilagan till den här förordningen.

Den metod som beskrivs i kapitel 25 punkt 2.2.3.3.2 i bilagan till denna förordning för analys av den totala svaveldioxidhalten i vin och vinmust med en förmodad halt under 50 mg/l ger en bättre extraktion av denna substans än de metoder som beskrivs i kapitel 13 punkt 13.4 i bilagan till förordning (EEG) nr 1108/82. Den förstnämnda metoden ger ett högre värde för den totala svaveldioxidhalten i de analyserade produkterna. Denna halt kan, särskilt i vissa druvsafter, vara högre än den högsta tillåtna halten. För att undvika problem med avsättning av druvsaft som redan har framställts vid tidpunkten för denna förordnings ikraftträdande och till dess att produktionsprocesserna ändrats såatt bättre avsvavling uppnås av druvsaft vars jäsning avstannats genom tillsats av alkohol, bör det förfarande som beskrivs i den ovannämnda förordningen tillåtas under en övergångsperiod.

De åtgärder som avses i denna förordning är förenliga med yttrandet från Förvaltningskommittén för vin.

HÄRIGENOM FÖRESKRIVS FÖLJANDE.

Artikel1¶

Ändrad genom förordning (EG) nr 606/2009.

1. Gemenskapsmetoderna för vinanalys, som i samband med handelstransaktioner och kontrollåtgärder skall göra det möjligt att

fastställa sammansättningen av de produkter som anges i artikel 1 i förordning (EEG) nr 822/87, och

kontrollera om dessa produkter har utsatts för någon behandling som strider mot godkänt enologiskt förfarande,

skall vara de som anges i bilagan till denna förordning.

2. För ämnen för vilka referensmetoder och rutinmetoder finns angivna skall de resultat som erhålls med referensmetoderna ha företräde.

Artikel2¶

Ändrad genom förordning (EG) nr 606/2009.

I denna förordning avses med

a) repeterbarhet: det värde under vilket den absoluta skillnaden mellan två individuella resultat som har uppnåtts i prov på identiskt provmaterial som har genomförts under samma förhållanden (samma person, samma apparatur, samma laboratorium och ett kort tidsintervall) kan förväntas ligga inom en angiven sannolikhet,

b) reproducerbarhet: det värde under vilket den absoluta skillnaden mellan två individuella resultat som har erhållits under olika förhållanden (olika personer, olika apparatur, olika laboratorier eller olika tidsintervall) kan förväntas ligga inom en angiven sannolikhet.

Begreppet ”individuellt provresultat” avser det värde som erhålls när den standardiserade analysmetoden tillämpas fullständigt och en gång på ett enda prov.

Om inte annat anges, skall sannolikheten vara 95 %.

Artikel3¶

Ändrad genom förordning (EG) nr 606/2009 och förordning (EG) nr 355/2005.

1. Automatiserade analysmetoder får användas, på laboratoriechefens ansvar, under förutsättning att resultatens noggrannhet, repeterbarhet och reproducerbarhet åtminstone är likvärdiga med de resultat som erhålls med de analysmetoder som anges i bilagan.

I händelse av tvist får de metoder som anges i bilagan inte ersättas av automatiserade metoder.

2. Den automatiserade metod för densitetsbestämning som bygger på principen för frekvensoscillatorn skall anses vara likvärdig med de metoder som anges i avsnitt 1 i bilagan till denna förordning.

Artikel4¶

Ändrad genom förordning (EG) nr 606/2009.

Det vatten som används för lösning, spädning eller tvätt skall vara destillerat vatten eller avjoniserat vatten av minst motsvarande renhetsgrad. Om inte annat anges, skall alla kemikalier vara av analysren kvalitet.

Artikel5¶

Ändrad genom förordning (EG) nr 606/2009.

Förordning (EEG) nr 1108/82 skall upphöra att gälla.

Artikel 1.4 i förordningen skall dock gälla till och med den 31 december 1990.

Artikel6¶

Ändrad genom förordning (EG) nr 606/2009.

Denna förordning träder i kraft samma dag som den offentliggörs i Europeiska gemenskapernas officiella tidning.

Den skall tillämpas från och med den 1 oktober 1990.

BILAGA

1. DENSITET OCH SPECIFIK VIKT VID 20 °C

1. DEFINITIONER

Med densitet avses massan per volymenhet vin eller must vid 20 °C. Den uttrycks i gram per milliliter och betecknas med symbolen ρ20 °C.

Med specifik vikt vid 20 °C (eller relativ densitet 20 °C/20 °C) avses förhållandet, uttryckt som decimalbråk, mellan densiteten hos en viss volym vin eller must vid 20 °C och densiteten hos samma volym vatten vid samma temperatur. Den betecknas med symbolen d 20 °C 20 °C.

2. PRINCIP FÖR METODERNA

Densiteten och den specifika vikten vid 20 °C bestäms på ett analysprov

antingen med pyknometri: referensmetod,

eller med areometeranalys eller densimetri med en hydrostatisk våg: rutinmetoder.

Anmärkning:

För mycket noggrann bestämning skall densiteten korrigeras för effekten av svaveldioxid enligt formeln:

ρ20 °C = ρ′ 20 °C - 0,0006 × S

där

ρ20 °C = den korrigerade densiteten

ρ′20 °C = den observerade densiteten

S = total svaveldioxid i g/l

3. FÖRBEHANDLING AV PROVET

Om vinet eller musten innehåller nämnvärda mängder koldioxid avlägsnas merparten av denna genom att 250 ml av vinet skakas om i en enliters kolv eller genom filtrering under reducerat tryck genom 2 g bomull som placerats i ett förlängningsrör.

4. REFERENSMETOD

4.1 Apparatur

Vanlig laboratorieutrustning, särskilt:

Pyknometer av pyrexglas på ca. 100 ml, med en löstagbar termometer med slipad glaskoppling med en skala i tiondels grader från 10 till 30 °C (figur 1). Termometern skall vara kalibrerad.

Figur 1 Pyknometer med tareringsflaska

Pyknometern har ett 25 mm långt sidorör med en innerdiameter på högst 1 mm som avslutas med en konisk koppling av slipat glas. Sidoröret kan tillslutas med en ”uppsamlingspropp” bestående av en slipad glaskon som utmynnar i ett smalt rör. Proppen fungerar som en expansionskammare.

Apparatens båda slipade kopplingar skall vara mycket noggrant utförda.

En tareringsflaska, bestående av ett kärl med samma yttre volym som pyknometern (mindre än 1 ml avvikelse) och med samma massa som pyknometern när den är fylld med en vätska med en specifik vikt av 1,01 (2,0 % m/v koksaltlösning).

En värmeisolerad behållare som är exakt avpassad för pyknometern.

Våg med två vågskålar med minst 300 g kapacitet och 0,1 mg noggrannhet

eller

våg med en vågskål med minst 200 g kapacitet och 0,1 mg noggrannhet.

4.2 Kalibrering av pyknometern

Kalibrering av pyknometern innebär bestämning av följande faktorer:

tara (tom pyknometer),

pyknometerns volym vid 20 °C,

den vattenfyllda pyknometerns massa vid 20 °C.

4.2.1. Metod vid användning av en våg med två vågskålar

Placera tareringsflaskan i vågens vänstra vågskål och den torra och rena pyknometern med ”uppsamlingsproppen” i den högra vågskålen. Placera vikter i vågskålen med pyknometern och notera den vikt där vågskålarna väger jämnt. Benämn denna p gram.

Fyll försiktigt pyknometern med destillerat, rumstempererat vatten och sätt i termometern. Pyknometern avtorkas omsorgsfullt och placeras i den värmeisolerade behållaren. Blanda genom att vända behållaren flera gånger till dess att en konstant temperatur kan avläsas på termometern. Justera vätskenivån tills den når sidorörets övre kant. Torka sidoröret torrt och anbringa uppsamlingsproppen. Läs av temperaturen t°C noggrant och korrigera eventuellt för temperaturskalans bristande noggrannhet. Väg den vattenfyllda pyknometern mot taran och anteckna vikten p′ i gram där jämvikt uppnås.

Beräkning

Tarering av den tomma pyknometern:

Taran för den tomma pyknometern = p + m,

där

m = massan av luften i pyknometern,

m = 0,0012 (p - p′).

Volym vid 20 °C:

V20 °C = (p + m - p′) × Ft

där

Ft = en faktor som hämtas från tabell 1 för temperaturen t °C.

V20 °C skall vara känd med noggrannheten ± 0,001 ml.

Vattnets massa vid 20 °C:

M20 °C = V20 °C × 0,998203

där

0,998203 = vattnets densitet vid 20 °C.

4.2.2 Metod vid användning av en våg med en vågskål

Bestäm

den torra och rena pyknometerns massa, P,

den vattenfyllda pyknometerns massa när vattnet har temperaturen t °C, P1. Följ anvisningarna i 4.2.1 ovan.

tarans massa, T0.

Beräkning

Tarering av den tomma pyknometern:

Tara för den tomma pyknometern = P - m,

där

m = massan av luften i pyknometern,

m = 0,0012 (P1 - P).

Volym vid 20 °C:

V20 °C = [P1 - (P - m)] × Ft,

där

Ft = en faktor som hämtas från tabell 1 för temperaturen t °C.

Volymen vid 20 °C skall vara känd med noggrannheten ± 0,001 ml.

Vattnets massa vid 20 °C:

M20 °C = V20 °C × 0,998203,

där

0,998203 = vattnets densitet vid 20 °C.

4.3. Mätmetod

4.3.1 Metod vid användning av en våg med två vågskålar

Fyll pyknometern med det färdiga analysprovet och följ anvisningarna i 4.2.1 ovan.

Den massa i gram som krävs för att uppnå jämvikt vid t °C benämns p″.

Massan av vätskan i pyknometern = p + m - p″.

Skenbar densitet vid t °C:

ρ t °C = p + m - p″ V 20°C

Beräkna densiteten vid 20 °C med hjälp av någon av följande tabeller, beroende på vilken vätska som skall analyseras: torrt vin (tabell 2), naturlig eller koncentrerad must (tabell 3), sött vin (tabell 4).

Vinets relativa densitet 20 °C/20 °C beräknas genom att densiteten vid 20 °C divideras med 0,998203.

4.3.2 Metod vid användning av en våg med en vågskål

Väg tareringsflaskan och benämn dess massa T.

Beräkna dT = T1 - T0.

Den tomma pyknometerns massa vid tidpunkten för mätningen = P - m + dT.

Väg pyknometern, fylld med det färdiga analysprovet, enligt anvisningarna i 4.2.1 ovan. Massan vid t °C benämns P2.

Massan av vätskan i pyknometern vid t °C = P2 - (P - m + dT)

Skenbar densitet vid t °C:

ρ t °C = P 2 - P - m + dT V 20 °C

Beräkna provvätskans densitet vid 20 °C (torrt vin, naturlig eller koncentrerad must eller sött vin) enligt 4.3.1 ovan.

Den relativa densiteten 20 °C/20 °C beräknas genom att densiteten vid 20 °C divideras med 0,998203.

Densitetsbestämningarnas repeterbarhet

för torra och halvsöta viner: r = 0,00010

för söta viner: r = 0,00018.

Densitetsbestämningarnas reproducerbarhet

för torra och halvsöta viner: R = 0,00037

för söta viner: R = 0,00045.

5. RUTINMETODER

5.1 Areometeranalys

5.1.1 Apparatur

Areometer

Areometrar skall överensstämma med ISO-standarderna vad gäller dimensioner och gradering.

Areometrarna skall ha en cylindrisk kula och rördel med cylindrisk genomskärning med minst 3 mm diameter. För torra viner skall areometern vara graderad från 0,983 till 1,003 med markeringar för tusendelar och femtusendelar därav. Avståndet mellan tusendelsmarkeringarna skall vara minst 5 mm. För bestämning av densiteten hos avalkoholiserade och söta viner och must skall fem areometrar användas, med gradering från 1,000 till 1,030, 1,030 till 1,060, 1,060 till 1,090, 1,090 till 1,120 och 1,120 till 1,150. Areometrarna skall vara graderade i densiteter vid 20 °C med markering för minst varje tusendel och halv tusendel. Avståndet mellan varje tusendelsmarkering skall vara minst 3 mm.

Areometrarna skall vara graderade så att de avläses vid ”meniskens övre kant”. Avläsning av skalan för densitet vid 20 °C eller den specifika vikten vid 20 °C görs antingen vid meniskens övre kant eller på en pappersremsa i areometerns rördel.

Areometrar av detta slag skall vara kalibrerade av en offentlig myndighet.

Kalibrerad termometer, med gradindelning i minst 0,5 °C.

Mätcylinder med 36 mm innerdiameter och 320 mm höjd, som hålls i lodrätt läge med hjälp av ett stativ med stödskruvar.

5.1.2 Metod

Mätmetod

Häll 250 ml av analysprovet, berett enligt 5.1.1.3 ovan, i mätcylindern och placera termometern och areometern i cylindern. Läs av termometern en minut efter noggrann omrörning av provet så att en jämn temperatur erhålls. Avlägsna termometern och läs av den skenbara densiteten vid t °C på areometern efter ytterligare en minut.

Den skenbara densiteten vid t °C korrigeras därefter till 20 °C med hjälp av tabellerna för torrt vin (tabell 5), must (tabell 6) eller vin innehållande socker (tabell 7).

Den relativa densiteten 20 °C/20 °C erhålls genom att densiteten vid 20 °C divideras med 0,998203.

5.2 Densimetri med en hydrostatisk våg

5.2.1 Apparatur

Hydrostatisk våg

Hydrostatisk våg med maximal kapacitet på minst 100 g och 0,1 mg känslighet.

Identiska flottörer av pyrexglas med minst 20 ml volym anbringas under vågskålarna genom upphängning i en tråd med högst 0,1 mm diameter.

Den flottör som är upphängd under den högra vågskålen skall kunna nedsänkas i en mätcylinder försedd med nivåmarkering. Mätcylinderns innerdiameter skall vara minst 6 mm större än flottörens. Flottören skall kunna rymmas helt under mätcylinderns nivåmarkering, så att endast upphängningstråden tränger igenom ytan på den vätska som skall mätas. Temperaturen på vätskan i mätcylindern mäts med en termometer som är indelad i steg på 0,2 °C.

En hydrostatisk våg med en vågskål kan också användas.

5.2.2 Metod

Kalibrering av en hydrostatisk våg

Jämvikt erhålls med de båda flottörerna i luften genom att vikter placeras i den högra vågskålen. Notera den totala massan p för vikterna.

Fyll mätcylindern med rent vatten till markeringen och läs av temperaturen t °C efter det att kolven har skakats om och fått stå i två-tre minuter.

Återställ jämvikten genom att placera vikter i den högra vågskålen. Vikternas massa betecknas p′.

Flottörens volym vid 20 °C erhålls med formeln:

V20 °C = (p' - p)(F + 0,0012)

därF är den faktor som anges i tabell 1 för temperaturen t °C,

p och V20 °C är egenskaper hos flottören.

Mätmetod

Den högra flottören sänks ned i mätcylindern som har fyllts med vin (eller must) upp till märket. Vinets (eller mustens) temperatur t °C avläses och den massa p“ som krävs för att återställa jämvikten antecknas.

Den skenbara densiteten ρt erhålls med formeln ρ t °C = p″ - p V + 0,0012

Om flottören är av pyrexglas, korrigeras densiteten till 20 °C med hjälp av tabell 2, 3 eller 4.

6. EXEMPEL PÅ BERÄKNING AV DENSITETEN VID 20 °C OCH DEN RELATIVA DENSITETEN 20 °C/20 °C (REFERENSMETOD)

6.1 Pyknometri med en våg med två vågskålar

6.1.1 Kalibrering av pyknometern

Vägning av den rena och torra pyknometern:

Tara = pyknometer + p

p = 104,9454 g

Vägning av pyknometern fylld med vatten vid temperatur t °C:

Tara = pyknometer + vatten + p′

p′ = 1,2396 g vid t = 20,5 °C.

Beräkning av massan av luften i behållaren:

m = 0,0012 (p - p′)

m = 0,0012 (104,9454 - 1,2396)

m = 0,1244 g

Konstanter som skall användas senare:

Tara för den tomma pyknometern, p + m:

p + m = 104,9454 + 0,1244

p + m = 105,0698 g

Volym vid 20 °C = (p + m - p′) × Ft °C:

F20,50 °C = 1,001900

V20 °C = (105,0698 - 1,2396) × 1,001900

V20 °C = 104,0275 ml

Vattnets massa vid 20 °C: = V20 °C × 0,998203

M20 °C = 103,8405 g

6.1.2 Bestämning av densiteten och den relativa densiteten 20 °C/20 °C hos ett torrt vin

ρ″ = 1,2622 vid 17,80 °C

ρ 17,80 °C = 105,0698 - 1,2622 104,0275

ρ17,80 °C = 0,99788 g/ml

Tabell 2 gör det möjligt att beräkna ρ20 °C utifrån ρt °C med hjälp av förhållandet:

ρ 20 °C = ρ t °C ± c 1000

När t = 17,80 °C och alkoholhalten 11 % vol. är c = 0,54.

ρ 20 °C = 0,99788 - 0,54 1000

ρ20 °C = 0,99734 g/ml

d 20 °C 20 °C = 0,99734 0,998203 = 0,99913

6.2 Pyknometri med en våg med en vågskål

6.2.1 Kalibrering av pyknometern

Vikten av den rena och torra pyknometern:

P = 67,7913 g

Vikten av pyknometern fylld med vatten vid temperaturen t °C:

P1 = 169,2715 vid 21,65 °C

Massan av luften i pyknometern:

m = 0,0012 (P1 - P)

m = 0,0012 × 101,4802

m = 0,1218 g

Konstanter som skall användas senare:

Tara för den tomma pyknometern, P - m:

P - m = 67,7913 - 0,1218

P- m = 67,6695 g

Volym vid 20 °C = [P1 - (P - m)]Ft °C

F21,65 °C = 1,002140

V20 °C = (169,2715 - 67,6695) × 1,002140

V20 °C = 101,8194 ml

Vattnets massa vid 20 °C = V20 °C × 0,998203

M20 °C = 101,6364 g

Tareringsflaskans massa, T0:

T0 = 171,9160 g

6.2.2 Bestämning av densiteten och den relativa densiteten 20 °C/20 °C hos ett torrt vin

T1 = 171,9178 g

dT = 171,9178 - 171,9160 = 0,0018 g

P - m + dT = 67,6695 + 0,0018 = 67,6713 g

P2 = 169,2799 vid 18 °C

ρ 18 °C = 169,2799 - 67,6713 101,8194

ρ18 °C = 0,99793 g/ml

Tabell 2 gör det möjligt att beräkna ρ20 °C utifrån ρt °C med hjälp av förhållandet:

ρ 20 °C = ρ t °C ± c 1000

När t = 18 °C och alkoholhalten 11 % vol. är c = 0,49.

ρ 20 °C = 0,99793 - 0,49 1000

ρ20 °C = 0,99744 g/ml

d 20 °C 20 °C = 0,99744 0,998203 = 0,99923

TABELL 1 (F-faktorer med vilka massan av vattnet i pyrexpyknometern vid t °C skall multipliceras för att beräkna pyknometerns volym vid 20 °C)

t °C F t °C F t °C F t °C F t °C F t °C F t °C F 10,0 1,000398 13,0 1,000691 16,0 1,001097 19,0 1,001608 22,0 1,002215 25,0 1,002916 28,0 1,003704 ,1 1,000406 ,1 1,000703 ,1 1,001113 ,1 1,001627 ,1 1,002238 ,1 1,002941 ,1 1,003731 ,2 1,000414 ,2 1,000714 ,2 1,001128 ,2 1,001646 ,2 1,002260 ,2 1,002966 ,2 1,003759 ,3 1,000422 ,3 1,000726 ,3 1,001144 ,3 1,001665 ,3 1,002282 ,3 1,002990 ,3 1,003787 ,4 1,000430 ,4 1,000738 ,4 1,001159 ,4 1,001684 ,4 1,002304 ,4 1,003015 ,4 1,003815 10,5 1,000439 13,5 1,000752 16,5 1,001175 19,5 1,001703 22,5 1,002326 25,5 1,003041 28,5 1,003843 ,6 1,000447 ,6 1,000764 ,6 1,001191 ,6 1,001722 ,6 1,002349 ,6 1,003066 ,6 1,003871 ,7 1,000456 ,7 1,000777 ,7 1,001207 ,7 1,001741 ,7 1,002372 ,7 1,003092 ,7 1,003899 ,8 1,000465 ,8 1,000789 ,8 1,001223 ,8 1,001761 ,8 1,002394 ,8 1,003117 ,8 1,003928 ,9 1,000474 ,9 1,000803 ,9 1,001239 ,9 1,001780 ,9 1,002417 ,9 1,003143 ,9 1,003956 11,0 1,000483 14,0 1,000816 17,0 1,001257 20,0 1,001800 23,0 1,002439 26,0 1,003168 29,0 1,003984 ,1 1,000492 ,1 1,000829 ,1 1,001273 ,1 1,001819 ,1 1,002462 ,1 1,003194 ,1 1,004013 ,2 1,000501 ,2 1,000842 ,2 1,001290 ,2 1,001839 ,2 1,002485 ,2 1,003222 ,2 1,004042 ,3 1,000511 ,3 1,000855 ,3 1,001306 ,3 1,001859 ,3 1,002508 ,3 1,003247 ,3 1,004071 ,4 1,000520 ,4 1,000868 ,4 1,001323 ,4 1,001880 ,4 1,002531 ,4 1,003273 ,4 1,004099 11,5 1,000530 14,5 1,000882 17,5 1,001340 20,5 1,001900 23,5 1,002555 26,5 1,003299 29,5 1,004128 ,6 1,000540 ,6 1,000895 ,6 1,001357 ,6 1,001920 ,6 1,002578 ,6 1,003326 ,6 1,004158 ,7 1,000550 ,7 1,000909 ,7 1,001374 ,7 1,001941 ,7 1,002602 ,7 1,003352 ,7 1,004187 ,8 1,000560 ,8 1,000923 ,8 1,001391 ,8 1,001961 ,8 1,002625 ,8 1,003379 ,8 1,004216 ,9 1,000570 ,9 1,000937 ,9 1,001409 ,9 1,001982 ,9 1,002649 ,9 1,003405 ,9 1,004245 12,0 1,000580 15,0 1,000951 18,0 1,001427 21,0 1,002002 24,0 1,002672 27,0 1,003432 30,0 1,004275 ,1 1,000591 ,1 1,000965 ,1 1,001445 ,1 1,002023 ,1 1,002696 ,1 1,003458 ,2 1,000601 ,2 1,000979 ,2 1,001462 ,2 1,002044 ,2 1,002720 ,2 1,003485 ,3 1,000612 ,3 1,000993 ,3 1,001480 ,3 1,002065 ,3 1,002745 ,3 1,003513 ,4 1,000623 ,4 1,001008 ,4 1,001498 ,4 1,002086 ,4 1,002769 ,4 1,003540 12,5 1,000634 15,5 1,001022 18,5 1,001516 21,5 1,002107 24,5 1,002793 27,5 1,003567 ,6 1,000645 ,6 1,001037 ,6 1,001534 ,6 1,002129 ,6 1,002817 ,6 1,003594 ,7 1,000656 ,7 1,001052 ,7 1,001552 ,7 1,002151 ,7 1,002842 ,7 1,003621 ,8 1,000668 ,8 1,001067 ,8 1,001570 ,8 1,002172 ,8 1,002866 ,8 1,003649 ,9 1,000679 ,9 1,001082 ,9 1,001589 ,9 1,002194 ,9 1,002891 ,9 1,003676

TABELL 2 Temperaturkorrektionen c för densiteten hos torra och alkoholfria torra viner, bestämd med en pyknometer av pyrexglas vid t °C, för att erhålla resultatet vid 20 °C

ρ 20 = ρ t ± c 1000 - om t° C är lägre än 20 °C + om t° C är högre än 20 °C

Alkoholhalt 0 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 Temperatur (°C) 10 1,59 1,64 1,67 1,71 1,77 1,84 1,91 2,01 2,11 2,22 2,34 2,46 2,60 2,73 2,88 3,03 3,19 3,35 3,52 3,70 3,87 4,06 4,25 4,44 11 1,48 1,53 1,56 1,60 1,64 1,70 1,77 1,86 1,95 2,05 2,16 2,27 2,38 2,51 2,63 2,77 2,91 3,06 3,21 3,36 3,53 3,69 3,86 4,03 12 1,36 1,40 1,43 1,46 1,50 1,56 1,62 1,69 1,78 1,86 1,96 2,05 2,16 2,27 2,38 2,50 2,62 2,75 2,88 3,02 3,16 3,31 3,46 3,61 13 1,22 1,26 1,28 1,32 1,35 1,40 1,45 1,52 1,59 1,67 1,75 1,83 1,92 2,01 2,11 2,22 2,32 2,44 2,55 2,67 2,79 2,92 3,05 3,18 14 1,08 1,11 1,13 1,16 1,19 1,23 1,27 1,33 1,39 1,46 1,52 1,60 1,67 1,75 1,84 1,93 2,03 2,11 2,21 2,31 2,42 2,52 2,63 2,74 15 0,92 0,96 0,97 0,99 1,02 1,05 1,09 1,13 1,19 1,24 1,30 1,36 1,42 1,48 1,55 1,63 1,70 1,78 1,86 1,95 2,03 2,12 2,21 2,30 16 0,76 0,79 0,80 0,81 0,84 0,86 0,89 0,93 0,97 1,01 1,06 1,10 1,16 1,21 1,26 1,32 1,38 1,44 1,51 1,57 1,64 1,71 1,78 1,85 17 0,59 0,61 0,62 0,63 0,65 0,67 0,69 0,72 0,75 0,78 0,81 0,85 0,88 0,95 0,96 1,01 1,05 1,11 1,15 1,20 1,25 1,30 1,35 1,40 18 0,40 0,42 0,42 0,43 0,44 0,46 0,47 0,49 0,51 0,53 0,55 0,57 0,60 0,63 0,65 0,68 0,71 0,74 0,77 0,81 0,84 0,87 0,91 0,94 19 0,21 0,21 0,22 0,22 0,23 0,23 0,24 0,25 0,26 0,27 0,28 0,29 0,30 0,32 0,33 0,34 0,36 0,37 0,39 0,41 0,42 0,44 0,46 0,47 20 21 0,21 0,22 0,22 0,23 0,23 0,24 0,25 0,26 0,27 0,28 0,29 0,30 0,31 0,32 0,34 0,36 0,37 0,38 0,40 0,41 0,43 0,44 0,46 0,48 22 0,44 0,45 0,46 0,47 0,48 0,49 0,51 0,52 0,54 0,56 0,59 0,61 0,63 0,66 0,69 0,71 0,74 0,77 0,80 0,83 0,87 0,90 0,93 0,97 23 0,68 0,70 0,71 0,72 0,74 0,76 0,78 0,80 0,83 0,86 0,90 0,93 0,96 1,00 1,03 1,08 1,13 1,17 1,22 1,26 1,31 1,37 1,41 1,46 24 0,93 0,96 0,97 0,99 1,01 1,03 1,06 1,10 1,13 1,18 1,22 1,26 1,31 1,36 1,41 1,47 1,52 1,58 1,64 1,71 1,77 1,84 1,90 1,97 25 1,19 1,23 1,25 1,27 1,29 1,32 1,36 1,40 1,45 1,50 1,55 1,61 1,67 1,73 1,80 1,86 1,93 2,00 2,08 2,16 2,24 2,32 2,40 2,48 26 1,47 1,51 1,53 1,56 1,59 1,62 1,67 1,72 1,77 1,83 1,90 1,96 2,03 2,11 2,19 2,27 2,35 2,44 2,53 2,62 2,72 2,81 2,91 3,01 27 1,75 1,80 1,82 1,85 1,89 1,93 1,98 2,04 2,11 2,18 2,25 2,33 2,41 2,50 2,59 2,68 2,78 2,88 2,98 3,09 3,20 3,31 3,42 3,53 28 2,04 2,10 2,13 2,16 2,20 2,25 2,31 2,38 2,45 2,53 2,62 2,70 2,80 2,89 3,00 3,10 3,21 3,32 3,45 3,57 3,69 3,82 3,94 4,07 29 2,34 2,41 2,44 2,48 2,53 2,58 2,65 2,72 2,81 2,89 2,99 3,09 3,19 3,30 3,42 3,53 3,65 3,78 3,92 4,05 4,19 4,33 4,47 4,61 30 2,66 2,73 2,77 2,81 2,86 2,92 3,00 3,08 3,17 3,27 3,37 3,48 3,59 3,72 3,84 3,97 4,11 4,25 4,40 4,55 4,70 4,85 4,92 5,17

Anm: Denna tabell kan användas för att omvandla den specifika vikten d 20 t till den relativa densiteten d 20 20.

TABELL 3 Temperaturkorrektionen c för densiteten hos naturlig must och koncentrerad must, bestämd med en pyrexpyknometer vid t °C, för att erhålla resultatet vid 20 °C

ρ 20 = ρ t ± c 1000 - om t° C är lägre än 20 °C + om t° C är högre än 20 °C

Densitet 1,05 1,06 1,07 1,08 1,09 1,10 1,11 1,12 1,13 1,14 1,15 1,16 1,18 1,20 1,22 1,24 1,26 1,28 1,30 1,32 1,34 1,36 Temperatur (°C) 10o 2,31 2,48 2,66 2,82 2,99 3,13 3,30 3,44 3,59 3,73 3,88 4,01 4,28 4,52 4,76 4,98 5,18 5,42 5,56 5,73 5,90 6,05 11o 2,12 2,28 2,42 2,57 2,72 2,86 2,99 3,12 3,25 3,37 3,50 3,62 3,85 4,08 4,29 4,48 4,67 4,84 5,00 5,16 5,31 5,45 12o 1,92 2,06 2,19 2,32 2,45 2,58 2,70 2,82 2,94 3,04 3,15 3,26 3,47 3,67 3,85 4,03 4,20 4,36 4,51 4,65 4,78 4,91 13o 1,72 1,84 1,95 2,06 2,17 2,27 2,38 2,48 2,58 2,69 2,78 2,88 3,05 3,22 3,39 3,55 3,65 3,84 3,98 4,11 4,24 4,36 14o 1,52 1,62 1,72 1,81 1,90 2,00 2,09 2,17 2,26 2,34 2,43 2,51 2,66 2,82 2,96 3,09 3,22 3,34 3,45 3,56 3,67 3,76 15o 1,28 1,36 1,44 1,52 1,60 1,67 1,75 1,82 1,89 1,96 2,04 2,11 2,24 2,36 2,48 2,59 2,69 2,79 2,88 2,97 3,03 3,10 16o 1,05 1,12 1,18 1,25 1,31 1,37 1,43 1,49 1,55 1,60 1,66 1,71 1,81 1,90 2,00 2,08 2,16 2,24 2,30 2,37 2,43 2,49 17o 0,80 0,86 0,90 0,95 1,00 1,04 1,09 1,13 1,18 1,22 1,26 1,30 1,37 1,44 1,51 1,57 1,62 1,68 1,72 1,76 1,80 1,84 18o 0,56 0,59 0,62 0,66 0,68 0,72 0,75 0,77 0,80 0,83 0,85 0,88 0,93 0,98 1,02 1,05 1,09 1,12 1,16 1,19 1,21 1,24 19o 0,29 0,31 0,32 0,34 0,36 0,37 0,39 0,40 0,42 0,43 0,44 0,45 0,48 0,50 0,52 0,54 0,56 0,57 0,59 0,60 0,61 0,62 20o 21o 0,29 0,30 0,32 0,34 0,35 0,37 0,38 0,40 0,41 0,42 0,44 0,46 0,48 0,50 0,53 0,56 0,58 0,59 0,60 0,61 0,62 0,62 22o 0,58 0,61 0,64 0,67 0,70 0,73 0,76 0,79 0,81 0,84 0,87 0,90 0,96 1,00 1,05 1,09 1,12 1,15 1,18 1,20 1,22 1,23 23o 0,89 0,94 0,99 1,03 1,08 1,12 1,16 1,20 1,25 1,29 1,33 1,37 1,44 1,51 1,57 1,63 1,67 1,73 1,77 1,80 1,82 1,84 24o 1,20 1,25 1,31 1,37 1,43 1,49 1,54 1,60 1,66 1,71 1,77 1,82 1,92 2,01 2,10 2,17 2,24 2,30 2,36 2,40 2,42 2,44 25o 1,51 1,59 1,66 1,74 1,81 1,88 1,95 2,02 2,09 2,16 2,23 2,30 2,42 2,53 2,63 2,72 2,82 2,89 2,95 2,99 3,01 3,05 26o 1,84 1,92 2,01 2,10 2,18 2,26 2,34 2,42 2,50 2,58 2,65 2,73 2,87 3,00 3,13 3,25 3,36 3,47 3,57 3,65 3,72 3,79 27o 2,17 2,26 2,36 2,46 2,56 2,66 2,75 2,84 2,93 3,01 3,10 3,18 3,35 3,50 3,66 3,80 3,93 4,06 4,16 4,26 4,35 4,42 28o 2,50 2,62 2,74 2,85 2,96 3,07 3,18 3,28 3,40 3,50 3,60 3,69 3,87 4,04 4,21 4,36 4,50 4,64 4,75 4,86 4,94 5,00 29o 2,86 2,98 3,10 3,22 3,35 3,47 3,59 3,70 3,82 3,93 4,03 4,14 4,34 4,53 4,72 4,89 5,05 5,20 5,34 5,46 5,56 5,64 30o 3,20 3,35 3,49 3,64 3,77 3,91 4,05 4,17 4,30 4,43 4,55 4,67 4,90 5,12 5,39 5,51 5,68 5,84 5,96 6,08 6,16 6,22

Anm: Denna tabell kan användas för att omvandla den specifika vikten d 20 t till den relativa densiteten d 20 20.

TABELL 4 Temperaturkorrektionen c för densiteten hos vin med en alkoholhalt av lägst 13 % vol. som innehåller restsocker, bestämd med en pyrexpyknometer vid t °C, för att erhålla resultatet vid 20 °C

ρ 20 = ρ t ± c 1000 - om t° C är lägre än 20 °C + om t° C är högre än 20 °C

Vin med en alkoholhalt av 13 % vol. Vin med en alkoholhalt av 15 % vol. Vin med en alkoholhalt av 17 % vol. Densitet Densitet Densitet 1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,120 1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,120 1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,120 Temperatur (°C) 10o 2,36 2,71 3,06 3,42 3,72 3,96 4,32 2,64 2,99 3,36 3,68 3,99 4,30 4,59 2,94 3,29 3,64 3,98 4,29 4,60 4,89 11o 2,17 2,49 2,80 2,99 3,39 3,65 3,90 2,42 2,73 3,05 3,34 3,63 3,89 4,15 2,69 3,00 3,32 3,61 3,90 4,16 4,41 12o 1,97 2,25 2,53 2,79 3,05 3,29 3,52 2,19 2,47 2,75 3,01 3,27 3,51 3,73 2,42 2,70 2,98 3,24 3,50 3,74 3,96 13o 1,78 2,02 2,25 2,47 2,69 2,89 3,09 1,97 2,21 2,44 2,66 2,87 3,08 3,29 2,18 2,42 2,64 2,87 3,08 3,29 3,49 14o 1,57 1,78 1,98 2,16 2,35 2,53 2,70 1,74 1,94 2,14 2,32 2,52 2,69 2,86 1,91 2,11 2,31 2,50 2,69 2,86 3,03 15o 1,32 1,49 1,66 1,82 1,97 2,12 2,26 1,46 1,63 1,79 1,95 2,10 2,25 2,39 1,60 1,77 1,93 2,09 2,24 2,39 2,53 16o 1,08 1,22 1,36 1,48 1,61 1,73 1,84 1,18 1,32 1,46 1,59 1,71 1,83 1,94 1,30 1,44 1,58 1,71 1,83 1,95 2,06 17o 0,83 0,94 1,04 1,13 1,22 1,31 1,40 0,91 1,02 1,12 1,21 1,30 1,39 1,48 1,00 1,10 1,20 1,30 1,39 1,48 1,56 18o 0,58 0,64 0,71 0,78 0,84 0,89 0,95 0,63 0,69 0,76 0,83 0,89 0,94 1,00 0,69 0,75 0,82 0,89 0,95 1,00 1,06 19o 0,30 0,34 0,37 0,40 0,43 0,46 0,49 0,33 0,37 0,40 0,43 0,46 0,49 0,52 0,36 0,39 0,42 0,46 0,49 0,52 0,54 20o 21o 0,30 0,33 0,36 0,40 0,43 0,46 0,49 0,33 0,36 0,39 0,43 0,46 0,49 0,51 0,35 0,39 0,42 0,45 0,48 0,51 0,54 22o 0,60 0,67 0,73 0,80 0,85 0,91 0,98 0,65 0,72 0,78 0,84 0,90 0,96 1,01 0,71 0,78 0,84 0,90 0,96 1,01 1,07 23o 0,93 1,02 1,12 1,22 1,30 1,39 1,49 1,01 1,10 1,20 1,29 1,38 1,46 1,55 1,10 1,19 1,29 1,38 1,46 1,55 1,63 24o 1,27 1,39 1,50 1,61 1,74 1,84 1,95 1,37 1,49 1,59 1,72 1,84 1,95 2,06 1,48 1,60 1,71 1,83 1,95 2,06 2,17 25o 1,61 1,75 1,90 2,05 2,19 2,33 2,47 1,73 1,87 2,02 2,17 2,31 2,45 2,59 1,87 2,01 2,16 2,31 2,45 2,59 2,73 26o 1,94 2,12 2,29 2,47 2,63 2,79 2,95 2,09 2,27 2,44 2,62 2,78 2,94 3,10 2,26 2,44 2,61 2,79 2,95 3,11 3,26 27o 2,30 2,51 2,70 2,90 3,09 3,27 3,44 2,48 2,68 2,87 3,07 3,27 3,45 3,62 2,67 2,88 3,07 3,27 3,46 3,64 3,81 28o 2,66 2,90 3,13 3,35 3,57 3,86 4,00 2,86 3,10 3,23 3,55 3,77 3,99 4,20 3,08 3,31 3,55 3,76 3,99 4,21 4,41 29o 3,05 3,31 3,56 3,79 4,04 4,27 4,49 3,28 3,53 3,77 4,02 4,26 4,49 4,71 3,52 3,77 4,01 4,26 4,50 4,73 4,95 30o 3,44 3,70 3,99 4,28 4,54 4,80 5,06 3,68 3,94 4,23 4,52 4,79 5,05 5,30 3,95 4,22 4,51 4,79 5,07 5,32 5,57

Vin med en alkoholhalt av 19 % vol. Vin med en alkoholhalt av 21 % vol. Densitet Densitet 1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,120 1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,120 Temperatur (°C) 10o 3,27 3,62 3,97 4,30 4,62 4,92 5,21 3,62 3,97 4,32 4,66 4,97 5,27 5,56 11o 2,99 3,30 3,61 3,90 4,19 4,45 4,70 3,28 3,61 3,92 4,22 4,50 4,76 5,01 12o 2,68 2,96 3,24 3,50 3,76 4,00 4,21 2,96 3,24 3,52 3,78 4,03 4,27 4,49 13o 2,40 2,64 2,87 3,09 3,30 3,51 3,71 2,64 2,88 3,11 3,33 3,54 3,74 3,95 14o 2,11 2,31 2,51 2,69 2,88 3,05 3,22 2,31 2,51 2,71 2,89 3,08 3,25 3,43 15o 1,76 1,93 2,09 2,25 2,40 2,55 2,69 1,93 2,10 2,26 2,42 2,57 2,72 2,86 16o 1,43 1,57 1,70 1,83 1,95 2,08 2,18 1,56 1,70 1,84 1,97 2,09 2,21 2,32 17o 1,09 1,20 1,30 1,39 1,48 1,57 1,65 1,20 1,31 1,41 1,50 1,59 1,68 1,77 18o 0,76 0,82 0,88 0,95 1,01 1,06 1,12 0,82 0,88 0,95 1,01 1,08 1,13 1,18 19o 0,39 0,42 0,45 0,49 0,52 0,55 0,57 0,42 0,46 0,49 0,52 0,55 0,58 0,61 20o 21o 0,38 0,42 0,45 0,48 0,51 0,54 0,57 0,41 0,45 0,48 0,51 0,54 0,57 0,60 22o 0,78 0,84 0,90 0,96 1,02 1,07 1,13 0,84 0,90 0,96 1,02 1,08 1,14 1,19 23o 1,19 1,28 1,38 1,47 1,55 1,64 1,72 1,29 1,39 1,48 1,57 1,65 1,74 1,82 24o 1,60 1,72 1,83 1,95 2,06 2,18 2,29 1,73 1,85 1,96 2,08 2,19 2,31 2,42 25o 2,02 2,16 2,31 2,46 2,60 2,74 2,88 2,18 2,32 2,47 2,62 2,76 2,90 3,04 26o 2,44 2,62 2,79 2,96 3,12 3,28 3,43 2,53 2,81 2,97 3,15 3,31 3,47 3,62 27o 2,88 3,08 3,27 3,42 3,66 3,84 4,01 3,10 3,30 3,47 3,69 3,88 4,06 4,23 28o 3,31 3,54 3,78 4,00 4,22 4,44 4,64 3,56 3,79 4,03 4,25 4,47 4,69 4,89 29o 3,78 4,03 4,27 4,52 4,76 4,99 5,21 4,06 4,31 4,55 4,80 5,04 5,27 5,48 30o 4,24 4,51 4,80 5,08 5,36 5,61 5,86 4,54 4,82 5,11 5,39 5,66 5,91 6,16

TABELL 5 Temperaturkorrektionen c för densiteten hos torra viner och alkoholfria torra viner, bestämd med en areometer eller en pyknometer av vanligt glas vid t °C, för att erhålla resultatet vid 20 °C

ρ 20 = ρ t ± c 1000 - om t° C är lägre än 20 °C + om t° C är högre än 20 °C

Alkoholhalt 0 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 Temperatur (°C) 10o 1,45 1,51 1,55 1,58 1,64 1,70 1,78 1,88 1,98 2,09 2,21 2,34 2,47 2,60 2,75 2,90 3,06 3,22 3,39 3,57 3,75 3,93 4,12 4,31 11o 1,35 1,40 1,43 1,47 1,52 1,58 1,65 1,73 1,83 1,93 2,03 2,15 2,26 2,38 2,51 2,65 2,78 2,93 3,08 3,24 3,40 3,57 3,73 3,90 12o 1,24 1,28 1,31 1,34 1,39 1,44 1,50 1,58 1,66 1,75 1,84 1,94 2,04 2,15 2,26 2,38 2,51 2,63 2,77 2,91 3,05 3,19 3,34 3,49 13o 1,12 1,16 1,18 1,21 1,25 1,30 1,35 1,42 1,49 1,56 1,64 1,73 1,82 1,91 2,01 2,11 2,22 2,33 2,45 2,57 2,69 2,81 2,95 3,07 14o 0,99 1,03 1,05 1,07 1,11 1,14 1,19 1,24 1,31 1,37 1,44 1,52 1,59 1,67 1,75 1,84 1,93 2,03 2,13 2,23 2,33 2,44 2,55 2,66 15o 0,86 0,89 0,90 0,92 0,95 0,98 1,02 1,07 1,12 1,17 1,23 1,29 1,35 1,42 1,49 1,56 1,63 1,71 1,80 1,88 1,96 2,05 2,14 2,23 16o 0,71 0,73 0,74 0,76 0,78 0,81 0,84 0,87 0,91 0,96 0,99 1,05 1,10 1,15 1,21 1,27 1,33 1,39 1,45 1,52 1,59 1,66 1,73 1,80 17o 0,55 0,57 0,57 0,59 0,60 0,62 0,65 0,67 0,70 0,74 0,77 0,81 0,84 0,88 0,92 0,96 1,01 1,05 1,11 1,15 1,20 1,26 1,31 1,36 18o 0,38 0,39 0,39 0,40 0,41 0,43 0,44 0,46 0,48 0,50 0,52 0,55 0,57 0,60 0,62 0,65 0,68 0,71 0,74 0,78 0,81 0,85 0,88 0,91 19o 0,19 0,20 0,20 0,21 0,21 0,22 0,23 0,24 0,25 0,26 0,27 0,28 0,29 0,30 0,32 0,33 0,35 0,36 0,38 0,39 0,41 0,43 0,44 0,46 20o 21o 0,21 0,22 0,22 0,23 0,23 0,24 0,25 0,25 0,26 0,27 0,29 0,29 0,31 0,32 0,34 0,35 0,36 0,38 0,39 0,41 0,43 0,44 0,46 0,48 22o 0,43 0,45 0,45 0,46 0,47 0,49 0,50 0,52 0,54 0,56 0,58 0,60 0,63 0,65 0,68 0,71 0,73 0,77 0,80 0,83 0,86 0,89 0,93 0,96 23o 0,67 0,69 0,70 0,71 0,72 0,74 0,77 0,79 0,82 0,85 0,88 0,91 0,95 0,99 1,03 1,07 1,12 1,16 1,21 1,25 1,30 1,35 1,40 1,45 24o 0,91 0,93 0,95 0,97 0,99 1,01 1,04 1,07 1,11 1,15 1,20 1,24 1,29 1,34 1,39 1,45 1,50 1,56 1,62 1,69 1,76 1,82 1,88 1,95 25o 1,16 1,19 1,21 1,23 1,26 1,29 1,33 1,37 1,42 1,47 1,52 1,57 1,63 1,70 1,76 1,83 1,90 1,97 2,05 2,13 2,21 2,29 2,37 2,45 26o 1,42 1,46 1,49 1,51 1,54 1,58 1,62 1,67 1,73 1,79 1,85 1,92 1,99 2,07 2,14 2,22 2,31 2,40 2,49 2,58 2,67 2,77 2,86 2,96 27o 1,69 1,74 1,77 1,80 1,83 1,88 1,93 1,98 2,05 2,12 2,20 2,27 2,35 2,44 2,53 2,63 2,72 2,82 2,93 3,04 3,14 3,25 3,37 3,48 28o 1,97 2,03 2,06 2,09 2,14 2,19 2,24 2,31 2,38 2,46 2,55 2,63 2,73 2,83 2,93 3,03 3,14 3,26 3,38 3,50 3,62 3,75 3,85 4,00 29o 2,26 2,33 2,37 2,40 2,45 2,50 2,57 2,64 2,73 2,82 2,91 2,99 3,11 3,22 3,34 3,45 3,58 3,70 3,84 3,97 4,11 4,25 4,39 4,54 30o 2,56 2,64 2,67 2,72 2,77 2,83 2,90 2,98 3,08 3,18 3,28 3,38 3,50 3,62 3,75 3,88 4,02 4,16 4,30 4,46 4,61 4,76 4,92 5,07

Anm: Denna tabell kan användas för att omvandla den specifika vikten d 20 t till den relativa densiteten d 20 20.

TABELL 6 Temperaturkorrektionen c för densiteten hos naturlig must och koncentrerad must, bestämd med en areometer eller en pyknometer av vanligt glas vid t °C, för att erhålla resultatet vid 20 °C

ρ 20 = ρ t ± c 1000 - om t° C är lägre än 20 °C + om t° C är högre än 20 °C

Alkoholhalt 1,05 1,06 1,07 1,08 1,09 1,10 1,11 1,12 1,13 1,14 1,15 1,16 1,18 1,20 1,22 1,24 1,26 1,28 1,30 1,32 1,34 1,36 Temperatur (°C) 10o 2,17 2,34 2,52 2,68 2,85 2,99 3,16 3,29 3,44 3,58 3,73 3,86 4,13 4,36 4,60 4,82 5,02 5,25 5,39 5,56 5,73 5,87 11o 2,00 2,16 2,29 2,44 2,59 2,73 2,86 2,99 3,12 3,24 3,37 3,48 3,71 3,94 4,15 4,33 4,52 4,69 4,85 5,01 5,15 5,29 12o 1,81 1,95 2,08 2,21 2,34 2,47 2,58 2,70 2,82 2,92 3,03 3,14 3,35 3,55 3,72 3,90 4,07 4,23 4,37 4,52 4,64 4,77 13o 1,62 1,74 1,85 1,96 2,07 2,17 2,28 2,38 2,48 2,59 2,68 2,77 2,94 3,11 3,28 3,44 3,54 3,72 3,86 3,99 4,12 4,24 14o 1,44 1,54 1,64 1,73 1,82 1,92 2,00 2,08 2,17 2,25 2,34 2,42 2,57 2,73 2,86 2,99 3,12 3,24 3,35 3,46 3,57 3,65 15o 1,21 1,29 1,37 1,45 1,53 1,60 1,68 1,75 1,82 1,89 1,97 2,03 2,16 2,28 2,40 2,51 2,61 2,71 2,80 2,89 2,94 3,01 16o 1,00 1,06 1,12 1,19 1,25 1,31 1,37 1,43 1,49 1,54 1,60 1,65 1,75 1,84 1,94 2,02 2,09 2,17 2,23 2,30 2,36 2,42 17o 0,76 0,82 0,86 0,91 0,96 1,00 1,05 1,09 1,14 1,18 1,22 1,25 1,32 1,39 1,46 1,52 1,57 1,63 1,67 1,71 1,75 1,79 18o 0,53 0,56 0,59 0,63 0,65 0,69 0,72 0,74 0,77 0,80 0,82 0,85 0,90 0,95 0,99 1,02 1,06 1,09 1,13 1,16 1,18 1,20 19o 0,28 0,30 0,31 0,33 0,35 0,36 0,38 0,39 0,41 0,42 0,43 0,43 0,46 0,48 0,50 0,52 0,54 0,55 0,57 0,58 0,59 0,60 20o 21o 0,28 0,29 0,31 0,33 0,34 0,36 0,37 0,39 0,40 0,41 0,43 0,44 0,46 0,48 0,51 0,54 0,56 0,57 0,58 0,59 0,60 0,60 22o 0,55 0,58 0,61 0,64 0,67 0,70 0,73 0,76 0,78 0,81 0,84 0,87 0,93 0,97 1,02 1,06 1,09 1,12 1,15 1,17 1,19 1,19 23o 0,85 0,90 0,95 0,99 1,04 1,08 1,12 1,16 1,21 1,25 1,29 1,32 1,39 1,46 1,52 1,58 1,62 1,68 1,72 1,75 1,77 1,79 24o 1,15 1,19 1,25 1,31 1,37 1,43 1,48 1,54 1,60 1,65 1,71 1,76 1,86 1,95 2,04 2,11 2,17 2,23 2,29 2,33 2,35 2,37 25o 1,44 1,52 1,59 1,67 1,74 1,81 1,88 1,95 2,02 2,09 2,16 2,22 2,34 2,45 2,55 2,64 2,74 2,81 2,87 2,90 2,92 2,96 26o 1,76 1,84 1,93 2,02 2,10 2,18 2,25 2,33 2,41 2,49 2,56 2,64 2,78 2,91 3,03 3,15 3,26 3,37 3,47 3,55 3,62 3,60 27o 2,07 2,16 2,26 2,36 2,46 2,56 2,65 2,74 2,83 2,91 3,00 3,07 3,24 3,39 3,55 3,69 3,82 3,94 4,04 4,14 4,23 4,30 28o 2,39 2,51 2,63 2,74 2,85 2,96 3,06 3,16 3,28 3,38 3,48 3,57 3,75 3,92 4,08 4,23 4,37 4,51 4,62 4,73 4,80 4,86 29o 2,74 2,86 2,97 3,09 3,22 3,34 3,46 3,57 3,69 3,80 3,90 4,00 4,20 4,39 4,58 4,74 4,90 5,05 5,19 5,31 5,40 5,48 30o 3,06 3,21 3,35 3,50 3,63 3,77 3,91 4,02 4,15 4,28 4,40 4,52 4,75 4,96 5,16 5,35 5,52 5,67 5,79 5,91 5,99 6,04

Anm: Denna tabell kan användas för att omvandla den specifika vikten d 20 t till den relativa densiteten d 20 20.

TABELL 7 Temperaturkorrektionen c för densiteten hos vin med en alkoholhalt av lägst 13 % vol. som innehåller restsocker, bestämd med en areometer eller en pyknometer av vanligt glas vid t °C, för att erhålla resultatet vid 20 °C

ρ 20 = ρ t ± c 1000 - om t° C är lägre än 20 °C + om t° C är högre än 20 °C

Vin med en alkoholhalt av 13 % vol. Vin med en alkoholhalt av 15 % vol. Vin med en alkoholhalt av 17 % vol. Densitet Densitet Densitet 1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,120 1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,120 1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,120 Temperatur (°C) 10o 2,24 2,58 2,93 3,27 3,59 3,89 4,18 2,51 2,85 3,20 3,54 3,85 4,02 4,46 2,81 3,15 3,50 3,84 4,15 4,45 4,74 11o 2,06 2,37 2,69 2,97 3,26 3,53 3,78 2,31 2,61 2,93 3,21 3,51 3,64 4,02 2,57 2,89 3,20 3,49 3,77 4,03 4,28 12o 1,87 2,14 2,42 2,67 2,94 3,17 3,40 2,09 2,36 2,64 2,90 3,16 3,27 3,61 2,32 2,60 2,87 3,13 3,39 3,63 3,84 13o 1,69 1,93 2,14 2,37 2,59 2,80 3,00 1,88 2,12 2,34 2,56 2,78 2,88 3,19 2,09 2,33 2,55 2,77 2,98 3,19 3,39 14o 1,49 1,70 1,90 2,09 2,27 2,44 2,61 1,67 1,86 2,06 2,25 2,45 2,51 2,77 1,83 2,03 2,23 2,42 2,61 2,77 2,94 15o 1,25 1,42 1,59 1,75 1,90 2,05 2,19 1,39 1,56 1,72 1,88 2,03 2,11 2,32 1,54 1,71 1,87 2,03 2,18 2,32 2,47 16o 1,03 1,17 1,30 1,43 1,55 1,67 1,78 1,06 1,27 1,40 1,53 1,65 1,77 1,88 1,25 1,39 1,52 1,65 1,77 1,89 2,00 17o 0,80 0,90 1,00 1,09 1,17 1,27 1,36 0,87 0,98 1,08 1,17 1,26 1,35 1,44 0,96 1,06 1,16 1,26 1,35 1,44 1,52 18o 0,54 0,61 0,68 0,75 0,81 0,86 0,92 0,60 0,66 0,73 0,80 0,85 0,91 0,97 0,66 0,72 0,79 0,86 0,92 0,97 1,03 19o 0,29 0,33 0,36 0,39 0,42 0,45 0,48 0,32 0,36 0,39 0,42 0,45 0,48 0,51 0,35 0,38 0,41 0,45 0,48 0,51 0,53 20o 21o 0,29 0,32 0,35 0,39 0,42 0,45 0,47 0,32 0,35 0,38 0,42 0,45 0,48 0,50 0,34 0,38 0,41 0,44 0,47 0,50 0,53 22o 0,57 0,64 0,70 0,76 0,82 0,88 0,93 0,63 0,69 0,75 0,81 0,87 0,93 0,98 0,68 0,75 0,81 0,87 0,93 0,99 1,04 23o 0,89 0,98 1,08 1,17 1,26 1,34 1,43 0,97 1,06 1,16 1,25 1,34 1,42 1,51 1,06 1,15 1,25 1,34 1,42 1,51 1,59 24o 1,22 1,34 1,44 1,56 1,68 1,79 1,90 1,32 1,44 1,54 1,66 1,78 1,89 2,00 1,43 1,56 1,65 1,77 1,89 2,00 2,11 25o 1,61 1,68 1,83 1,98 2,12 2,26 2,40 1,66 1,81 1,96 2,11 2,25 2,39 2,52 1,80 1,94 2,09 2,24 2,39 2,52 2,66 26o 1,87 2,05 2,22 2,40 2,56 2,71 2,87 2,02 2,20 2,37 2,54 2,70 2,85 3,01 2,18 2,36 2,53 2,71 2,86 3,02 3,17 27o 2,21 2,42 2,60 2,80 3,00 3,18 3,35 2,39 2,59 2,78 2,98 3,17 3,35 3,52 2,58 2,78 2,97 3,17 3,36 3,54 3,71 28o 2,56 2,80 3,02 3,25 3,47 3,67 3,89 2,75 2,89 3,22 3,44 3,66 3,86 4,07 2,97 3,21 3,44 3,66 3,88 4,09 4,30 29o 2,93 3,19 3,43 3,66 3,91 4,14 4,37 3,16 3,41 3,65 3,89 4,13 4,36 4,59 3,40 3,66 3,89 4,13 4,38 4,61 4,82 30o 3,31 3,57 3,86 4,15 4,41 4,66 4,92 3,55 3,81 4,10 4,38 4,66 4,90 5,16 3,82 4,08 4,37 4,65 4,93 5,17 5,42

Vin med en alkoholhalt av 19 % vol. Vin med en alkoholhalt av 21 % vol. Densitet Densitet 1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,120 1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,120 Temperatur (°C) 10o 3,14 3,48 3,83 4,17 4,48 4,78 5,07 3,50 3,84 4,19 4,52 4,83 5,12 5,41 11o 2,87 3,18 3,49 3,78 4,06 4,32 4,57 3,18 3,49 3,80 4,09 4,34 4,63 4,88 12o 2,58 2,86 3,13 3,39 3,65 3,88 4,10 2,86 3,13 3,41 3,67 3,92 4,15 4,37 13o 2,31 2,55 2,77 2,99 3,20 3,41 3,61 2,56 2,79 3,01 3,23 3,44 3,65 3,85 14o 2,03 2,23 2,43 2,61 2,80 2,96 3,13 2,23 2,43 2,63 2,81 3,00 3,16 3,33 15o 1,69 1,86 2,02 2,18 2,33 2,48 2,62 1,86 2,03 2,19 2,35 2,50 2,65 2,80 16o 1,38 1,52 1,65 1,78 1,90 2,02 2,13 1,51 1,65 1,78 1,91 2,03 2,15 2,26 17o 1,06 1,16 1,26 1,35 1,44 1,53 1,62 1,15 1,25 1,35 1,45 1,54 1,63 1,71 18o 0,73 0,79 0,85 0,92 0,98 1,03 1,09 0,79 0,85 0,92 0,98 1,05 1,10 1,15 19o 0,38 0,41 0,44 0,48 0,51 0,52 0,56 0,41 0,44 0,47 0,51 0,54 0,57 0,59 20o 21o 0,37 0,41 0,44 0,47 0,50 0,53 0,56 0,41 0,44 0,47 0,51 0,54 0,57 0,59 22o 0,75 0,81 0,87 0,93 0,99 1,04 1,10 0,81 0,88 0,94 1,00 1,06 1,10 1,17 23o 1,15 1,30 1,34 1,43 1,51 1,60 1,68 1,25 1,34 1,44 1,63 1,61 1,70 1,78 24o 1,55 1,67 1,77 1,89 2,00 2,11 2,23 1,68 1,80 1,90 2,02 2,13 2,25 2,36 25o 1,95 2,09 2,24 2,39 2,53 2,67 2,71 2,11 2,25 2,40 2,55 2,69 2,83 2,97 26o 2,36 2,54 2,71 2,89 3,04 3,20 3,35 2,55 2,73 2,90 3,07 3,22 3,38 3,54 27o 2,79 2,99 3,18 3,38 3,57 3,75 3,92 3,01 3,20 3,40 3,59 3,78 3,96 4,13 28o 3,20 3,44 3,66 3,89 4,11 4,32 4,53 3,46 3,69 3,93 4,15 4,36 4,58 4,77 29o 3,66 3,92 4,15 4,40 4,64 4,87 5,08 3,95 4,20 4,43 4,68 4,92 5,15 5,36 30o 4,11 4,37 4,66 4,94 5,22 5,46 5,71 4,42 4,68 4,97 5,25 5,53 5,77 6,02

2. BESTÄMNING AV SOCKERHALTEN I DRUVMUST, KONCENTRERAD DRUVMUST OCH RENAD KONCENTRERAD DRUVMUST MED REFRAKTOMETRI

1. PRINCIPER FÖR METODEN

Brytningsindex vid 20 °C, uttryckt antingen som absolut värde eller som viktprocent sackaros, söks i respektive tabeller för bestämning av sockerhalten i g/l och i g/kg för druvmust, koncentrerad druvmust och renad koncentrerad druvmust.

2. APPARATUR

2.1 Refraktometer enligt Abbé

Refraktometern skall vara försedd med en skala som visar

viktprocent sackaros, med 0,1 % noggrannhet,

eller brytningsindex, med fyra decimaler.

Refraktometern skall vara försedd med en termometer med en skala från minst + 15 °C till + 25 °C samt med en anordning för att cirkulera vatten så att bestämning kan göras vid en temperatur av 20 ± 5 °C.

Bruksanvisningen för denna apparat skall följas noggrant, i synnerhet vad gäller kalibrering och ljuskälla.

3. BEREDNING AV PROVET

3.1 Must och koncentrerad must

Passera vid behov musten genom fyra lager med torr gasväv. Kassera de första filtrerade dropparna och utför bestämningen på den filtrerade produkten.

3.2 Renad koncentrerad must

Beroende på koncentrationen används antingen själva den renade koncentrerade musten eller en lösning som erhålls genom att 200 g renad koncentrerad must späds med vatten till 500 g. All vägning skall utföras noggrant.

4. METOD

Värm provet till en temperatur av omkring 20 °C. Placera ett mindre analysprov på refraktometerns nedre prisma och se till att analysprovet fördelas enhetligt över glasytan när prismorna pressas hårt mot varandra. Utför mätningen i enlighet med anvisningarna för det mätinstrument som används.

Läs av viktprocenten sackaros med en noggrannhet av 0,1 % eller brytningsindex med fyra decimaler.

Utför minst två bestämningar på samma prov. Notera temperaturen t °C.

5. BERÄKNING

5.1 Temperaturkorrektion

Instrument med skala för viktprocent sackaros. Tabell 1 används för temperaturkorrektion.

Instrument med skala för brytningsindex: index mätt vid t °C i tabell 2 används för att finna motsvarande värde för viktprocenten sackaros vid t °C (spalt 1). Använd tabell 1 för att korrigera värdet och räkna fram koncentrationen vid 20 °C.

5.2 Sockerhalt i must och koncentrerad must

Sök viktprocenten sackaros vid 20 °C i tabell 2 och läs på samma rad av sockerhalten i g/l och g/kg. Sockerhalten uttrycks som invertsocker med en decimal.

5.3 Sockerhalt i renad koncentrerad must

Sök viktprocenten sackaros vid 20 °C i tabell 3 och läs på samma rad av sockerhalten i g/l och g/kg. Sockerhalten uttrycks som invertsocker med en decimal.

Om mätningen görs på utspädd renad koncentrerad must multipliceras resultatet med spädningsfaktorn.

5.4 Brytningsindex för must, koncentrerad must och renad koncentrerad must

Sök viktprocenten sackaros vid 20 °C i tabell 2 och läs på samma rad av brytningsindex vid 20 °C. Index uttrycks med fyra decimaler.

TABELL 1 Korrektion som skall göras när viktprocenten sackaros har bestämts vid en annan temperatur än 20 °C

Temperatur °C Sackaros i g/100 g produkt 5 10 15 20 30 40 50 60 70 75 Subtrahera 15 0,25 0,27 0,31 0,31 0,34 0,35 0,36 0,37 0,36 0,36 16 0,21 0,23 0,27 0,27 0,29 0,31 0,31 0,32 0,31 0,23 17 0,16 0,18 0,20 0,20 0,22 0,23 0,23 0,23 0,20 0,17 18 0,11 0,12 0,14 0,15 0,16 0,16 0,15 0,12 0,12 0,09 19 0,06 0,07 0,08 0,08 0,08 0,09 0,09 0,08 0,07 0,05 Addera 21 0,06 0,07 0,07 0,07 0,07 0,07 0,07 0,07 0,07 0,07 22 0,12 0,14 0,14 0,14 0,14 0,14 0,14 0,14 0,14 0,14 23 0,18 0,20 0,20 0,21 0,21 0,21 0,21 0,22 0,22 0,22 24 0,24 0,26 0,26 0,27 0,28 0,28 0,28 0,28 0,29 0,29 25 0,30 0,32 0,32 0,34 0,36 0,36 0,36 0,36 0,36 0,37

Temperaturen får inte avvika från 20 °C med mer än ± 5 °C.

TABELL 2 Tabell som visar sockerhalten i renad koncentrerad must i g/l och g/kg, bestämd med en refraktometer som visar antingen viktprocenten av sackaros vid 20 °C eller brytningsindexet vid 20 °C. Densititeten vid 20 °C visas också.

(Sackaros % m/m) (Brytningsindex vid 20 °C) (Densitet vid 20 °C) (Socker i g/l) (Socker i g/kg) (Alkoholhalt % vol. vid 20 °C) 10.0 1.34781 1.0390 82.3 79.2 4,89 10.1 1.34798 1.0394 83.4 80.2 4,95 10.2 1.34814 1.0398 84.5 81.3 5,02 10.3 1.34830 1.0402 85.6 82.2 5,09 10.4 1.34845 1.0406 86.6 83.2 5,14 10.5 1.34860 1.0410 87.6 84.1 5,20 10.6 1.34875 1.0414 88.6 85.1 5,26 10.7 1.34890 1.0419 89.7 86.1 5,33 10.8 1.34906 1.0423 90.8 87.1 5,39 10.9 1.34921 1.0427 91.8 88.1 5,45 11.0 1.34936 1.0431 92.9 89.1 5,52 11.1 1.34952 1.0435 94.0 90.0 5,58 11.2 1.34968 1.0439 95.0 91.0 5,64 11.3 1.34984 1.0443 96.1 92.0 5,71 11.4 1.34999 1.0447 97.1 92.9 5,77 11.5 1.35015 1.0452 98.2 94.0 5,83 11.6 1.35031 1.0456 99.3 95.0 5,90 11.7 1.35046 1.0460 100.3 95.9 5,96 11.8 1.35062 1.0464 101.4 96.9 6,02 11.9 1.35077 1.0468 102.5 97.9 6,09 12.0 1.35092 1.0473 103.6 98.9 6,15 12.1 1.35108 1.0477 104.7 99.9 6,22 12.2 1.35124 1.0481 105.7 100.8 6,28 12.3 1.35140 1.0485 106.8 101.9 6,35 12.4 1.35156 1.0489 107.9 102.9 6,41 12.5 1.35172 1.0494 109.0 103.8 6,47 12.6 1.35187 1.0498 110.0 104.8 6,53 12.7 1.35203 1.0502 111.1 105.8 6,60 12.8 1.35219 1.0506 112.2 106.8 6,66 12.9 1.35234 1.0510 113.2 107.8 6,73 13.0 1.35249 1.0514 114.3 108.7 6,79 13.1 1.35266 1.0519 115.4 109.7 6,86 13.2 1.35282 1.0523 116.5 110.7 6,92 13.3 1.35298 1.0527 117.6 111.7 6,99 13.4 1.35313 1.0531 118.6 112.6 7,05 13.5 1.35329 1.0536 119.7 113.6 7,11 13.6 1.35345 1.0540 120.8 114.6 7,18 13.7 1.35360 1.0544 121.8 115.6 7,24 13.8 1.35376 1.0548 122.9 116.5 7,30 13.9 1.35391 1.0552 124.0 117.5 7,37 14.0 1.35407 1.0557 125.1 118.5 7,43 14.1 1.35424 1.0561 126.2 119.5 7,50 14.2 1.35440 1.0565 127.3 120.5 7,56 14.3 1.35456 1.0569 128.4 121.5 7,63 14.4 1.35472 1.0574 129.5 122.5 7,69 14.5 1.35488 1.0578 130.6 123.4 7,76 14.6 1.35503 1.0582 131.6 124.4 7,82 14.7 1.35519 1.0586 132.7 125.4 7,88 14.8 1.35535 1.0591 133.8 126.3 7,95 14.9 1.35551 1.0595 134.9 127.3 8,01 15.0 1.35567 1.0599 136.0 128.3 8,08 15.1 1.35583 1.0603 137.1 129.3 8,15 15.2 1.35599 1.0608 138.2 130.3 8,21 15.3 1.35615 1.0612 139.3 131.3 8,27 15.4 1.35631 1.0616 140.4 132.3 8,34 15.5 1.35648 1.0621 141.5 133.2 8,41 15.6 1.35664 1.0625 142.6 134.2 8,47 15.7 1.35680 1.0629 143.7 135.2 8,54 15.8 1.35696 1.0633 144.8 136.2 8,60 15.9 1.35712 1.0638 145.9 137.2 8,67 16.0 1.35728 1.0642 147.0 138.1 8,73 16.1 1.35744 1.0646 148.1 139.1 8,80 16.2 1.35760 1.0651 149.2 140.1 8,86 16.3 1.35776 1.0655 150.3 141.1 8,93 16.4 1.35793 1.0660 151.5 142.1 9,00 16.5 1.35809 1.0664 152.6 143.1 9,06 16.6 1.35825 1.0668 153.7 144.1 9,13 16.7 1.35842 1.0672 154.8 145.0 9,20 16.8 1.35858 1.0677 155.9 146.0 9,26 16.9 1.35874 1.0681 157.0 147.0 9,33 17.0 1.35890 1.0685 158.1 148.0 9,39 17.1 1.35907 1.0690 159.3 149.0 9,46 17.2 1.35923 1.0694 160.4 150.0 9,53 17.3 1.35939 1.0699 161.5 151.0 9,59 17.4 1.35955 1.0703 162.6 151.9 9,66 17.5 1.35972 1.0707 163.7 152.9 9,73 17.6 1.35988 1.0711 164.8 153.9 9,79 17.7 1.36004 1.0716 165.9 154.8 9,86 17.8 1.36020 1.0720 167.0 155.8 9,92 17.9 1.36036 1.0724 168.1 156.8 9,99 18.0 1.36053 1.0729 169.3 157.8 10,06 18.1 1.36070 1.0733 170.4 158.8 10,12 18.2 1.36086 1.0738 171.5 159.7 10,19 18.3 1.36102 1.0742 172.6 160.7 10,25 18.4 1.36119 1.0746 173.7 161.6 10,32 18.5 1.36136 1.0751 174.9 162.6 10,39 18.6 1.36152 1.0755 176.0 163.6 10,46 18.7 1.36169 1.0760 177.2 164.6 10,53 18.8 1.36185 1.0764 178.3 165.6 10,59 18.9 1.36201 1.0768 179.4 166.6 10,66 19.0 1.36217 1.0773 180.5 167.6 10,72 19.1 1.36234 1.0777 181.7 168.6 10,80 19.2 1.36251 1.0782 182.8 169.5 10,86 19.3 1.36267 1.0786 183.9 170.5 10,93 19.4 1.36284 1.0791 185.1 171.5 11,00 19.5 1.36301 1.0795 186.3 172.5 11,07 19.6 1.36318 1.0800 187.4 173.5 11,13 19.7 1.36335 1.0804 188.6 174.5 11,21 19.8 1.36351 1.0809 189.7 175.5 11,27 19.9 1.36367 1.0813 190.8 176.5 11,34 20.0 1.36383 1.0817 191.9 177.4 11,40 20.1 1.36400 1.0822 193.1 178.4 11,47 20.2 1.36417 1.0826 194.2 179.4 11,54 20.3 1.36434 1.0831 195.3 180.4 11,60 20.4 1.36451 1.0835 196.5 181.4 11,67 20.5 1.36468 1.0840 197.7 182.3 11,75 20.6 1.36484 1.0844 198.8 183.3 11,81 20.7 1.36501 1.0849 200.0 184.3 11,88 20.8 1.36518 1.0853 201.1 185.3 11,96 20.9 1.36534 1.0857 202.2 186.2 12,01 21.0 1.36550 1.0862 203.3 187.2 12,08 21.1 1.36568 1.0866 204.5 188.2 12,15 21.2 1.36585 1.0871 205.7 189.2 12,22 21.3 1.36601 1.0875 206.8 190.2 12,29 21.4 1.36618 1.0880 207.9 191.1 12,35 21.5 1.36635 1.0884 209.1 192.1 12,42 21.6 1.36652 1.0889 210.3 193.1 12,49 21.7 1.36669 1.0893 211.4 194.1 12,56 21.8 1.36685 1.0897 212.5 195.0 12,63 21.9 1.36702 1.0902 213.6 196.0 12,69 22.0 1.36719 1.0906 214.8 196.9 12,76 22.1 1.36736 1.0911 216.0 198.0 12,83 22.2 1.36753 1.0916 217.2 199.0 12,90 22.3 1.36770 1.0920 218.3 199.9 12,97 22.4 1.36787 1.0925 219.5 200.9 13,04 22.5 1.36804 1.0929 220.6 201.8 13,11 22.6 1.36820 1.0933 221.7 202.8 13,17 22.7 1.36837 1.0938 222.9 203.8 13,24 22.8 1.36854 1.0943 224.1 204.8 13,31 22.9 1.36871 1.0947 225.2 205.8 13,38 23.0 1.36888 1.0952 226.4 206.7 13,45 23.1 1.36905 1.0956 227.6 207.7 13,52 23.2 1.36922 1.0961 228.7 208.7 13,59 23.3 1.36939 1.0965 229.9 209.7 13,66 23.4 1.36956 1.0970 231.1 210.7 13,73 23.5 1.36973 1.0975 232.3 211.6 13,80 23.6 1.36991 1.0979 233.4 212.6 13,87 23.7 1.37008 1.0984 234.6 213.6 13,94 23.8 1.37025 1.0988 235.8 214.6 14,01 23.9 1.37042 1.0993 237.0 215.6 14,08 24.0 1.37059 1.0998 238.2 216.6 14,15 24.1 1.37076 1.1007 239.3 217.4 14,22 24.2 1.37093 1.1011 240.3 218.2 14,28 24.3 1.37110 1.1016 241.6 219.4 14,35 24.4 1.37128 1.1022 243.0 220.5 14,44 24.5 1.37145 1.1026 244.0 221.3 14,50 24.6 1.37162 1.1030 245.0 222.1 14,56 24.7 1.37180 1.1035 246.4 223.2 14,64 24.8 1.37197 1.1041 247.7 224.4 14,72 24.9 1.37214 1.1045 248.7 225.2 14,78 25.0 1.37232 1.1049 249.7 226.0 14,84 25.1 1.37249 1.1053 250.7 226.8 14,90 25.2 1.37266 1.1057 251.7 227.6 14,96 25.3 1.37283 1.1062 253.0 228.7 15,03 25.4 1.37300 1.1068 254.4 229.9 15,11 25.5 1.37317 1.1072 255.4 230.7 15,17 25.6 1.37335 1.1076 256.4 231.5 15,23 25.7 1.37353 1.1081 257.8 232.6 15,32 25.8 1.37370 1.1087 259.1 233.7 15,39 25.9 1.37387 1.1091 260.1 234.5 15,45 26.0 1.37405 1.1095 261.1 235.3 15,51 26.1 1.37423 1.1100 262.5 236.4 15,60 26.2 1.37440 1.1106 263.8 237.5 15,67 26.3 1.37457 1.1110 264.8 238.3 15,73 26.4 1.37475 1.1114 265.8 239.2 15,79 26.5 1.37493 1.1119 267.2 240.3 15,88 26.6 1.37510 1.1125 268.5 241.4 15,95 26.7 1.37528 1.1129 269.5 242.2 16,01 26.8 1.37545 1.1133 270.5 243.0 16,07 26.9 1.37562 1.1138 271.8 244.1 16,15 27.0 1.37580 1.1144 273.2 245.2 16,23 27.1 1.37598 1.1148 274.2 246.0 16,29 27.2 1.37615 1.1152 275.2 246.8 16,35 27.3 1.37632 1.1157 276.5 247.9 16,43 27.4 1.37650 1.1163 277.9 249.0 16,51 27.5 1.37667 1.1167 278.9 249.8 16,57 27.6 1.37685 1.1171 279.9 250.6 16,63 27.7 1.37703 1.1176 281.3 251.6 16,71 27.8 1.37721 1.1182 282.6 252.7 16,79 27.9 1.37739 1.1186 283.6 253.5 16,85 28.0 1.37757 1.1190 284.6 254.3 16,91 28.1 1.37775 1.1195 286.0 255.4 16,99 28.2 1.37793 1.1201 287.3 256.5 17,07 28.3 1.37810 1.1205 288.3 257.3 17,13 28.4 1.37828 1.1209 289.3 258.1 17,19 28.5 1.37846 1.1214 290.7 259.2 17,27 28.6 1.37863 1.1220 292.0 260.3 17,35 28.7 1.37881 1.1224 293.0 261.0 17,41 28.8 1.37899 1.1228 294.0 261.8 17,47 28.9 1.37917 1.1233 295.3 262.9 17,55 29.0 1.37935 1.1239 296.7 264.0 17,63 29.1 1.37953 1.1244 298.1 265.1 17,71 29.2 1.37971 1.1250 299.4 266.1 17,79 29.3 1.37988 1.1254 300.4 266.9 17,85 29.4 1.38006 1.1258 301.4 267.7 17,91 29.5 1.38024 1.1263 302.8 268.8 17,99 29.6 1.38042 1.1269 304.1 269.9 18,07 29.7 1.38060 1.1273 305.1 270.6 18,13 29.8 1.38078 1.1277 306.1 271.4 18,19 29.9 1.38096 1.1282 307.4 272.5 18,26 30.0 1.38114 1.1288 308.8 273.6 18,35 30.1 1.38132 1.1293 310.0 274.5 18,42 30.2 1.38150 1.1298 311.2 275.5 18,49 30.3 1.38168 1.1302 312.4 276.4 18,56 30.4 1.38186 1.1307 313.6 277.3 18,63 30.5 1.38204 1.1312 314.8 278.3 18,70 30.6 1.38222 1.1317 316.0 279.2 18,77 30.7 1.38240 1.1322 317.2 280.2 18,85 30.8 1.38258 1.1327 318.4 281.1 18,92 30.9 1.38276 1.1332 319.6 282.0 18,99 31.0 1.38294 1.1336 320.8 283.0 19,06 31.1 1.38312 1.1341 322.0 283.9 19,13 31.2 1.38330 1.1346 323.2 284.9 19,20 31.3 1.38349 1.1351 324.4 285.8 19,27 31.4 1.38367 1.1356 325.6 286.8 19,35 31.5 1.38385 1.1361 326.8 287.7 19,42 31.6 1.38403 1.1366 328.1 288.6 19,49 31.7 1.38421 1.1371 329.3 289.6 19,56 31.8 1.38440 1.1376 330.5 290.5 19,64 31.9 1.38458 1.1380 331.7 291.5 19,71 32.0 1.38476 1.1385 332.9 292.4 19,78 32.1 1.38494 1.1391 334.2 293.4 19,86 32.2 1.38513 1.1396 335.5 294.4 19,93 32.3 1.38531 1.1401 336.7 295.4 20,00 32.4 1.38550 1.1406 338.0 296.4 20,08 32.5 1.38568 1.1411 339.3 297.3 20,16 32.6 1.38586 1.1416 340.6 298.3 20,24 32.7 1.38605 1.1422 341.9 299.3 20,31 32.8 1.38623 1.1427 343.1 300.3 20,38 32.9 1.38642 1.1432 344.4 301.3 20,46 33.0 1.38660 1.1437 345.7 302.3 20,54 33.1 1.38678 1.1442 346.9 303.2 20,61 33.2 1.38697 1.1447 348.1 304.1 20,68 33.3 1.38715 1.1452 349.3 305.0 20,75 33.4 1.38734 1.1457 350.5 305.9 20,82 33.5 1.38753 1.1461 351.7 306.9 20,90 33.6 1.38771 1.1466 352.9 307.8 20,97 33.7 1.38790 1.1471 354.1 308.7 21,04 33.8 1.38808 1.1476 355.3 309.6 21,11 33.9 1.38827 1.1481 356.5 310.5 21,18 34.0 1.38845 1.1486 357.7 311.4 21,25 34.1 1.38864 1.1491 359.0 312.4 21,33 34.2 1.38882 1.1496 360.3 313.4 21,41 34.3 1.38901 1.1501 361.5 314.3 21,48 34.4 1.38919 1.1506 362.8 315.3 21,55 34.5 1.38938 1.1512 364.1 316.3 21,63 34.6 1.38957 1.1517 365.4 317.3 21,71 34.7 1.38975 1.1522 366.7 318.2 21,79 34.8 1.38994 1.1527 367.9 319.2 21,86 34.9 1.39012 1.1532 369.2 320.2 21,94 35.0 1.39031 1.1537 370.5 321.1 22,01 35.1 1.39050 1.1543 371.8 322.1 22,09 35.2 1.39069 1.1548 373.0 323.0 22,16 35.3 1.39087 1.1553 374.3 324.0 22,24 35.4 1.39106 1.1558 375.6 325.0 22,32 35.5 1.39125 1.1563 376,9 325.9 22,39 35.6 1.39144 1.1568 378.1 326.9 22,45 35.7 1.39163 1.1573 379.4 327.8 22,54 35.8 1.39181 1.1579 380.7 328.8 22,62 35.9 1.39200 1.1584 381.9 329.7 22,69 36.0 1.39219 1.1589 383.2 330.7 22,77 36.1 1.39238 1.1594 384.5 331.6 22,85 36.2 1.39257 1.1599 385.8 332.6 22,92 36.3 1.39276 1.1604 387.0 333.5 22,99 36.4 1.39295 1.1610 388.3 334.5 23,07 36.5 1.39314 1.1615 389.6 335.4 23,15 36.6 1.39332 1.1620 390.9 336.4 23,22 36.7 1.39351 1.1625 392.2 337.3 23,30 36.8 1.39370 1.1630 393.4 338.3 23,37 36.9 1.39389 1.1635 394.7 339.2 23,45 37.0 1.39408 1.1641 396.0 340.2 23,53 37.1 1.39427 1.1646 397.3 341.1 23,60 37.2 1.39446 1.1651 398.6 342.1 23,68 37.3 1.39465 1.1656 399.8 343.0 23,75 37.4 1.39484 1.1661 401.1 344.0 23,83 37.5 1.39504 1.1666 402.4 344.9 23,91 37.6 1.39523 1.1672 403.7 345.9 23,99 37.7 1.39542 1.1677 405.0 346.8 24,06 37.8 1.39561 1.1682 406.2 347.7 24,13 37.9 1.39580 1.1687 407.5 348.7 24,21 38.0 1.39599 1.1692 408.8 349.6 24,29 38.1 1.39618 1.1698 410.1 350.6 24,37 38.2 1.39637 1.1703 411.3 351.5 24,44 38.3 1.39657 1.1708 412.6 352.4 24,51 38.4 1.39676 1.1713 413.9 353.4 24,59 38.5 1.39695 1.1718 415.2 354.3 24,67 38.6 1.39714 1.1723 416.4 355.2 24,74 38.7 1.39733 1.1728 417.7 356.1 24,82 38.8 1.39753 1.1733 419.0 357.1 24,90 38.9 1.39772 1.1739 420.2 358.0 24,97 39.0 1.39791 1.1744 421.5 358.9 25,04 39.1 1.39810 1.1749 422.8 359.8 25,12 39.2 1.39830 1.1754 424.1 360.8 25,20 39.3 1.39849 1.1759 425.3 361.7 25,27 39.4 1.39869 1.1764 426.6 362.6 25,35 39.5 1.39888 1.1770 427.9 363.6 25,42 39.6 1.39907 1.1775 429.2 364.5 25,50 39.7 1.39927 1.1780 430.5 365.4 25,58 39.8 1.39946 1.1785 431.7 366.3 25,65 39.9 1.39966 1.1790 433.0 367.3 25,73 40.0 1.39985 1.1796 434.3 368.2 25,80 40.1 1.40004 1.1801 435.6 369.2 25,88 40.2 1.40024 1.1806 437.0 370.1 25,96 40.3 1.40043 1.1812 438.3 371.1 26,04 40.4 1.40063 1.1817 439.7 372.1 26,12 40.5 1.40083 1.1823 441.0 373.0 26,20 40.6 1.40102 1.1828 442.3 374.0 26,28 40.7 1.40122 1.1833 443.7 374.9 26,36 40.8 1.40141 1.1839 445.0 375.9 26,44 40.9 1.40161 1.1844 446.4 376.9 26,52 41.0 1.40180 1.1850 447.7 377.8 26,60 41.1 1.40200 1.1855 449.0 378.7 26,68 41.2 1.40219 1.1860 450.2 379.6 26,75 41.3 1.40239 1.1865 451.5 380.5 26,83 41.4 1.40259 1.1870 452.8 381.4 26,90 41.5 1.40279 1.1875 454.1 382.3 26,98 41.6 1.40298 1.1881 455.3 383.2 27,05 41.7 1.40318 1.1886 456.6 384.2 27,13 41.8 1.40338 1.1891 457.9 385.1 27,21 41.9 1.40357 1.1896 459.1 386.0 27,28 42.0 1.40377 1.1901 460.4 386.9 27,35 42.1 1.40397 1.1907 461.7 387.8 27,43 42.2 1.40417 1.1912 463.1 388.8 27,52 42.3 1.40436 1.1917 464.4 389.7 27,59 42.4 1.40456 1.1923 465.8 390.7 27,68 42.5 1.40476 1.1928 467.2 391.6 27,76 42.6 1.40496 1.1934 468.5 392.6 27,84 42.7 1.40516 1.1939 469.9 393.5 27,92 42.8 1.40535 1.1945 471.2 394.5 28,00 42.9 1.40555 1.1950 472.6 395.4 28,08 43.0 1.40575 1.1956 473.9 396.4 28,16 43.1 1.40595 1.1961 475.2 397.3 28,23 43.2 1.40615 1.1967 476.6 398.3 28,32 43.3 1.40635 1.1972 477.9 399.2 28,40 43.4 1.40655 1.1977 479.3 400.1 28,48 43.5 1.40675 1.1983 480.6 401.1 28,56 43.6 1.40695 1.1988 481.9 402.0 28,63 43.7 1.40715 1.1994 483.3 402.9 28,72 43.8 1.40735 1.1999 484.6 403.9 28,79 43.9 1.40755 1.2005 486.0 404.8 28,88 44.0 1.40775 1.2010 487.3 405.7 28,95 44.1 1.40795 1.2015 488.6 406.7 29,03 44.2 1.40815 1.2021 490.0 407.6 29,11 44.3 1.40836 1.2026 491.3 408.5 29,19 44.4 1.40856 1.2032 492.7 409.5 29,27 44.5 1.40876 1.2037 494.0 410.4 29,35 44.6 1.40896 1.2042 495.3 411.3 29,43 44.7 1.40916 1.2048 496.7 412.3 29,51 44.8 1.40937 1.2053 498.0 413.2 29,59 44.9 1.40957 1.2059 499.4 414.1 29,67 45.0 1.40977 1.2064 500.7 415.0 29,75 45.1 1.40997 1.2070 502.1 416.0 29,83 45.2 1.41018 1.2076 503.5 417.0 29,92 45.3 1.41038 1.2081 504.9 417.9 30,00 45.4 1.41058 1.2087 506.3 418.9 30,08 45.5 1.41079 1.2093 507.8 419.9 30,17 45.6 1.41099 1.2098 509.2 420.9 30,25 45.7 1.41119 1.2104 510.6 421.8 30,34 45.8 1.41139 1.2110 512.0 422.8 30,42 45.9 1.41160 1.2115 513.4 423.7 30,50 46.0 1.41180 1.2121 514.8 424.7 30,59 46.1 1.41200 1.2127 516.1 425.6 30,66 46.2 1.41221 1.2132 517.5 426.5 30,75 46.3 1.41241 1.2137 518.8 427.5 30,82 46.4 1.41262 1.2143 520.2 428.4 30,91 46.5 1.41282 1.2148 521.5 429.3 30,99 46.6 1.41302 1.2154 522.8 430.2 31,06 46.7 1.41323 1.2159 524.2 431.1 31,15 46.8 1.41343 1.2165 525.5 432.0 31,22 46.9 1.41364 1.2170 526.9 432.9 31,31 47.0 1.41384 1.2175 528.2 433.8 31,38 47.1 1.41405 1.2181 529.6 434.8 31,47 47.2 1.41425 1.2187 531.0 435.7 31,55 47.3 1.41446 1.2192 532.4 436.7 31,63 47.4 1.41466 1.2198 533.8 437.6 31,72 47.5 1.41487 1.2204 535.3 438.6 31,81 47.6 1.41508 1.2210 536.7 439.5 31,89 47.7 1.41528 1.2215 538.1 440.5 31,97 47.8 1.41549 1.2221 539.5 441.4 32,05 47.9 1.41569 1.2227 540.9 442.4 32,14 48.0 1.41590 1.2232 542.3 443.3 32,22 48.1 1.41611 1.2238 543.6 444.2 32,30 48.2 1.41632 1.2243 545.0 445.1 32,38 48.3 1.41652 1.2249 546.3 446.0 32,46 48.4 1.41673 1.2254 547.7 446.9 32,59 48.5 1.41694 1.2260 549.1 447.8 32,63 48.6 1.41715 1.2265 550.4 448.7 32,70 48.7 1.41736 1.2271 551.8 449.7 32,79 48.8 1.41756 1.2276 553.1 450.6 32,86 48.9 1.41777 1.2282 554.5 451.4 32,95 49.0 1.41798 1.2287 555.8 452.3 33,02 49.1 1.41819 1.2293 557.2 453.3 33,11 49.2 1.41840 1.2298 558.6 454.2 33,19 49.3 1.41861 1.2304 560.0 455.1 33,27 49.4 1.41882 1.2310 561.4 456.1 33,36 49.5 1.41903 1.2315 562.8 457.0 33,44 49.6 1.41924 1.2321 564.2 457.9 33,52 49.7 1.41945 1.2327 565.6 458.8 33,61 49.8 1.41966 1.2332 567.0 459.8 33,69 49.9 1.41987 1.2338 568.4 460.7 33,77 50.0 1.42008 1.2344 569.8 461.6 33,86 50.1 1.42029 1.2349 571.2 462.5 33,94 50.2 1.42050 1.2355 572.6 463.5 34,02 50.3 1.42071 1.2361 574.0 464.4 34,10 50.4 1.42092 1.2366 575.4 465.3 34,19 50.5 1.42114 1.2372 576.9 466.2 34,28 50.6 1.42135 1.2378 578.3 467.2 34,36 50.7 1.42156 1.2384 579.7 468.1 34,44 50.8 1.42177 1.2389 581.1 469.0 34,53 50.9 1.42198 1.2395 582.5 469.9 34,61 51.0 1.42219 1.2401 583.9 470.9 34,69 51.1 1.42240 1.2407 585.4 471.8 34,78 51.2 1.42261 1.2413 586.9 472.8 34,87 51.3 1.42283 1.2419 588.3 473.8 34,95 51.4 1.42304 1.2425 589.8 474.7 35,04 51.5 1.42325 1.2431 591.3 475.7 35,13 51.6 1.42346 1.2437 592.8 476.6 35,22 51.7 1.42367 1.2443 594.3 477.6 35,31 51.8 1.42389 1.2449 595.7 478.6 35,39 51.9 1.42410 1.2455 597.2 479.5 35,48 52.0 1.42431 1.2461 598.7 480.5 35,57 52.1 1.42452 1.2466 600.1 481.4 35,65 52.2 1.42474 1.2472 601.5 482.3 35,74 52.3 1.42495 1.2478 602.9 483.2 35,82 52.4 1.42517 1.2483 604.3 484.1 35,91 52.5 1.42538 1.2489 605.8 485.0 35,99 52.6 1.42559 1.2495 607.2 485.9 36,08 52.7 1.42581 1.2500 608.6 486.8 36,16 52.8 1.42602 1.2506 610.0 487.7 36,24 52.9 1.42624 1.2512 611.4 488.6 36,33 53.0 1.42645 1.2518 612.8 489.6 36,41 53.1 1.42666 1.2524 614.3 490.5 36,50 53.2 1.42686 1.2530 615.8 491.4 36,59 53.3 1.42707 1.2536 617.2 492.4 36,67 53.4 1.42727 1.2542 618.7 493.3 36,76 53.5 1.42748 1.2548 620.2 494.3 36,85 53.6 1.42769 1.2554 621.7 495.2 36,94 53.7 1.42789 1.2560 623.2 496.2 37,03 53.8 1.42810 1.2566 624.6 497.1 37,11 53.9 1.42830 1.2571 626.1 498.0 37,20 54.0 1.42851 1.2577 627.6 499.0 37,29 54.1 1.42874 1.2583 629.0 499.9 37,37 54.2 1.42897 1.2589 630.4 500.8 37,45 54.3 1.42919 1.2595 631.8 501.7 37,54 54.4 1.42942 1.2600 633.2 502.6 37,62 54.5 1.42965 1.2606 634.7 503.5 37,71 54.6 1.42988 1.2612 636.1 504.3 37,79 54.7 1.43011 1.2617 637.5 505.2 37,88 54.8 1.43033 1.2623 638.9 506.1 37,96 54.9 1.43056 1.2629 640.3 507.0 38,04 55.0 1.43079 1.2635 641.7 507.9 38,11 55.1 1.43101 1.2640 643.2 508.8 38,22 55.2 1.43123 1.2646 644.6 509.7 38,30 55.3 1.43145 1.2652 646.1 510.7 38,39 55.4 1.43167 1.2658 647.6 511.6 38,48 55.5 1.43189 1.2664 649.1 512.5 38,57 55.6 1.43210 1.2670 650.5 513.4 38,65 55.7 1.43232 1.2676 652.0 514.3 38,74 55.8 1.43254 1.2682 653.5 515.3 38,83 55.9 1.43276 1.2688 654.9 516.2 38,91 56.0 1.43298 1.2694 656.4 517.1 39,00 56.1 1.43320 1.2700 657.9 518.0 39,09 56.2 1.43342 1.2706 659.4 518.9 39,18 56.3 1.43364 1.2712 660.8 519.9 39,26 56.4 1.43386 1.2718 662.3 520.8 39,35 56.5 1.43409 1.2724 663.8 521.7 39,44 56.6 1.43431 1.2730 665.3 522.6 39,53 56.7 1.43453 1.2736 666.8 523.5 39,62 56.8 1.43475 1.2742 668.2 524.4 39,70 56.9 1.43497 1.2748 669.7 525.4 39,79 57.0 1.43519 1.2754 671.2 526.3 39,88 57.1 1.43541 1.2760 672.7 527.2 39,97 57.2 1.43563 1.2766 674.3 528.2 40,06 57.3 1.43586 1.2773 675.8 529.1 40,15 57.4 1.43608 1.2779 677.4 530.1 40,25 57.5 1.43630 1.2785 678.9 531.0 40,34 57.6 1.43652 1.2791 680.4 532.0 40,43 57.7 1.43674 1.2797 682.0 532.9 40,52 57.8 1.43697 1.2804 683.5 533.8 40,61 57.9 1.43719 1.2810 685.1 534.8 40,70 58.0 1.43741 1.2816 686.6 535.7 40,80 58.1 1.43763 1.2822 688.1 536.6 40,88 58.2 1.43786 1.2828 689.6 537.5 40,97 58.3 1.43808 1.2834 691.0 538.4 41,06 58.4 1.43831 1.2840 692.5 539.3 41,14 58.5 1.43854 1.2846 694.0 540.2 41,23 58.6 1.43876 1.2852 695.5 541.1 41,32 58.7 1.43899 1.2858 697.0 542.0 41,41 58.8 1.43921 1.2864 698.4 542.9 41,50 58.9 1.43944 1.2870 699.9 543.8 41,58 59.0 1.43966 1.2876 701.4 544.7 41,67 59.1 1.43989 1.2882 702.9 545.7 41,76 59.2 1.44011 1.2888 704.5 546.6 41,86 59.3 1.44034 1.2895 706.0 547.5 41,95 59.4 1.44056 1.2901 707.6 548.5 42,04 59.5 1.44079 1.2907 709.1 549.4 42,13 59.6 1.44102 1.2913 710.6 550.3 42,22 59.7 1.44124 1.2920 712.2 551.2 42,32 59.8 1.44147 1.2926 713.7 552.2 42,41 59.9 1.44169 1.2932 715.3 553.1 42,50 60.0 1.44192 1.2938 716.8 554.0 42,59 60.1 1.44215 1.2944 718.3 554.9 42,68 60.2 1.44237 1.2950 719.8 555.8 42,77 60.3 1.44260 1.2956 721.2 556.7 42,85 60.4 1.44283 1.2962 722.7 557.6 42,94 60.5 1.44306 1.2968 724.2 558.4 43,03 60.6 1.44328 1.2974 725.7 559.3 43,12 60.7 1.44351 1.2980 727.2 560.2 43,21 60.8 1.44374 1.2986 728.6 561.1 43,29 60.9 1.44396 1.2992 730.1 562.0 43,38 61.0 1.44419 1.2998 731.6 562.8 43,47 61.1 1.44442 1.3004 733.1 563.8 43,56 61.2 1.44465 1.3011 734.7 564.7 43,65 61.3 1.44488 1.3017 736.2 565.6 43,74 61.4 1.44511 1.3023 737.8 566.5 43,84 61.5 1.44533 1.3030 739.4 567.4 43,93 61.6 1.44556 1.3036 740.9 568.4 44,02 61.7 1.44579 1.3042 742.5 569.3 44,12 61.8 1.44602 1.3048 744.0 570.2 44,21 61.9 1.44625 1.3055 745.6 571.1 44,30 62.0 1.44648 1.3061 747.1 572.0 44,39 62.1 1.44671 1.3067 748.6 572.9 44,48 62.2 1.44694 1.3073 750.2 573.8 44,57 62.3 1.44717 1.3080 751.7 574.7 44,66 62.4 1.44740 1.3086 753.3 575.6 44,76 62.5 1.44764 1.3092 754.8 576.5 44,85 62.6 1.44787 1.3098 756.3 577.4 44,94 62.7 1.44810 1.3104 757.9 578.3 45,03 62.8 1.44833 1.3111 759.4 579.2 45,12 62.9 1.44856 1.3117 761.0 580.1 45,21 63.0 1.44879 1.3123 762.5 581.0 45,31 63.1 1.44902 1.3130 764.1 582.0 45,40 63.2 1.44926 1.3136 765.7 582.9 45,49 63.3 1.44949 1.3143 767.3 583.8 45,59 63.4 1.44972 1.3149 768.9 584.8 45,69 63.5 1.44996 1.3156 770.6 585.7 45,79 63.6 1.45019 1.3162 772.2 586.6 45,88 63.7 1.45042 1.3169 773.8 587.6 45,98 63.8 1.45065 1.3175 775.4 588.5 46,07 63.9 1.45089 1.3182 777.0 589.4 46,17 64.0 1.45112 1.3188 778.6 590.4 46,26 64.1 1.45135 1.3195 780.1 591.3 46,35 64.2 1.45159 1.3201 781.7 592.1 46,45 64.3 1.45183 1.3207 783.2 593.0 46,53 64.4 1.45206 1.3213 784.8 593.9 46,63 64.5 1.45230 1.3219 786.3 594.8 46,72 64.6 1.45253 1.3226 787.8 595.7 46,81 64.7 1.45276 1.3232 789.4 596.6 46,90 64.8 1.45300 1.3238 790.9 597.5 46,99 64.9 1.45324 1.3244 792.5 598.3 47,09 65.0 1.45347 1.3251 794.0 599.2 47,18 65.1 1.45371 1.3257 795.6 600.1 47,27 65.2 1.45394 1.3264 797.2 601.1 47,37 65.3 1.45418 1.3270 798.8 602.0 47,46 65.4 1.45441 1.3277 800.4 602.9 47,56 65.5 1.45465 1.3283 802.1 603.8 47,66 65.6 1.45489 1.3290 803.7 604.7 47,75 65.7 1.45512 1.3296 805.3 605.6 47,85 65.8 1.45536 1.3303 806.9 606.6 47,94 65.9 1.45559 1.3309 808.5 607.5 48,04 66.0 1.45583 1.3316 810.1 608.4 48,13 66.1 1.45607 1.3322 811.6 609.3 48,22 66.2 1.45630 1.3328 813.2 610.1 48,32 66.3 1.45654 1.3335 814.8 611.0 48,41 66.4 1.45678 1.3341 816.3 611.9 48,50 66.5 1.45702 1.3347 817.9 612.8 48,60 66.6 1.45725 1.3353 819.4 613.6 48,69 66.7 1.45749 1.3360 820.9 614.5 48,77 66.8 1.45773 1.3366 822.5 615.4 48,87 66.9 1.45796 1.3372 824.1 616.2 48,97 67.0 1.45820 1.3378 825.6 617.1 49,05 67.1 1.45844 1.3385 827.2 618.0 49,15 67.2 1.45868 1.3391 828.8 618.9 49,24 67.3 1.45892 1.3398 830.4 619.8 49,34 67.4 1.45916 1.3404 832.0 620.7 49,43 67.5 1.45940 1.3411 833.7 621.6 49,53 67.6 1.45964 1.3418 835.3 622.5 49,63 67.7 1.45988 1.3424 836.9 623.4 49,73 67.8 1.46012 1.3431 838.5 624.3 49,82 67.9 1.46036 1.3437 840.1 625.2 49,92 68.0 1.46060 1.3444 841.7 626.1 50,01 68.1 1.46084 1.3450 843.4 627.0 50,11 68.2 1.46108 1.3457 845.1 628.0 50,21 68.3 1.46132 1.3464 846.7 628.9 50,31 68.4 1.46156 1.3471 848.4 629.8 50,41 68.5 1.46181 1.3478 850.1 630.8 50,51 68.6 1.46205 1.3484 851.8 631.7 50,61 68.7 1.46229 1.3491 853.5 632.6 50,71 68.8 1.46253 1.3498 855.1 633.5 50,81 68.9 1.46277 1.3505 856.8 634.5 50,91 69.0 1.46301 1.3512 858.5 635.4 51,01 69.1 1.46325 1.3518 860.1 636.3 51,10 69.2 1.46350 1.3525 861.7 637.2 51,20 69.3 1.46374 1.3531 863.3 638.0 51,29 69.4 1.46398 1.3538 864.9 638.9 51,39 69.5 1.46423 1.3544 866.6 639.8 51,49 69.6 1.46447 1.3551 868.2 640.7 51,58 69.7 1.46471 1.3557 869.8 641.6 51,68 69.8 1.46495 1.3564 871.4 642.4 51,78 69.9 1.46520 1.3570 873.0 643.3 51,87 70.0 1.46544 1.3577 874.6 644.2 51,97 70.1 1.46568 1.3583 876.2 645.1 52,06 70.2 1.46593 1.3590 877.8 645.9 52,15 70.3 1.46618 1.3596 879.4 646.8 52,25 70.4 1.46642 1.3603 881.0 647.7 52,35 70.5 1.46667 1.3609 882.7 648.6 52,45 70.6 1.46691 1.3616 884.3 649.4 52,54 70.7 1.46715 1.2622 885.9 650.3 52,64 70.8 1.46740 1.3629 887.5 651.2 52,73 70.9 1.46765 1.3635 889.1 652.1 52,83 71.0 1.46789 1.3642 890.7 652.9 52,92 71.1 1.46814 1.3649 892.4 653.8 53,02 71.2 1.46838 1.3655 894.1 654.7 53,12 71.3 1.46863 1.3662 895.7 655.6 53,22 71.4 1.46888 1.3669 897.4 656.5 53,32 71.5 1.46913 1.3676 899.1 657.4 53,42 71.6 1.46937 1.3683 900.8 658.3 53,52 71.7 1.46962 1.3689 902.5 659.2 53,62 71.8 1.46987 1.3696 904.1 660.1 53,72 71.9 1.47011 1.3703 905.8 661.0 53,82 72.0 1.47036 1.3710 907.5 661.9 53,92 72.1 1.47061 1.3717 909.2 662.8 54,02 72.2 1.47086 1.3723 910.8 663.7 54,12 72.3 1.47110 1.3730 912.5 664.6 54,22 72.4 1.47135 1.3737 914.2 665.5 54,32 72.5 1.47160 1.3744 915.9 666.4 54,42 72.6 1.47185 1.3750 917.5 667.3 54,51 72.7 1.47210 1.3757 919.2 668.2 54,62 72.8 1.47234 1.3764 920.9 669.0 54,72 72.9 1.47259 1.3771 922.5 669.9 54,81 73.0 1.47284 1.3777 924.2 670.8 54,91 73.1 1.47309 1.3784 925.9 671.7 55,01 73.2 1.47334 1.3791 927.6 672.6 55,11 73.3 1.47359 1.3798 929.2 673.5 55,21 73.4 1.47384 1.3804 930.9 674.4 55,31 73.5 1.47409 1.3811 932.6 675.2 55,41 73.6 1.47434 1.3818 934.3 676.1 55,51 73.7 1.47459 1.3825 936.0 677.0 55,61 73.8 1.47484 1.3832 937.6 677.9 55,71 73.9 1.47509 1.3838 939.3 678.8 55,81 74.0 1.47534 1.3845 941.0 679.7 55,91 74.1 1.47559 1.3852 942.7 680.5 56,01 74.2 1.47584 1.3859 944.4 681.4 56,11 74.3 1.47609 1.3866 946.0 682.3 56,21 74.4 1.47634 1.3872 947.7 683.2 56,31 74.5 1.47660 1.3879 949.4 684.0 56,41 74.6 1.47685 1.3886 951.1 684.9 56,51 74.7 1.47710 1.3893 952.8 685.8 56,61 74.8 1.47735 1.3900 954.4 686.7 56,71 74.9 1.47760 1.3906 956.1 687.5 56,81

TABELL 3 Tabell som visar sockerhalten i renad koncentrerad must i g/l och g/kg, bestämd med en refraktometer som visar antingen viktprocenten av sackaros vid 20 °C eller brytningsindexet vid 20 °C. Densiteten vid 20 °C visas också.

Sackaros % m/m Brytningsindex vid 20 °C Densitet vid 20 °C Socker i g/l Socker i g/kg Alkoholhalt % vol. vid 20 °C 50.0 1.42008 1.2342 627.6 508.5 37,28 50.1 1.42029 1.2348 629.3 509.6 37,38 50.2 1.42050 1.2355 630.9 510.6 37,48 50.3 1.42071 1.2362 632.4 511.6 37,56 50.4 1.42092 1.2367 634.1 512.7 37,66 50.5 1.42113 1.2374 635.7 513.7 37,76 50.6 1.42135 1.2381 637.3 514.7 37,85 50.7 1.42156 1.2386 638.7 515.7 37,94 50.8 1.42177 1.2391 640.4 516.8 38,04 50.9 1.42198 1.2396 641.9 517.8 38,13 51.0 1.42219 1.2401 643.4 518.8 38,22 51.1 1.42240 1.2406 645.0 519.9 38,31 51.2 1.42261 1.2411 646.5 520.9 38,40 51.3 1.42282 1.2416 648.1 522.0 38,50 51.4 1.42304 1.2421 649.6 523.0 38,59 51.5 1.42325 1.2427 651.2 524.0 38,68 51.6 1.42347 1.2434 652.9 525.1 38,78 51.7 1.42368 1.2441 654.5 526.1 38,88 51.8 1.42389 1.2447 656.1 527.1 38,97 51.9 1.42410 1.2454 657.8 528.2 39,07 52.0 1.42432 1.2461 659.4 529.2 39,17 52.1 1.42453 1.2466 661.0 530.2 39,26 52.2 1.42475 1.2470 662.5 531.3 39,35 52.3 1.42496 1.2475 664.1 532.3 39,45 52.4 1.42517 1.2480 665.6 533.3 39,54 52.5 1.42538 1.2486 667.2 534.4 39,63 52.6 1.42560 1.2493 668.9 535.4 39,73 52.7 1.42581 1.2500 670.5 536.4 39,83 52.8 1.42603 1.2506 672.2 537.5 39,93 52.9 1.42624 1.2513 673.8 538.5 40,02 53.0 1.42645 1.2520 675.5 539.5 40,12 53.1 1.42667 1.2525 677.1 540.6 40,22 53.2 1.42689 1.2530 678.5 541.5 40,30 53.3 1.42711 1.2535 680.2 542.6 40,40 53.4 1.42733 1.2540 681.8 543.7 40,50 53.5 1.42754 1.2546 683.4 544.7 40,59 53.6 1.42776 1.2553 685.1 545.8 40,69 53.7 1.42797 1.2560 686.7 546.7 40,79 53.8 1.42819 1.2566 688.4 547.8 40,89 53.9 1.42840 1.2573 690.1 548.9 40,99 54.0 1.42861 1.2580 691.7 549.8 41,09 54.1 1.42884 1.2585 693.3 550.9 41,18 54.2 1.42906 1.2590 694.9 551.9 41,28 54.3 1.42927 1.2595 696.5 553.0 41,37 54.4 1.42949 1.2600 698.1 554.0 41,47 54.5 1.42971 1.2606 699.7 555.1 41,56 54.6 1.42993 1.2613 701.4 556.1 41,66 54.7 1.43014 1.2620 703.1 557.1 41,76 54.8 1.43036 1.2625 704.7 558.2 41,86 54.9 1.43058 1.2630 706.2 559.1 41,95 55.0 1.43079 1.2635 707.8 560.2 42,04 55.1 1.43102 1.2639 709.4 561.3 42,14 55.2 1.43124 1.2645 711.0 562.3 42,23 55.3 1.43146 1.2652 712.7 563.3 42,33 55.4 1.43168 1.2659 714.4 564.3 42,44 55.5 1.43189 1.2665 716.1 565.4 42,54 55.6 1.43211 1.2672 717.8 566.4 42,64 55.7 1.43233 1.2679 719.5 567.5 42,74 55.8 1.43255 1.2685 721.1 568.5 42,83 55.9 1.43277 1.2692 722.8 569.5 42,93 56.0 1.43298 1.2699 724.5 570.5 43,04 56.1 1.43321 1.2703 726.1 571.6 43,13 56.2 1.43343 1.2708 727.7 572.6 43,23 56.3 1.43365 1.2713 729.3 573.7 43,32 56.4 1.43387 1.2718 730.9 574.7 43,42 56.5 1.43409 1.2724 732.6 575.8 43,52 56.6 1.43431 1.2731 734.3 576.8 43,62 56.7 1.43454 1.2738 736.0 577.8 43,72 56.8 1.43476 1.2744 737.6 578.8 43,81 56.9 1.43498 1.2751 739.4 579.9 43,92 57.0 1.43519 1.2758 741.1 580.9 44,02 57.1 1.43542 1.2763 742.8 582.0 44,12 57.2 1.43564 1.2768 744.4 583.0 44,22 57.3 1.43586 1.2773 745.9 584.0 44,31 57.4 1.43609 1.2778 747.6 585.1 44,41 57.5 1.43631 1.2784 749.3 586.1 44,51 57.6 1.43653 1.2791 751.0 587.1 44,61 57.7 1.43675 1.2798 752.7 588.1 44,71 57.8 1.43698 1.2804 754.4 589.2 44,81 57.9 1.43720 1.2810 756.1 590.2 44,91 58.0 1.43741 1.2818 757.8 591.2 45,01 58.1 1.43764 1.2822 759.5 592.3 45,11 58.2 1.43784 1.2827 761.1 593.4 45,21 58.3 1.43809 1.2832 762.6 594.3 45,30 58.4 1.43832 1.2837 764.3 595.4 45,40 58.5 1.43854 1.2843 766.0 596.4 45,50 58.6 1.43877 1.2850 767.8 597.5 45,61 58.7 1.43899 1.2857 769.5 598.5 45,71 58.8 1.43922 1.2863 771.1 599.5 45,80 58.9 1.43944 1.2869 772.9 600.6 45,91 59.0 1.43966 1.2876 774.6 601.6 46,01 59.1 1.43988 1.2882 776.3 602.6 46,11 59.2 1.44011 1.2889 778.1 603.7 46,22 59.3 1.44034 1.2896 779.8 604.7 46,32 59.4 1.44057 1.2902 781.6 605.8 46,43 59.5 1.44079 1.2909 783.3 606.8 46,53 59.6 1.44102 1.2916 785.2 607.9 46,64 59.7 1.44124 1.2921 786.8 608.9 46,74 59.8 1.44147 1.2926 788.4 609.9 46,83 59.9 1.44169 1.2931 790.0 610.9 46,93 60.0 1.44192 1.2936 791.7 612.0 47,03 60.1 1.44215 1.2942 793.3 613.0 47,12 60.2 1.44238 1.2949 795.2 614.1 47,23 60.3 1.44260 1.2956 796.9 615.1 47,34 60.4 1.44283 1.2962 798.6 616.1 47,44 60.5 1.44305 1.2969 800.5 617.2 47,55 60.6 1.44328 1.2976 802.2 618.2 47,65 60.7 1.44351 1.2981 803.9 619.3 47,75 60.8 1.44374 1.2986 805.5 620.3 47,85 60.9 1.44397 1.2991 807.1 621.3 47,94 61.0 1.44419 1.2996 808.7 622.3 48,04 61.1 1.44442 1.3002 810.5 623.4 48,14 61.2 1.44465 1.3009 812.3 624.4 48,25 61.3 1.44488 1.3016 814.2 625.5 48,36 61.4 1.44511 1.3022 815.8 626.5 48,46 61.5 1.44534 1.3029 817.7 627.6 48,57 61.6 1.44557 1.3036 819.4 628.6 48,67 61.7 1.44580 1.3042 821.3 629.7 48,79 61.8 1.44603 1.3049 823.0 630.7 48,89 61.9 1.44626 1.3056 824.8 631.7 48,99 62.0 1.44648 1.3062 826.6 632.8 49,10 62.1 1.44672 1.3068 828.3 633.8 49,20 62.2 1.44695 1.3075 830.0 634.8 49,30 62.3 1.44718 1.3080 831.8 635.9 49,40 62.4 1.44741 1.3085 833.4 636.9 49,50 62.5 1.44764 1.3090 835.1 638.0 49,60 62.6 1.44787 1.3095 836.8 639.0 49,71 62.7 1.44810 1.3101 838.5 640.0 49,81 62.8 1.44833 1.3108 840.2 641.0 49,91 62.9 1.44856 1.3115 842.1 642.1 50,02 63.0 1.44879 1.3121 843.8 643.1 50,12 63.1 1.44902 1.3128 845.7 644.2 50,23 63.2 1.44926 1.3135 847.5 645.2 50,34 63.3 1.44949 1.3141 849.3 646.3 50,45 63.4 1.44972 1.3148 851.1 647.3 50,56 63.5 1.44995 1.3155 853.0 648.4 50,67 63.6 1.45019 1.3161 854.7 649.4 50,77 63.7 1.45042 1.3168 856.5 650.4 50,88 63.8 1.45065 1.3175 858.4 651.5 50,99 63.9 1.45088 1.3180 860.0 652.5 51,08 64.0 1.45112 1.3185 861.6 653.5 51,18 64.1 1.45135 1.3190 863.4 654.6 51,29 64.2 1.45158 1.3195 865.1 655.6 51,39 64.3 1.45181 1.3201 866.9 656.7 51,49 64.4 1.45205 1.3208 868.7 657.7 51,60 64.5 1.45228 1.3215 870.6 658.8 51,71 64.6 1.45252 1.3221 872.3 659.8 51,81 64.7 1.45275 1.3228 874.1 660.8 51,92 64.8 1.45299 1.3235 876.0 661.9 52,03 64.9 1.45322 1.3241 877.8 662.9 52,14 65.0 1.45347 1.3248 879.7 664.0 52,25 65.1 1.45369 1.3255 881.5 665.0 52,36 65.2 1.45393 1.3261 883.2 666.0 52,46 65.3 1.45416 1.3268 885.0 667.0 52,57 65.4 1.45440 1.3275 886.9 668.1 52,68 65.5 1.45463 1.3281 888.8 669.2 52,79 65.6 1.45487 1.3288 890.6 670.2 52,90 65.7 1.45510 1.3295 892.4 671.2 53,01 65.8 1.45534 1.3301 894.2 672.3 53,12 65.9 1.45557 1.3308 896.0 673.3 53,22 66.0 1.45583 1.3315 898.0 674.4 53,34 66.1 1.45605 1.3320 899.6 675.4 53,44 66.2 1.45629 1.3325 901.3 676.4 53,54 66.3 1.45652 1.3330 903.1 677.5 53,64 66.4 1.45676 1.3335 904.8 678.5 53,75 66.5 1.45700 1.3341 906.7 679.6 53,86 66.6 1.45724 1.3348 908.5 680.6 53,96 66.7 1.45747 1.3355 910.4 681.7 54,08 66.8 1.45771 1.3361 912.2 682.7 54,18 66.9 1.45795 1.3367 913.9 683.7 54,29 67.0 1.45820 1.3374 915.9 684.8 54,40 67.1 1.45843 1.3380 917.6 685.8 54,51 67.2 1.45867 1.3387 919.6 686.9 54,62 67.3 1.45890 1.3395 921.4 687.9 54,73 67.4 1.45914 1.3400 923.1 688.9 54,83 67.5 1.45938 1.3407 925.1 690.0 54,95 67.6 1.45962 1.3415 927.0 691.0 55,06 67.7 1.45986 1.3420 928.8 692.1 55,17 67.8 1.46010 1.3427 930.6 693.1 55,28 67.9 1.46034 1.3434 932.6 694.2 55,40 68.0 1.46060 1.3440 934.4 695.2 55,50 68.1 1.46082 1.3447 936.2 696.2 55,61 68.2 1.46106 1.3454 938.0 697.2 55,72 68.3 1.46130 1.3460 939.9 698.3 55,83 68.4 1.46154 1.3466 941.8 699.4 55,94 68.5 1.46178 1.3473 943.7 700.4 56,06 68.6 1.46202 1.3479 945.4 701.4 56,16 68.7 1.46226 1.3486 947.4 702.5 56,28 68.8 1.46251 1.3493 949.2 703.5 56,38 68.9 1.46275 1.3499 951.1 704.6 56,50 69.0 1.46301 1.3506 953.0 705.6 56,61 69.1 1.46323 1.3513 954.8 706.6 56,72 69.2 1.46347 1.3519 956.7 707.7 56,83 69.3 1.46371 1.3526 958.6 708.7 56,94 69.4 1.46396 1.3533 960.6 709.8 57,06 69.5 1.46420 1.3539 962.4 710.8 57,17 69.6 1.46444 1.3546 964.3 711.9 57,28 69.7 1.46468 1.3553 966.2 712.9 57,39 69.8 1.46493 1.3560 968.2 714.0 57,51 69.9 1.46517 1.3566 970.0 715.0 57,62 70.0 1.46544 1.3573 971.8 716.0 57,72 70.1 1.46565 1.3579 973.8 717.1 57,84 70.2 1.46590 1.3586 975.6 718.1 57,95 70.3 1.46614 1.3593 977.6 719.2 58,07 70.4 1.46639 1.3599 979.4 720.2 58,18 70.5 1.46663 1.3606 981.3 721.2 58,29 70.6 1.46688 1.3613 983.3 722.3 58,41 70.7 1.46712 1.3619 985.2 723.4 58,52 70.8 1.46737 1.3626 987.1 724.4 58,63 70.9 1.46761 1.3633 988.9 725.4 58,74 71.0 1.46789 1.3639 990.9 726.5 58,86 71.1 1.46810 1.3646 992.8 727.5 58,97 71.2 1.46835 1.3653 994.8 728.6 59,09 71.3 1.46859 1.3659 996.6 729.6 59,20 71.4 1.46884 1.3665 998.5 730.7 59,31 71.5 1.46908 1.3672 1000.4 731.7 59,42 71.6 1.46933 1.3678 1002.2 732.7 59,53 71.7 1.46957 1.3685 1004.2 733.8 59,65 71.8 1.46982 1.3692 1006.1 734.8 59,76 71.9 1.47007 1.3698 1008.0 735.9 59,88 72.0 1.47036 1.3705 1009.9 736.9 59,99 72.1 1.47056 1.3712 1012.0 738.0 60,11 72.2 1.47081 1.3718 1013.8 739.0 60,22 72.3 1.47106 1.3725 1015.7 740.0 60,33 72.4 1.47131 1.3732 1017.7 741.1 60,45 72.5 1.47155 1.3738 1019.5 742.1 60,56 72.6 1.47180 1.3745 1021.5 743.2 60,68 72.7 1.47205 1.3752 1023.4 744.2 60,79 72.8 1.47230 1.3758 1025.4 745.3 60,91 72.9 1.47254 1.3765 1027.3 746.3 61,02 73.0 1.47284 1.3772 1029.3 747.4 61,14 73.1 1.47304 1.3778 1031.2 748.4 61,25 73.2 1.47329 1.3785 1033.2 749.5 61,37 73.3 1.47354 1.3792 1035.1 750.5 61,48 73.4 1.47379 1.3798 1037.1 751.6 61,60 73.5 1.47404 1.3805 1039.0 752.6 61,72 73.6 1.47429 1.3812 1040.9 753.6 61,83 73.7 1.47454 1.3818 1042.8 754.7 61,94 73.8 1.47479 1.3825 1044.8 755.7 62,06 73.9 1.47504 1.3832 1046.8 756.8 62,18 74.0 1.47534 1.3838 1048.6 757.8 62,28 74.1 1.47554 1.3845 1050.7 758.9 62,41 74.2 1.47579 1.3852 1052.6 759.9 62,52 74.3 1.47604 1.3858 1054.6 761.0 62,64 74.4 1.47629 1.3865 1056.5 762.0 62,76 74.5 1.47654 1.3871 1058.5 763.1 62,87 74.6 1.47679 1.3878 1060.4 764.1 62,99 74.7 1.47704 1.3885 1062.3 765.1 63,10 74.8 1.47730 1.3892 1064.4 766.2 63,23 74.9 1.47755 1.3898 1066.3 767.2 63,33 75.0 1.47785 1.3905 1068.3 768.3 63,46

3. ALKOHOLHALT I VOLYMPROCENT

1. DEFINITION

Alkoholhalten i volymprocent motsvarar antalet liter etanol per 100 liter vin. Båda volymerna mäts vid 20 °C. Alkoholhalt i volymprocent uttrycks med beteckningen % vol.

Anmärkning:

Etanolhomologa föreningar, samt etanol och etanolhomologa föreningar i etylestrar, ingår i alkoholhalten eftersom dessa förekommer i destillatet.

2. PRINCIP FÖR METODERNA

Destillation av vin som gjorts alkaliskt med uppslammad kalciumhydroxid. Bestämning av destillatets alkoholhalt.

2.2 Referensmetod:

Bestämning av alkoholhalten i destillatet med pyknometer.

Bestämning av alkoholhalten i vin med hydrostatisk våg.

Bestämning av alkoholhalten i vin med elektromagnetisk svängningsdensitometri.

2.3 Rutinmetoder:

2.3.1 Bestämning av alkoholhalten i destillatet med areometer.

2.3.2 Densimetrisk bestämning av alkoholhalten i destillatet med hydrostatisk våg.

2.3.3 Bestämning av alkoholhalten i destillatet med refraktometri.

Anmärkning:

Använd tabellerna 1, 2 och 3 i bilaga 2 till detta kapitel för att bestämma alkoholhalten utifrån destillatets densitet. Dessa har räknats fram med hjälp av Internationella tabeller över alkoholhalt, publicerade 1972 av Internationella organisationen för rättsmetrologi i dess rekommendation nr 22 och antagna av OIV (generalförsamlingen 1974).

Tabell 1 ger den generella formeln för förhållandet mellan alkoholhalten i volymprocent och densiteten i blandningar av alkohol och vatten som en funktion av temperaturen.

3. METOD FÖR FRAMSTÄLLNING AV DESTILLAT

3.1 Apparatur

Destillationsapparat, bestående av

rundbottnad enliters kolv med slipade glaskopplingar,

ca 20 cm lång destillationskolonn eller annan apparat som förhindrar stänk,

värmekälla: lämpliga åtgärder vidtas för att förhindra pyrolys av extraherat material,

kylare som avslutas med ett smalt rör som leder destillatet till botten av ett graderat förlag som innehåller några ml vatten.

Ångdestillationsapparat bestående av

1) en ånggenerator,

2) ett ångrör,

3) en destillationskolonn,

4) en kylare.

Andra modeller av destillationsapparater eller ångdestillationsapparater får användas om de uppfyller kraven för följande analys: En blandning av etanol och vatten med en alkoholhalt av 10 % vol. destilleras fem gånger i följd. Destillatet skall efter den femte destillationen ha en alkoholhalt av minst 9,9 % vol., dvs. alkoholförlusten vid varje destillation får inte överstiga 0,02 % vol.

3.2 Reagenser

3.2.1 2 M kalciumhydroxidsuspension

Framställs genom att en liter vatten med en temperatur av 60-70 °C försiktigt hälls över 120 g osläckt kalk (CaO).

3.3 Beredning av provet

Avlägsna större delen av koldioxioden i unga eller mousserande viner genom att skaka om 250 till 300 ml vin i en 500 ml kolv.

3.4 Metod

Mät upp 200 ml vin i en mätkolv. Notera vinets temperatur.

Häll över vinet i en destillationskolv och för ner ångdestillationsapparatens ångrör i kolven. Skölj mätkolven fyra gånger med 5 ml vatten som tillsätts kolven eller ångröret. Tillsätt 10 ml kalciumhydroxid (se 3.2.1) och några bitar av ett inert poröst material (t.ex. pimpsten).

Samla upp destillatet i den 200 ml mätkolv som användes för att mäta upp vinet.

Samla upp en volym motsvarande ca tre fjärdedelar av den ursprungliga volymen vid vanlig destillation och vid ångdestillation 198-199 ml av destillatet. Fyll på med destillerat vatten till 200 ml och håll destillatet vid ursprungstemperaturen ± 2 °C.

Rör om försiktigt med en cirkelrörelse.

Anmärkning:

För viner som innehåller särskilt höga koncentrationer av ammoniumjoner kan destillatet omdestilleras enligt ovan, men kalciumhydroxidsuspensionen ersätts med 1 M svavelsyra i spädning 10:100 (v/v).

4. REFERENSMETOD

4–A Bestämning av alkoholhalten i destillatet med pyknometer

4.1 Apparatur

Kalibrerad pyknometer (se kapitel 1, ”Densitet och specifik vikt”).

4.2 Metod

Bestäm destillatets skenbara densitet (3.4.) vid t °C enligt anvisningar i kapitlet ”Densitet och specifik vikt” (kapitel 1, punkterna 4.3.1 och 4.3.2). Densiteten betecknas ρt.

4.3 Redovisning av resultaten

4.3.1 Beräkningsmetod

Bestäm alkoholhalten vid 20 °C med hjälp av tabell 1. På den vågräta raden i tabellen som motsvarar temperaturen T (uttryckt i hela tal) direkt under t °C söks den minsta densitet som är större än ρt. Beräkna densiteten ρ vid temperaturen T med hjälp av den differens som anges nedanför densiteten i tabellen.

På raden för temperaturen T söks densiteten ρ, som är omedelbart över ρ′. Beräkna skillnaden mellan densiteterna ρ och ρ′. Dividera skillnaden med den differens som anges i tabellen direkt till höger om densiteten ρ′. Kvoten anger decimaldelen för alkoholhalten, medan heltalsdelen av alkoholhalten anges längst upp i den spalt som visar densiteten ρ′.

Exempel på beräkning av alkoholhalten ges i bilagan till detta kapitel.

Anmärkning:

Temperaturkorrektionen har lagts in i ett datorprogram och kan eventuellt utföras automatiskt.

4.3.2 Repeterbarhet (r):

r = 0,10 % vol.

4.3.3 Reproducerbarhet (R):

R = 0,19 % vol.

4–B Bestämning av alkoholhalten i vin med hydrostatisk våg

1. MÄTMETOD

1.1. Inledning

Vinets alkoholhalt i volymprocent skall mätas före saluföring, främst för att märkningsbestämmelserna skall kunna följas.

Alkoholhalten i volymprocent motsvarar antalet liter etanol per 100 liter vin. Båda volymerna mäts vid 20 °C. Symbolen är ”% vol.”.

1.2. Omfattning och tillämpningsområde

Den beskrivna mätmetoden är densitetsmätning med hydrostatisk våg.

Med hänvisning till gällande bestämmelser skall provningstemperaturen inte överstiga 20 °C.

1.3. Principer och definitioner

Metoden innebär att vinet först destilleras. Destilleringsmetoden beskrivs i detta kapitel. Destilleringen gör det möjligt att avlägsna icke-flyktiga ämnen. Etanolhomologa föreningar, samt etanol och etanolhomologa föreningar i estrar, ingår i alkoholhalten eftersom dessa förekommer i destillatet.

Därefter mäts densiteten i destillatet. Densiteten för en vätska vid en viss temperatur är lika med massan per volymenhet: ρ2 = m/V för vin uttrycks den i g/ml.

Alkoholhalten i vin kan fastställas genom densitetsmätning med en hydrostatisk våg, som bygger på Arkimedes princip. Enligt denna princip påverkas en kropp som nedsänks i vätska av en uppåtriktad kraft som motsvarar massan av den undanträngda vätskan.

1.4. Reagenser

Vid analysen skall bara användas – om inget annat särskilt anges – reagens som är särskilt avsedda för analysändamål och vatten som håller minst klass 3 enligt definitionen i ISO 3696:1987.

1.4.1. Rengöringslösning avsedd för flottören (natriumhydroxid, 30 vikt- %).

För att bereda 100 ml lösning, väg upp 30 g natriumhydroxid och späd till märket med 96 % etanol (volymprocent).

1.5. Utrustning

Vanlig laboratorieutrustning, och särskilt följande:

Hydrostatisk våg med en enda vågskål och med en känslighet på ± 1 mg.

Flottör som har en volym på minst 20 ml och som är särskilt anpassad till vågen. Den tråd som flottören är upphängd i får ha en diameter på högst 0,1 mm.

Mätcylinder med nivåmarkering. Flottören skall rymmas helt och hållet i den del av cylindern som befinner sig under märket. Vätskeytan får bara brytas av den tråd som flottören är upphängd i. Mätcylinderns innerdiameter skall vara minst 6 mm större än flottörens.

Termometer (eller sond för temperaturmätning) som är indelad i grader och tiondels grader från 10 till 40 °C och kalibrerad till en noggrannhet av ± 0,05 °C.

Vikter som kalibrerats av ett officiellt certifieringsorgan.

1.6. Utförande

Flottören och mätcylindern skall mellan varje mätning rengöras med destillerat vatten, torkas av med luddfritt mjukt papper för laboratoriebruk och sedan sköljas med den lösning vars densitet skall bestämmas. För att minimera förlusterna av alkohol genom avdunstning skall mätningarna göras så snart apparaten visar stabila värden.

1.6.1. Kalibrering av vågen

Även om de flesta vågar har inbyggda kalibreringssystem skall den hydrostatiska vågen också kunna kalibreras med vikter som i sin tur kalibrerats av ett officiellt certifieringsorgan.

1.6.2. Kalibrering av flottören

Fyll mätcylindern till märket med dubbeldestillerat vatten (eller vatten av samma renhetsgrad, t.ex. mikrofiltrerat vatten med en konduktivitet på 18,2 M/cm) som håller en temperatur på mellan 15 °C och 25 °C, dock helst 20 °C.

Sänk ned flottören och termometern. Rör om. Läs av vätskans densitet och korrigera om nödvändigt det avlästa värdet så att det motsvarar värdet för vatten vid mättemperaturen i fråga.

1.6.3. Kontroll med en vatten/alkohol-lösning

Fyll mätcylindern till märket med en vatten/alkohol-blandning av känd alkoholhalt och med en temperatur på 15–25 °C, dock helst 20 °C.

Sänk ned flottören och termometern. Rör om. Läs av vätskans densitet (eller alkoholhalten om detta är möjligt) från instrumentet. Det erhållna värdet på alkoholhalten bör motsvara den alkoholhalt som tidigare fastställts.

Anmärkning: Denna lösning med känd alkoholhalt kan också användas i stället för dubbeldestillerat vatten då flottören kalibreras.

1.6.4. Mätning av destillatets densitet (eller av dess alkoholhalt, om sådan utrustning finns)

Fyll mätcylindern med testprovet upp till märket.

Sänk ned flottören och termometern. Rör om. Läs av vätskans densitet (eller alkoholhalten om detta är möjligt) från instrumentet. Notera temperaturen om densiteten mäts vid t °C ρt.

Räkna om ρt till 20 med hjälp av densitetstabellen T for vatten/alkohol-blandningar (tabell II i bilaga II till detta kapitel).

1.6.5. Rengöring av flottören och mätcylindern.

Fyll mätcylindern med den särskilda rengöringslösningen för flottörer. Sänk ned flottören i lösningen.

Låt flottören ligga i vätskan i 1 tim. Rotera den med jämna mellanrum.

Skölj av flottören. Använd rikligt med kranvatten och därefter destillerat vatten.

Torka med luddfritt mjukt papper för laboratoriebruk.

Rengöringen skall göras första gången som flottören används och därefter vid behov.

1.6.6. Resultat

Då densiteten ρ20 är känd kan den verkliga alkoholhalten beräknas med hjälp av tabellen med alkoholhalten i volymprocent (vol- %) vid 20 °C i förhållande till densiteten hos olika vatten/alkoholblandningar vid 20 °C. Tabellen är den internationellt använda tabell för alkoholmätning som fastställts i Rekommendation nr 22 från Internationella organisationen för legal metrologi.

2. JÄMFÖRELSE AV MÄTNINGAR MED HJÄLP AV HYDROSTATISK VÅG OCH ELEKTRONISK DENSITETSMÄTARE

Repeterbarheten och reproducerbarheten har bestämts genom en provningsjämförelse mellan olika laboratorier av prover med en alkoholhalt på mellan 4 och 18 volymprocent. Man har jämfört mätningar av alkoholhalten i olika prover med hjälp av hydrostatisk våg och elektronisk densitetsmätare, och de värden på repeterbarhet och reproducerbarhet som erhållits genom omfattande fleråriga interkalibreringar.

2.1. Prover

Proverna utgörs av viner med olika densitet och alkoholhalt som framställs månadsvis i industriell skala. De tas från flaskor som lagras under normala betingelser och levereras anonymt till laboratorierna.

2.2. Laboratorier

Laboratorier som deltar i de månatliga analyser som organiseras av Unione Italiana Vini (Verona, Italien) i enlighet med standarden ISO 5725 (UNI 9225), ”International Protocol of Proficiency test for chemical analysis laboratories” (som fastställts av AOAC, ISO och IUPAC) och riktlinjerna i ISO 43 och ILAC G13. Unione Italiana Vini utarbetar en årsrapport som distribueras till samtliga deltagande laboratorier.

2.3. Utrustning

En elektronisk hydrostatisk våg (som gör det möjligt att bestämma densiteten med fem decimalers noggrannhet), eventuellt utrustad med databehandlingsenhet.

En elektronisk densitetsmätare utrustad med automatisk provväxlare.

2.4. Analyser

I enlighet med reglerna för validering av analysmetoder analyseras varje prov två gånger i följd för bestämning av alkoholhalten.

2.5. Resultat

I tabell 1 visas mätresultat från de laboratorier som använder en hydrostatisk våg.

I tabell 2 visas resultat från de laboratorier som använder en elektronisk densitetsmätare.

2.6. Utvärdering av resultaten

Provningsresultaten har granskats i syfte att påvisa eventuella systematiska fel (p < 0,025) med hjälp av Cochrans och därefter Grubbs test, i enlighet med de metoder som beskrivs i ”Protocol international for the Design, Conduct and Interpretation of Method-Performance Studies”.

2.6.2. Repeterbarhet (r) och reproducerbarhet (R)

Repeterbarheten (r) och reproducerbarheten (R) i enlighet med definitionerna i protokollet har beräknats utifrån de resultat som kvarstår om man bortser från avvikande värden. Vid utvärdering av en ny metod är det vanligt att det inte finns någon validerad referensmetod eller vedertagen metod för att jämföra precisionskriterierna. Man använder därför ”uppskattade” precisionsnivåer för att jämföra de precisionsdata som erhållits vid interkalibreringar. Dessa ”uppskattade” nivåer beräknas med hjälp av Horwitz ekvation. Jämförelsen av provningsresultaten och de förväntade nivåerna anger om metoden är tillräckligt noggrann för den uppmätta halten av analyten. Horwitz-värdet beräknas genom Horwitz ekvation:

RSDR = 2(1-0,5 logC)

där C = den uppmätta koncentrationen av analyten uttryckt som ett decimaltal (t.ex. 1 g/100 g = 0,01).

Det s.k. Horrat-värdet används för att jämföra den fastställda precisionen med den precision som beräknats med Horwitz ekvation för den aktuella metoden och analytkoncentrationen. Horrat-värdet beräknas på följande sätt:

HoR = RSDR(uppmätt)/RSDR(Horwitz)

2.6.3. Precision vid provningsjämförelser

Ett Horrat-värde på 1 tyder vanligen på en tillfredsställande precision vid provningsjämförelsen, medan ett värde som är större än 2 vanligen innebär att precisionen är otillräcklig. Detta kan t.ex. bero på att precisionen av analytiska skäl varierar för mycket eller på att variationen är högre än vad som uppskattats för den använda metoden. Horrat-värdet beräknas och används också för att bestämma precisionen vid provningsjämförelser med hjälp av följande uppskattning:

RSDr(Horwitz) = 0,66 RSDR(Horwitz) (vilket förutsätter följande uppskattning: r = 0,66 R)

Tabell 3 visar skillnaderna mellan de mätresultat som erhållits vid de laboratorier som använder en elektronisk densitetsmätare och de laboratorier som använder en hydrostatisk våg. En god överensstämmelse noteras mellan metoderna, utom för prov 2000/3, som har en mycket låg alkoholhalt och ger dålig reproducerbarhet med båda metoderna.

2.6.4. Precisionsparametrar

Tabell 4 visar det generella medelvärdet för de precisionsparametrar som beräknats på grundval av alla månatliga provningar som gjorts under perioden januari 1999–maj 2001.

Särskilt följande resultat bör uppmärksammas:

Repeterbarhet (r) = 0,074 (volymprocent) med hydrostatisk våg och 0,061 (volymprocent) med elektronisk densitetsmätare

Reproducerbarhet (r) = 0,229 (volymprocent) med hydrostatisk våg och 0,174 (volymprocent) med elektronisk densitetsmätare

2.7. Slutsatser

Resultaten av bestämningen av alkoholhalten i ett stort antal olika viner visar att de mätningar som utförts med hydrostatisk våg överensstämmer med dem som utförts med elektronisk densitetsmätare baserad på resonansfrekvensoscillation, och att valideringsparametrarna för de båda metoderna har i stort sett samma värde.

Förklaring av de uttryck och förkortningar som används i tabellerna — Medelvärde medelvärde av de data som använts vid de statistiska analyserna — N totalt antal datauppsättningar — nc antal resultat som uteslutits från den statistiska analysen på grund av bristande överensstämmelse — Avvikande värden antal resultat som uteslutits från den statistiska analysen efter bestämning av avvikande värden genom Cochrans eller Grubbs test — n1 antal resultat som använts vid den statistiska analysen — r repeterbarhetsgräns — Sr repeterbarhetens standardavvikelse — RSDr repeterbarhetens relativa standardavvikelse (Sr × 100/medelvärde) — Hor repeterbarhetens Horrat-värde är det observerade värdet på RSD dividerat med det värde på RSDr som uppskattats genom Horwitz ekvation med hjälp av antagandet r = 0,66R — R reproducerbarhetsgräns — SR reproducerbarhetens standardavvikelse — HoR reproducerbarhetens Horrat-värde är det observerade värdet på RSDR dividerat med det värdet på RSDR som beräknats med hjälp av formeln HoR = RSDR(uppmätt)/RSDR Tabell 1: Hydrostatisk våg Medelvärde n Avvikande n1 r Sr RsDr Hor R SR RSDR HoR Antal dubbla Skillnad CrD95 1999/1 11,043 17 1 16 0,0571 0,0204 0,1846 0,1004 0,1579 0,0564 0,5107 0,18 2 0,1080 1999/2 11,247 14 1 13 0,0584 0,0208 0,1854 0,1011 0,1803 0,0644 0,5727 0,21 2 0,1241 1999/3 11,946 16 0 16 0,0405 0,0145 0,1211 0,0666 0,1593 0,0569 0,4764 0,17 2 0,1108 1999/4 7,653 17 1 16 0,0502 0,0179 0,2344 0,1206 0,1537 0,0549 0,7172 0,24 2 0,1057 1999/5 11,188 17 0 17 0,0871 0,0311 0,2780 0,1515 0,2701 0,0965 0,8622 0,31 2 0,1860 1999/6 11,276 19 0 19 0,0846 0,0302 0,2680 0,1462 0,2957 0,1056 0,9365 0,34 2 0,2047 1999/7 8,018 17 0 17 0,0890 0,0318 0,3964 0,2054 0,2573 0,0919 1,1462 0,39 2 0,1764 1999/9 11,226 17 0 17 0,0580 0,0207 0,1846 0,1423 0,2796 0,0999 0,8896 0,45 2 0,1956 1999/10 11,026 17 0 17 0,0606 0,0216 0,1961 0,1066 0,2651 0,0947 0,8588 0,31 2 0,1850 1999/11 7,701 16 1 15 0,0643 0,0229 0,2980 0,1535 0,2330 0,0832 1,0805 0,37 2 0,1616 1999/12 10,987 17 2 15 0,0655 0,0234 0,2128 0,1156 0,1258 0,0449 0,4089 0,15 2 0,0827 2000/1 11,313 16 0 16 0,0986 0,0352 0,3113 0,1699 0,2577 0,0920 0,8135 0,29 2 0,1754 2000/2 11,232 17 0 17 0,0859 0,0307 0,2731 0,1489 0,2535 0,0905 0,8060 0,29 2 0,1740 2000/3 0,679 10 0 10 0,0680 0,0243 3,5773 1,2783 0,6529 0,2332 34,3395 8,10 2 0,4604 2000/4 11,223 18 0 18 0,0709 0,0253 0,2257 0,1230 0,2184 0,0780 0,6951 0,25 2 0,1503 2000/5 7,439 19 1 18 0,0630 0,0225 0,3023 0,1549 0,1522 0,0544 0,7307 0,25 2 0,1029 2000/6 11,181 19 0 19 0,0536 0,0191 0,1710 0,0932 0,2783 0,0994 0,8890 0,32 2 0,1950 2000/7 10,858 16 0 16 0,0526 0,0188 0,1731 0,0939 0,1827 0,0653 0,6011 0,22 2 0,1265 2000/9 12,031 17 1 16 0,0602 0,0215 0,1787 0,0985 0,2447 0,0874 0,7263 0,26 2 0,1704 2000/10 11,374 18 0 18 0,0814 0,0291 0,2555 0,1395 0,2701 0,0965 0,8482 0,31 2 0,1866 2000/11 7,644 18 0 18 0,0827 0,0295 0,3863 0,1988 0,2289 0,0817 1,0694 0,36 2 0,1565 2000/12 11,314 19 1 18 0,0775 0,0277 0,2447 0,1336 0,2421 0,0864 0,7641 0,28 2 0,1667 2001/1 11,415 19 0 19 0,0950 0,0339 0,2971 0,1623 0,2410 0,0861 0,7539 0,27 2 0,1636 2001/2 11,347 19 0 19 0,0792 0,0283 0,2493 0,1361 0,1944 0,0694 0,6119 0,22 2 0,1316 2001/3 11,818 16 0 16 0,0659 0,0235 0,1990 0,1093 0,2636 0,0941 0,7965 0,29 2 0,1834 2001/4 11,331 17 0 17 0,1067 0,0381 0,3364 0,1836 0,1895 0,0677 0,5971 0,22 2 0,1229 2001/5 8,063 19 1 18 0,0782 0,0279 0,3465 0,1797 0,1906 0,0681 0,8442 0,29 2 0,1290 Tabell 2: Elektronisk densitetsmätare Medelvärde n1 n Avvikande n1 r Sr RSDr Hor R SR RSDR HoR Antal dubbla Skillnad CrD95 D1999/1 11,019 18 1 17 0,0677 0,0242 0,2196 0,1193 0,1996 0,0713 0,6470 0,23 2 0,1370 D1999/2 11,245 19 2 17 0,0448 0,0160 0,1423 0,0776 0,1311 0,0468 0,4165 0,15 2 0,0900 D1999/3 11,967 21 0 21 0,0701 0,0250 0,2091 0,1151 0,1552 0,0554 0,4631 0,17 2 0,1040 D1999/4 7,643 19 1 18 0,0610 0,0218 0,2852 0,1467 0,1340 0,0479 0,6262 0,21 2 0,0897 D1999/5 11,188 21 3 18 0,0260 0,0093 0,0829 0,0452 0,2047 0,0731 0,6536 0,24 2 0,1442 D1999/6 11,303 21 0 21 0,0652 0,0233 0,2061 0,1125 0,1466 0,0523 0,4631 0,17 2 0,0984 D1999/7 8,026 21 0 21 0,0884 0,0316 0,3935 0,2039 0,1708 0,0610 0,7600 0,26 2 0,1124 D1999/9 11,225 17 0 17 0,0372 0,0133 0,1183 0,0645 0,1686 0,0602 0,5366 0,19 2 0,1178 D1999/10 11,011 19 0 19 0,0915 0,0327 0,2969 0,1613 0,1723 0,0615 0,5588 0,20 2 0,1129 D1999/11 7,648 21 1 20 0,0615 0,0220 0,2872 0,1478 0,1538 0,0549 0,7183 0,24 2 0,1043 D1999/12 10,999 16 1 15 0,0428 0,0153 0,1389 0,0755 0,2015 0,0720 0,6541 0,23 2 0,1408 D2000/1 11,248 22 1 21 0,0697 0,0249 0,2212 0,1206 0,1422 0,0508 0,4516 0,16 2 0,0944 D2000/2 11,240 19 3 16 0,0448 0,0160 0,1424 0,0776 0,1619 0,0578 0,5145 0,19 2 0,1123 D2000/3 0,526 12 1 11 0,0327 0,0117 2,2185 0,7630 0,9344 0,3337 63,4009 14,39 2 0,6605 D2000/4 11,225 19 1 18 0,0476 0,0170 0,1514 0,0825 0,1350 0,0482 0,4295 0,15 2 0,0924 D2000/5 7,423 21 0 21 0,0628 0,0224 0,3019 0,1547 0,2635 0,0941 1,2677 0,43 2 0,1836 D2000/6 11,175 23 2 21 0,0606 0,0217 0,1938 0,1056 0,1697 0,0606 0,5424 0,20 2 0,1161 D2000/7 10,845 21 5 16 0,0440 0,0157 0,1449 0,0786 0,1447 0,0517 0,4766 0,17 2 0,0999 D2000/9 11,983 22 1 21 0,0841 0,0300 0,2507 0,1380 0,2410 0,0861 0,7183 0,26 2 0,1651 D2000/10 11,356 22 1 21 0,0635 0,0227 0,1997 0,1090 0,1865 0,0666 0,5866 0,21 2 0,1280 D2000/11 7,601 27 0 27 0,0521 0,0186 0,2448 0,1258 0,1685 0,0602 0,7916 0,27 2 0,1162 D2000/12 11,322 25 1 24 0,0476 0,0170 0,1503 0,0820 0,1594 0,0569 0,5028 0,18 2 0,1102 D2001/1 11,427 29 0 29 0,0706 0,0252 0,2207 0,1206 0,1526 0,0545 0,4771 0,17 2 0,1020 D2001/2 11,320 29 1 28 0,0675 0,0241 0,2128 0,1161 0,1570 0,0561 0,4952 0,18 2 0,1057 D2001/3 11,826 34 1 33 0,0489 0,0175 0,1476 0,0811 0,1762 0,0629 0,5322 0,19 2 0,1222 D2001/4 11,339 31 2 29 0,0639 0,0228 0,2012 0,1099 0,1520 0,0543 0,4788 0,17 2 0,1026 D2001/5 8,058 28 0 28 0,0473 0,0169 0,2098 0,1088 0,2025 0,0723 0,8976 0,31 2 0,1412 Tabell 3: Resultatjämförelse mellan hydrostatisk våg (HV) och elektronisk densitetsmätare (ED) Medelvärde (HV) n Avvikande n1 Mdelvärde n Avvikande n1 ΔTAV(HB-ED) 1999/1 11,043 17 1 16 D1999/1 11,019 18 1 17 0,024 1999/2 11,247 14 1 13 D1999/2 11,245 19 2 17 0,002 1999/3 11,946 16 0 16 D1999/3 11,967 21 0 21 –0,021 1999/4 7,653 17 1 16 D1999/4 7,643 19 1 18 0,010 1999/5 11,188 17 0 17 D1999/5 11,188 21 3 18 0,000 1999/6 11,276 19 0 19 D1999/6 11,303 21 0 21 – 0,028 1999/7 8,018 17 0 17 D1999/7 8,026 21 0 21 – 0,008 1999/9 11,226 17 0 17 D1999/9 11,225 17 0 17 0,002 1999/10 11,026 17 0 17 D1999/10 11,011 19 0 19 0,015 1999/11 7,701 16 1 15 D1999/11 7,648 21 1 20 0,052 1999/12 10,987 17 2 15 D1999/12 10,999 16 1 15 – 0,013 2000/1 11,313 16 0 16 D2000/1 11,248 22 1 21 0,065 2000/2 11,232 17 0 17 D2000/2 11,240 19 3 16 – 0,008 2000/3 0,679 10 0 10 D2000/3 0,526 12 1 11 0,153 2000/4 11,223 18 0 18 D2000/4 11,225 19 1 18 –0,002 2000/5 7,439 19 1 18 D2000/5 7,423 21 0 21 0,016 2000/6 11,181 19 0 19 D2000/6 11,175 23 2 21 0,006 2000/7 10,858 16 0 16 D2000/7 10,845 21 5 16 0,013 2000/9 12,031 17 1 16 D2000/9 11,983 22 1 21 0,049 2000/10 11,374 18 0 18 D2000/10 11,356 22 1 21 0,018 2000/11 7,644 18 0 18 D2000/11 7,601 27 0 27 0,043 2000/12 11,314 19 1 18 D2000/12 11,322 25 1 24 –0,008 2001/1 11,415 19 0 19 D2001/1 11,427 29 0 29 – 0,012 2001/2 11,347 19 0 19 D2001/2 11,320 29 1 28 0,027 2001/3 11,818 16 0 16 D2001/3 11,826 34 1 33 – 0,008 2001/4 11,331 17 0 17 D2001/4 11,339 31 2 29 – 0,008 2001/5 8,063 19 1 18 D2001/5 8,058 28 0 28 0,004 Genomsnittlig skillnad/ΔTAV(HV-ED) 0,014 Standardavvikelse för skillnaden 0,036 Tabell 4: Precisionsparametrar Hydrostatisk våg Elektronisk densitetsmätare N1 441 557 Repeterbarhetens relativa avvikelse 0,309 0,267 R 0,074 0,061 Sr 0,026 0,022 Reproducerbarhetens relativa avvikelse 2,948 2,150 R 0,229 0,174 SR 0,082 0,062

4–C Bestämning av volymprocenten alkohol i vin med elektromagnetisk svängningsdensitometri

1. Mätmetod

1.1 Mätstorhet och mättidpunkt

Vinets alkoholhalt i volymprocent skall mätas före saluföring, främst för att märkningsbestämmelserna skall kunna följas.

Begreppet ”alkoholhalt i volymprocent” definieras i punkt 1 i detta kapitel.

1.2 Mätmetod och mättemperatur

Mätmetoden beskrivs närmare nedan. Den bygger på elektromagnetiskt inducerad svängning hos ett U-rör.

Enligt gällande bestämmelser skall mättemperaturen vara 20 °C.

1.3 Mätförfarande. Formel för beräkning av densiteten

Först destilleras hela vinmängden. Hur det går till beskrivs i punkt 3 i detta kapitel. Genom destilleringen avlägsnas icke-flyktiga ämnen. Andra etylalkoholer än etanol (homologer), liksom etanol och andra etylalkoholer i estrar, kommer att ingå i alkoholhalten eftersom de följer med till destillatet.

Destillatets densitet mäts. Densiteten för en vätska vid en given temperatur är lika med massan genom volymen:

ρ = m/V. För vin uttrycks densiteten i g/ml.

Om temperaturen är känd kan man för en blandning av alkohol och vatten, som t.ex. ett destillat, i tabeller se vilken alkoholhalt en viss densitet motsvarar. Denna alkoholhalt är den som vinet har (vid destillering av hela vinmängden).

Destillatets densitet mäts genom mätning av svängningsfrekvensen hos ett U-rör som fås att vibrera med hjälp av ett elektromagnetiskt fält. Mätprovet befinner sig i röret. Densiteten fås sedan ur svängningsperioden enligt formeln:

ρ = T 2 × C 4π 2V - M V (1)

ρ = provets densitet

T = svängningsperioden

M = massan av det tomma röret

C = fjäderkonstanten

V = volymen av det vibrerande mätprovet

Detta samband har formen ρ = A T2 – B (2). Det finns alltså ett linjärt samband mellan densiteten och kvadraten på svängningsperioden. Värdena på konstanterna A och B skiljer sig åt mellan olika mätapparater. De bestäms genom att man mäter svängningsperioden för vätskor med kända densiteter.

1.4 Kalibreringsvätskor, rengörings- och torkmedel

1.4.1 Kalibreringsvätskor

För inställning av densitometern används två kalibreringsvätskor. Densiteterna hos de destillat som skall mätas måste ligga inom det intervall som dessa kalibreringsvätskors största och minsta densitet bildar. Differensen mellan kalibreringsvätskornas densiteter bör vara större än 0,01000 g/ml. Deras densitet skall vara känd med en noggrannhet bättre än ± 0,00005 g/ml vid en temperatur på 20,00 ± 0,05 °C.

Följande skall användas för kalibreringen:

ren, torr luft,

vatten med en renhetsgrad på minst 3 enligt ISO-standard 3696:1987,

blandningar av alkohol och vatten med kalibreringsdensiteter,

lösningar kalibrerade till nationella standarder med en viskositet mindre än 2 mm2/s.

1.4.2 Rengörings- och torkmedel

Diskmedel, syror etc.

Organiska lösningsmedel: 96-procentig etanol och ren aceton.

1.5 Mätapparat, kalibrering och kontroller

1.5.1 Svängningsdensitometer

Följande delar ingår:

En termostatreglerad mätkammare där det vibrerande U-röret sitter.

Ett system för att sätta U-röret i svängning och mäta svängningsperioden.

En klocka.

En digital display (plus eventuellt en kalkylator).

Densitometern skall stå absolut stabilt och vibrationsfritt.

1.5.2 Reglering och kontroll av temperaturen i mätkammaren

Mätkammaren med U-röret skall vara termostatreglerad. Temperaturstabiliteten skall vara bättre än +/- 0,02 °C.

I densitometrar med inbyggd temperaturgivare skall temperaturen i mätkammaren kontrolleras under mätning. I övriga densitometrar skall temperaturen kontrolleras före mätning. Skälet är att temperaturen i betydande grad påverkar mätresultaten. Densiteten för en blandning av alkohol och vatten med en alkoholhalt på 10 volymprocent är 0,98471 g/ml vid 20 °C och 0,98447 g/ml vid 21 °C, dvs. differensen är 0,00024 g/ml.

Mättemperaturen skall vara 20° C. Temperaturmätningen i mätkammaren skall göras med en termometer som har en upplösning bättre än 0,01° C. Termometern skall vara kalibrerad mot nationella standarder. Den skall garantera en mätnoggrannhet bättre än +/- 0,07° C.

1.5.3 Kalibrering

Apparaten skall kalibreras innan den används första gången, och därefter var sjätte månad eller när en kontroll inte ger tillfredställande resultat. Två kalibreringsvätskor skall användas för beräkning av konstanterna A och B (se sambandet i sista stycket i punkt 2). Närmare anvisningar för kalibreringen finns i handboken till densitometern. I princip görs kalibreringen med torr luft (med beaktande av lufttrycket) och mycket rent vatten (dubbeldestillerat och/eller mikrofiltrerat med mycket högt motstånd [> 18 MΩ]).

1.5.4 Kontroll av kalibreringen

Kalibreringen kontrolleras genom mätning av kalibreringsvätskornas och luftens densitet.

Luftens densitet skall kontrolleras dagligen. En differens större än 0,00008 g/ml mellan det teoretiska värdet och det uppmätta kan tyda på att röret är smutsigt. Det måste då rengöras. Luftens densitet skall därefter mätas på nytt. Om resultatet inte är tillfredsställande måste apparaten justeras.

Vid kontrollen skall man också mäta densiteten hos vatten. Om differensen mellan det teoretiska värdet och det uppmätta är större än 0,00008 g/ml, skall apparaten justeras.

Om det är svårt att kontrollera temperaturen i mätkammaren kan man göra en direkt kontroll av densiteten hos en alkohol/vattenblandning med en alkoholhalt i volymprocent som är jämförbar med alkoholhalten hos de destillat som skall mätas.

1.5.5 Kontroll av mätkammarens temperatur

Om differensen mellan det teoretiska värdet på en kalibreringsvätskas densitet (som är känt med en noggrannhet på +/- 0,00005 g/ml) och det uppmätta är större än 0,00008 g/ml skall temperaturen i mätkammaren kontrolleras.

1.6 Provberedning

Se punkt 3 ”Metod för framställning av destillat” i detta kapitel.

1.7 Mätförfarande

När man har framställt destillatet mäter man dess densitet eller alkoholhalt med densitometern.

Den som utför mätningen skall förvissa sig om att temperaturen i mätkammaren håller sig konstant. Destillatet i mätkammaren får inte innehålla luftbubblor, och det måste vara homogent. Mätapparaten kan vara försedd med lampa för att man skall kunna se om det finns luftbubblor i destillatet. Lampan måste då släckas direkt efter bubbelkontrollen. Annars kommer värmen från lampan att påverka temperaturen i mätkammaren.

Om apparaten bara visar svängningsperioden skall densiteten beräknas med hjälp av konstanterna A och B (se punkt 1.3). Om apparaten inte visar alkoholhalten direkt i volymprocent, fås den fram i tabeller med hjälp av den uppmätta densiteten.

1.8 Redovisning av mätresultat

Vinets alkoholhalt i volymprocent skall anges som den alkoholhalt som uppmätts i destillatet. Alkoholhalt i volymprocent uttrycks med beteckningen ”% vol.”

Om mätkammaren inte håller 20 °C skall mätresultatet justeras för temperaturen i motsvarande mån. Resultatet skall anges med två decimaler.

1.9 Anmärkningar

Den volym som förs in i mätkammaren skall vara tillräckligt stor för att undvika mätfel som kan förorsakas genom inverkan av föregående prov. Minst två bestämningar skall göras. Om resultaten från dessa inte ligger inom repeterbarhetsgränsen måste en tredje bestämning göras. Som regel uppvisar de två sista bestämningarna samstämmiga resultat, och man skall då bortse från den första bestämningen.

1.10 Reliabilitet

För prov med en alkoholhalt på 4–18 % vol.:

2. Resultatjämförelse mellan laboratorier. Reliabilitet och noggrannhet efter tillsats av etanol

De värden på mätmetodens egenskaper som anges i punkt 1.10 har erhållits från en jämförande undersökning mellan elva laboratorier av sex prov enligt internationellt fastställda förfaranden.

Alla de beräkningar av repeterbarhet och reproducerbarhet som utförts vid denna undersökning samt övriga närmare uppgifter återfinns på franska i kapitlet Alkohollhalt i volymprocent (”TITRE ALCOOMÉTRIQUE VOLUMIQUE”), punkt 4.B.2, i ”Recueil international des méthodes d’analyses de l’Organisation Internationale de la Vigne et du Vin” (2004 års utgåva).

5. RUTINMETODER

5.1 Areometeranalys

5.1.1 Apparatur

Alkoholometer.

Alkoholometern skall uppfylla specifikationerna för apparatur av klass 1 eller klass 2 enligt definition i internationell rekommendation nr 44, Alkoholometrar och areometrar för alkohol från ILMO (Internationella organisationen för rättsmetrologi).

Termometer indelad i tiondels grader från 0o till 40 °C certifierad för en noggrannhet av 1/20:s grad.

Mätcylinder med diameter 36 mm och höjd 320 mm, som hålls i lodrätt läge med hjälp av ett stativ med stödskruvar.

5.1.2 Metod

Häll destillatet (3.4) i mätcylindern. Se till att cylindern hålls i lodrätt läge. Sänk ned termometern och alkoholometern. Läs av temperaturen på termometern en minut efter omrörning för att få samma temperatur på mätkolven, termometern, alkoholometern och destillatet. Avlägsna termometern och läs av den skenbara alkoholhalten efter en minut. Minst tre avläsningar görs med hjälp av ett förstoringsglas. Den skenbara halt som mätts vid t °C korrigeras för temperatureffekten med hjälp av tabell 2.

Vätskans temperatur får avvika med högst 5 °C från rumstemperaturen.

5.2 Densimetri med hydrostatisk våg

5.2.1 Apparatur

Den hydrostatiska vågen används enligt anvisningarna i kapitlet ”Densitet och specifik vikt”.

5.2.2 Metod

Destillatets skenbara densitet vid t°C bestäms enligt anvisningarna i kapitlet ”Densitet och specifik vikt”, punkt 5.2.2.

5.2.3 Redovisning av resultaten

Alkoholhalten vid 20 °C bestäms med hjälp av den metod som beskrivs i 4.3.1. Använd tabell 1 om flottören är av pyrexglas och tabell 3 om den är av vanligt glas.

5.3 Refraktometri

5.3.1 Apparatur

Refraktometer som möjliggör bestämning av brytningsindex mellan 1,330 och 1,346.

Beroende på typen av utrustning görs följande bestämningar:

antingen vid 20 °C med ett lämpligt instrument,

eller vid rumstemperatur med ett instrument försett med en termometer som tillåter temperaturmätning med en noggrannhet av minst 0,05 °C. En tabell med temperaturkorrektioner följer med instrumentet.

5.3.2 Metod

Destillatets brytningsindex bestäms enligt 3.4 ovan med den metod som anvisas för den använda apparaten.

5.3.3 Redovisning av resultaten

Tabell 4 används för att bestämma den alkoholhalt som motsvarar brytningsindex vid 20 °C.

Anmärkning:

Tabell 4 anger alkoholhalter som motsvarar brytningsindex för såväl rena blandningar av alkohol och vatten som för vindestillat. För vindestillat tas hänsyn till förekomst av föroreningar i destillatet (främst högre alkoholer). Förekomst av metanol sänker brytningsindex och därmed alkoholhalten.

6. EXEMPEL PÅ BERÄKNING AV ALKOHOLHALTEN I VIN

6.1 Pyknometri på en våg med två vågskålar

Pyknometerns konstanter har bestämts och beräknats enligt beskrivningen i kapitel 1, ”Densitet och specifik vikt” (6.1.1).

6.1.2 Vägning av pyknometer fylld med destillat

Räkneexempel Tara = pyknometer + destillat vid t °C + p″ t °C = 18,90 °C t °C korrigerad = 18,70 °C p″ = 2,8074 g

p + m - p″ = destillatets massa vid t °C 105,0698 - 2,8074 = 102,2624 g

Skenbar densitet vid t °C

ρ t = p + m - p″ pyknometervolymvid 20 °C ρ 18,70 °C = 102,2624 104,0229 = 0,983076

6.1.3 Beräkning av alkoholhalten

Slå upp tabellen ovan över skenbar densitet hos etanol/vattenblandningar vid olika temperaturer. På raden för 18 °C i tabellen över skenbar densitet återfinns det minsta värde som är större än det observerade värdet 0,983076 i spalten för 11 % vol.: 0,98398. Densiteten vid 18 °C är: (98307,6 + 0,7 × 22) 10-5 = 0,98323 0,98398 - 0,98323 = 0,00075 Decimaldelen av alkoholhalten i % vol. är 75/114 = 0,65 Alkoholhalten är således 11,65 % vol.

6.2 Bestämning med pyknometer på en våg med en vågskål

Pyknometerns konstanter har bestämts och beräknats enligt beskrivningen i kapitel 1, ”Densitet och specifik vikt”, punkt 6.2.1.

6.2.2 Vägning av pyknometer fylld med destillat

Tareringsflaskans vikt i gram vid mätningstillfället: T1 = 171,9178 Pyknometer fylld med destillat vid 20,50 °C (gram): P2 = 167,8438 Variationer i luftens upptryck: dT = 171,9178 - 171,9160 = + 0,0018 Destillatets massa vid 20,50 °C: Lt = 167,8438 - (67,6695 + 0,0018) = 100,1725 Destillatets skenbara densitet: ρ 20,50 °C = 100,1725 101,8194 = 0,983825

6.2.3 Beräkning av alkoholhalten

Slå upp tabellen ovan över skenbar densitet hos etanol/vattenblandningar vid olika temperaturer. På raden för 20 °C i tabellen över skenbar densitet återfinns det minsta värde som är större än det observerade värdet 0,983825 i spalten för 11 % vol.: 0,98471. Densiteten vid 20 °C är: (98382,5 + 0,50 × 24) 10-5 = 0,983945 0,98471 - 0,983945 = 0,000765 Decimaldelen av alkoholhalten i % vol. är 76,5/119 = 0,64 Alkoholhalten är således 10,64 % vol.

FORMEL FRÅN VILKA TABELLERNA ÖVER ALKOHOLHALTEN I ETANOL/VATTENBLANDNINGAR HAR BERÄKNATS

Densiteten ρ i kilogram per kubikmeter (kg/m3) hos en blandning av etanol och vatten vid temperaturen t i grader Celsius erhålls med formeln nedan som en funktion av:

alkoholhalten i viktprocent (p), angiven med en decimal

temperaturen t i °C (EIPT 68)

nedanstående talkoefficienter

Formeln gäller för temperaturer mellan - 20 och + 40 °C.

Talkoefficienter i formeln k Ak kg/m3 Bk 1 9,982 012 300 × 102 - 2,061 851 3 × 10-1 kg/(m3 × °C) 2 - 1,929 769 495 × 102 - 5,268 254 2 × 10-3 kg/(m3 × °C2) 3 3,891 238 958 × 102 3,613 001 3 × 10-5 kg/(m3 × °C3) 4 - 1,668 103 923 × 103 - 3,895 770 2 × 10-7 kg/(m3 × °C4) 5 1,352 215 441 × 104 7,169 354 0 × 10-9 kg/(m3 × °C5) 6 - 8,829 278 388 × 104 - 9,973 923 1 × 10-11 kg/(m3 × °C6) 7 3,062 874 042 × 105 8 - 6,138 381 234 × 105 9 7,470 172 998 × 105 10 - 5,478 461 354 × 105 11 2,234 460 334 × 105 12 - 3,903 285 426 × 104 k C1,k kg/(m3 × °C) C2,k kg/(m3 × °C2) 1 1,693 443 461 530 087 × 10-1 - 1,193 013 005 057 010 × 10-2 2 - 1,046 914 743 455 169 × 101 2,517 399 633 803 461 × 10-1 3 7,196 353 469 546 523 × 101 - 2,170 575 700 536 993 4 - 7,047 478 054 272 792 × 102 1,353 034 988 843 029 × 101 5 3,924 090 430 035 045 × 103 - 5,029 988 758 547 014 × 101 6 - 1,210 164 659 068 747 × 104 1,096 355 666 577 570 × 102 7 2,248 646 550 400 788 × 104 - 1,422 753 946 421 155 × 102 8 - 2,605 562 982 188 164 × 104 1,080 435 942 856 230 × 102 9 1,852 373 922 069 467 × 104 - 4,414 153 236 817 392 × 101 10 - 7,420 201 433 430 137 × 103 7,442 971 530 188 783 11 1,285 617 841 998 974 × 103 k C3,k kg/(m3 × °C3) C4,k kg/(m3 × °C4) C5,k kg/(m3 × °C5) 1 - 6,802 995 733 503 803 × 10-4 4,075 376 675 622 027 × 10-6 - 2,788 074 354 782 409 × 10-8 2 1,876 837 790 289 664 × 10-2 - 8,763 058 573 471 110 × 10-6 1,345 612 883 493 354 × 10-8 3 - 2,002 561 813 734 156 × 10-1 6,515 031 360 099 368 × 10-6 4 1,022 992 966 719 220 - 1,515 784 836 987 210 × 10-6 5 - 2,895 696 483 903 638 6 4,810 060 584 300 675 7 - 4,672 147 440 794 683 8 2,458 043 105 903 461 9 - 5,411 227 621 436 812 × 10-1

TABELL 1 INTERNATIONELL ALKOHOLHALT VID 20 °C

Tabell över skenbar densitet hos etanol/vattenblandningar - Pyknometer av pyrexglas Densitet vid t C, korrigerad för luftens upptryck to Alkoholhalt i % vol. 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 0o 999,64 1,50 998,14 1,44 996,70 1,40 995,30 1,35 993,95 1,30 992,65 1,24 991,41 1,19 990,22 1,14 989,08 1,10 987,98 1,05 986,93 1,00 985,93 0,95 -0,07 -0,06 -0,06 -0,06 -0,06 -0,06 -0,06 -0,05 -0,04 -0,03 -0,02 -0,01 1o 999,71 1,51 998,20 1,44 996,76 1,40 995,36 1,35 994,01 1,30 992,71 1,24 991,47 1,20 990,27 1,15 989,12 1,11 988,01 1,06 986,95 1,01 985,94 0,97 -0,05 -0,05 -0,04 -0,04 -0,04 -0,04 -0,03 -0,03 -0,02 -0,02 -0,01 0,00 2o 999,76 1,51 998,25 1,45 996,80 1,40 995,40 1,35 994,05 1,30 992,75 1,25 991,50 1,20 990,30 1,16 989,14 1,11 988,03 1,07 986,96 1,02 985,94 0,98 -0,03 -0,03 -0,03 -0,02 -0,02 -0,02 -0,02 -0,01 -0,01 0,00 0,01 0,02 3o 999,79 1,51 998,28 1,45 996,83 1,41 995,42 1,35 994,07 1,30 992,77 1,25 991,52 1,21 990,31 1,16 989,15 1,12 988,03 1,08 986,95 1,03 985,92 1,00 -0,02 -0,02 -0,01 -0,02 -0,01 -0,01 0,00 0,00 0,01 0,02 0,03 0,04 4o 999,81 1,51 998,30 1,46 996,84 1,40 995,44 1,36 994,08 1,30 992,78 1,26 991,52 1,21 990,31 1,17 989,14 1,13 988,01 1,09 986,92 1,04 985,88 1,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,01 0,02 0,02 0,02 0,02 0,03 0,04 0,05 5o 999,81 1,51 998,30 1,46 996,84 1,40 995,44 1,37 994,07 1,31 992,76 1,26 991,50 1,21 990,29 1,17 989,12 1,14 987,98 1,10 986,88 1,05 985,83 1,01 0,01 0,01 0,01 0,02 0,01 0,02 0,03 0,04 0,05 0,05 0,05 0,06 6o 999,80 1,51 998,29 1,46 996,83 1,41 995,42 1,36 994,06 1,32 992,74 1,27 991,47 1,22 990,25 1,18 989,07 1,14 987,93 1,10 986,83 1,06 985,77 1,03 0,03 0,03 0,03 0,03 0,04 0,04 0,04 0,05 0,06 0,07 0,08 0,09 7o 999,77 1,51 998,26 1,46 996,80 1,41 995,39 1,37 994,02 1,32 992,70 1,27 991,43 1,23 990,20 1,19 989,01 1,15 987,86 1,11 986,75 1,07 985,68 1,03 0,05 0,04 0,04 0,05 0,05 0,05 0,05 0,06 0,06 0,07 0,08 0,09 8o 999,72 1,50 998,22 1,46 996,76 1,42 995,34 1,37 993,97 1,32 992,65 1,27 991,38 1,24 990,14 1,19 988,95 1,16 987,79 1,12 986,67 1,08 985,59 1,05 0,05 0,06 0,06 0,06 0,06 0,06 0,07 0,07 0,08 0,09 0,10 0,11 9o 999,67 1,51 998,16 1,46 996,70 1,42 995,28 1,37 993,91 1,32 992,59 1,28 991,31 1,24 990,07 1,20 988,87 1,17 987,70 1,13 986,57 1,09 985,48 1,06 0,07 0,07 0,07 0,07 0,07 0,08 0,08 0,09 0,09 0,10 0,11 0,12 10o 999,60 1,51 998,09 1,46 996,63 1,42 995,21 1,37 993,84 1,33 992,51 1,28 991,23 1,25 989,98 1,20 988,78 1,17 987,60 1,14 986,46 1,10 985,36 1,06 0,09 0,09 0,09 0,08 0,09 0,09 0,10 0,10 0,11 0,11 0,12 0,13 11o 999,51 1,51 998,00 1,46 996,54 1,41 995,13 1,38 993,75 1,33 992,42 1,29 991,13 1,25 989,88 1,21 988,67 1,18 987,49 1,15 986,34 1,11 985,23 1,07 0,10 0,09 0,09 0,10 0,10 0,11 0,11 0,11 0,12 0,13 0,13 0,14 12o 999,41 1,50 997,91 1,46 996,45 1,42 995,03 1,38 993,65 1,34 992,31 1,29 991,02 1,25 989,77 1,22 988,55 1,19 987,36 1,15 986,21 1,12 985,09 1,09 0,11 0,11 0,11 0,11 0,11 0,11 0,12 0,12 0,13 0,14 0,15 0,16 13o 999,30 1,50 997,80 1,46 996,34 1,42 994,92 1,38 993,54 1,34 992,20 1,30 990,90 1,25 989,65 1,23 988,42 1,20 987,22 1,16 986,06 1,13 984,93 1,09 0,12 0,12 0,12 0,13 0,13 0,13 0,13 0,14 0,14 0,15 0,16 0,16 14o 999,18 1,50 997,68 1,46 996,22 1,43 994,79 1,38 993,41 1,34 992,07 1,30 990,77 1,26 989,51 1,23 988,28 1,21 987,07 1,17 985,90 1,13 984,77 1,11 0,13 0,14 0,14 0,13 0,13 0,14 0,14 0,15 0,16 0,16 0,17 0,18 15o 999,05 1,51 997,54 1,46 996,08 1,42 994,66 1,38 993,28 1,35 991,93 1,30 990,63 1,27 989,36 1,24 988,12 1,21 986,91 1,18 985,73 1,14 984,59 1,12 0,15 0,14 0,14 0,15 0,15 0,15 0,16 0,16 0,17 0,17 0,18 0,19 16o 998,90 1,50 997,40 1,46 995,94 1,43 994,51 1,38 993,13 1,35 991,78 1,31 990,47 1,27 989,20 1,25 987,95 1,21 986,74 1,19 985,55 1,15 984,40 1,13 0,16 0,16 0,16 0,16 0,16 0,17 0,17 0,18 0,18 0,19 0,19 0,20 17o 998,74 1,50 997,24 1,46 995,78 1,43 994,35 1,38 992,97 1,36 991,61 1,31 990,30 1,28 989,02 1,25 987,77 1,22 986,55 1,19 985,36 1,16 984,20 1,14 0,17 0,17 0,17 0,16 0,17 0,17 0,18 0,18 0,19 0,20 0,21 0,22 18o 998,57 1,50 997,07 1,46 995,61 1,42 994,19 1,39 992,80 1,36 991,44 1,32 990,12 1,28 988,84 1,26 987,58 1,23 986,35 1,20 985,15 1,17 983,98 1,14 0,18 0,18 0,18 0,19 0,19 0,19 0,19 0,20 0,20 0,20 0,21 0,22 19o 998,39 1,50 996,89 1,46 995,43 1,43 994,00 1,39 992,61 1,36 991,25 1,32 989,93 1,29 988,64 1,26 987,38 1,23 986,15 1,21 984,94 1,10 983,76 1,16 0,19 0,19 0,19 0,19 0,19 0,19 0,20 0,20 0,21 0,22 0,23 0,24 20o 998,20 1,50 996,70 1,46 995,24 1,43 993,81 1,39 992,42 1,36 991,06 1,33 989,73 1,29 988,44 1,27 987,17 1,24 985,93 1,22 984,71 1,19 983,52 1,16 to Alkoholhalt i % vol. 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 20o 998,20 1,50 996,70 1,46 995,24 1,43 993,81 1,39 992,42 1,36 991,06 1,33 989,73 1,29 988,44 1,27 987,17 1,24 985,93 1,22 984,71 1,19 983,52 1,16 0,20 0,20 0,20 0,20 0,21 0,21 0,21 0,22 0,22 0,23 0,24 0,24 21o 998,00 1,50 996,50 1,46 995,04 1,43 993,61 1,40 992,21 1,36 990,85 1,33 989,52 1,30 988,22 1,27 986,95 1,25 985,70 1,23 984,47 1,19 983,28 1,18 0,21 0,21 0,21 0,21 0,21 0,22 0,22 0,23 0,24 0,24 0,24 0,26 22o 997,79 1,50 996,29 1,46 994,83 1,43 993,40 1,40 992,00 1,37 990,63 1,33 989,30 1,31 987,99 1,28 986,71 1,25 985,46 1,23 984,23 1,21 983,02 1,18 0,22 0,22 0,23 0,23 0,23 0,23 0,24 0,24 0,24 0,25 0,26 0,25 23o 997,57 1,50 996,07 1,47 994,60 1,43 993,17 1,40 991,77 1,37 990,40 1,34 989,06 1,31 987,75 1,28 986,47 1,26 985,21 1,24 983,97 1,20 982,77 1,20 0,24 0,23 0,23 0,23 0,24 0,24 0,24 0,25 0,26 0,26 0,27 0,29 24o 997,33 1,49 995,84 1,47 994,37 1,43 992,94 1,41 991,53 1,37 990,16 1,34 988,82 1,32 987,50 1,29 986,21 1,26 984,95 1,25 983,70 1,22 982,48 1,20 0,24 0,25 0,24 0,25 0,24 0,25 0,26 0,26 0,26 0,27 0,28 0,28 25o 997,09 1,50 995,59 1,46 994,13 1,44 992,69 1,40 991,29 1,38 989,91 1,35 988,56 1,32 987,24 1,29 985,95 1,27 984,68 1,26 983,42 1,22 982,20 1,21 0,25 0,25 0,26 0,25 0,26 0,26 0,26 0,26 0,28 0,28 0,28 0,30 26o 996,84 1,50 995,34 1,47 993,87 1,43 992,44 1,41 991,03 1,38 989,65 1,35 988,30 1,32 986,98 1,31 985,67 1,27 984,40 1,26 983,14 1,24 981,90 1,22 0,26 0,26 0,26 0,27 0,27 0,27 0,27 0,28 0,28 0,29 0,30 0,30 27o 996,58 1,50 995,08 1,47 993,61 1,44 992,17 1,41 990,76 1,38 989,38 1,35 988,03 1,33 986,70 1,31 985,39 1,28 984,11 1,27 982,84 1,24 981,60 1,23 0,27 0,27 0,27 0,27 0,28 0,28 0,29 0,29 0,29 0,30 0,31 0,32 28o 996,31 1,50 994,81 1,47 993,34 1,44 991,90 1,42 990,48 1,38 989,10 1,36 987,74 1,33 986,41 1,31 985,10 1,29 983,81 1,28 982,53 1,25 981,28 1,23 0,28 0,28 0,28 0,29 0,28 0,29 0,29 0,30 0,31 0,31 0,31 0,32 29o 996,03 1,50 994,53 1,47 993,06 1,45 991,61 1,41 990,20 1,39 988,81 1,36 987,45 1,34 986,11 1,32 984,79 1,29 983,50 1,28 982,22 1,26 980,96 1,24 0,28 0,29 0,29 0,29 0,30 0,30 0,31 0,31 0,31 0,32 0,32 0,33 30o 995,75 1,51 994,24 1,47 992,77 1,45 991,32 1,42 989,90 1,39 988,51 1,37 987,14 1,34 985,80 1,32 984,48 1,30 983,18 1,28 981,90 1,27 980,63 1,25 0,30 0,30 0,30 0,30 0,31 0,31 0,31 0,31 0,32 0,33 0,34 0,34 31o 995,45 1,51 993,94 1,47 992,47 1,45 991,02 1,43 989,59 1,39 988,20 1,37 986,83 1,34 985,49 1,33 984,16 1,31 982,85 1,29 981,56 1,27 980,29 1,26 0,31 0,31 0,31 0,32 0,31 0,32 0,32 0,33 0,33 0,34 0,35 0,36 32o 995,14 1,51 993,63 1,47 992,16 1,46 990,70 1,42 989,28 1,40 987,88 1,37 986,51 1,35 985,16 1,33 983,83 1,32 982,51 1,30 981,21 1,28 979,93 1,26 0,31 0,31 0,32 0,32 0,32 0,33 0,33 0,34 0,35 0,35 0,35 0,35 33o 994,83 1,51 993,32 1,48 991,84 1,46 990,38 1,42 988,96 1,41 987,55 1,37 986,18 1,36 984,82 1,34 983,48 1,32 982,16 1,30 980,86 1,28 979,58 1,28 0,32 0,33 0,33 0,33 0,35 0,34 0,35 0,35 0,34 0,35 0,36 0,37 34o 994,51 1,52 992,99 1,48 991,51 1,46 990,05 1,44 988,61 1,40 987,21 1,38 985,83 1,36 984,47 1,33 983,14 1,33 981,81 1,31 980,50 1,29 979,21 1,28 0,33 0,33 0,34 0,35 0,34 0,35 0,35 0,35 0,36 0,36 0,36 0,37 35o 994,18 1,52 992,66 1,49 991,17 1,47 989,70 1,43 988,27 1,41 986,86 1,38 985,48 1,36 984,12 1,34 982,78 1,33 981,45 1,31 980,14 1,30 978,84 1,29 0,34 0,35 0,35 0,35 0,35 0,35 0,35 0,36 0,36 0,37 0,37 0,38 36o 993,84 1,53 992,31 1,49 990,82 1,47 989,35 1,43 987,92 1,41 986,51 1,38 985,13 1,37 983,76 1,34 982,42 1,34 981,08 1,31 979,77 1,31 978,46 1,29 0,35 0,35 0,36 0,35 0,36 0,36 0,37 0,37 0,38 0,37 0,39 0,39 37o 993,49 1,53 991,96 1,50 990,46 1,46 989,00 1,44 987,56 1,41 986,15 1,39 984,76 1,37 983,39 1,35 982,04 1,33 980,71 1,33 979,38 1,31 978,07 1,30 0,36 0,36 0,36 0,37 0,37 0,37 0,37 0,37 0,38 0,39 0,38 0,39 38o 993,13 1,53 991,60 1,50 990,10 1,47 988,63 1,44 987,19 1,41 985,78 1,39 984,39 1,37 983,02 1,36 981,66 1,34 980,32 1,32 979,00 1,32 977,68 1,31 0,36 0,37 0,37 0,37 0,38 0,38 0,38 0,39 0,38 0,39 0,40 0,40 39o 992,77 1,54 991,23 1,50 989,73 1,47 988,26 1,45 986,81 1,41 985,40 1,39 984,01 1,38 982,63 1,35 981,28 1,35 979,93 1,33 978,60 1,32 977,28 1,32 0,37 0,37 0,38 0,39 0,38 0,39 0,39 0,39 0,40 0,39 0,40 0,41 40o 992,40 1,54 990,86 1,51 989,35 1,48 987,87 1,44 986,43 1,42 985,01 1,39 983,62 1,38 982,24 1,36 980,88 1,34 979,54 1,34 978,20 1,33 976,87 1,32 to Alkoholhalt i % vol. 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 0 986,93 1,00 985,93 0,95 984,98 0,92 984,06 0,88 983,18 0,84 982,34 0,80 981,54 0,78 980,76 0,75 980,01 0,73 979,28 0,72 978,56 0,70 977,86 0,70 -0,02 -0,01 0,01 0,01 0,03 0,04 0,07 0,08 0,10 0,12 0,14 0,17 1 986,95 1,01 985,94 0,97 984,97 0,92 984,05 0,90 983,15 0,85 982,30 0,83 981,47 0,79 980,68 0,77 979,91 0,75 979,16 0,74 978,42 0,73 977,69 0,72 -0,01 0,00 0,01 0,03 0,04 0,07 0,08 0,10 0,12 0,14 0,16 0,18 2 986,96 1,02 985,94 0,98 984,96 0,94 984,02 0,91 983,11 0,88 982,23 0,84 981,39 0,81 980,58 0,79 979,79 0,77 979,02 0,76 978,26 0,75 977,51 0,74 0,01 0,02 0,04 0,05 0,06 0,07 0,09 0,11 0,13 0,15 0,17 0,19 3 986,95 1,03 985,92 1,00 984,92 0,95 983,97 0,92 983,05 0,89 982,16 0,86 981,30 0,83 980,47 0,81 979,66 0,79 978,87 0,78 978,09 0,77 977,32 0,77 0,03 0,04 0,04 0,06 0,07 0,09 0,10 0,12 0,14 0,16 0,18 0,20 4 986,92 1,04 985,88 1,00 984,88 0,97 983,91 0,93 982,98 0,91 982,07 0,87 981,20 0,85 980,35 0,83 979,52 0,81 978,71 0,80 977,91 0,79 977,12 0,79 0,04 0,05 0,06 0,07 0,09 0,10 0,12 0,14 0,15 0,17 0,19 0,22 5 986,88 1,05 985,83 1,01 984,82 0,98 983,84 0,95 982,89 0,92 981,97 0,89 981,08 0,87 980,21 0,84 979,37 0,83 978,54 0,82 977,72 0,82 976,90 0,80 0,05 0,06 0,08 0,09 0,10 0,12 0,13 0,14 0,17 0,19 0,21 0,22 6 986,83 1,06 985,77 1,03 984,74 0,99 983,75 0,96 982,79 0,94 981,85 0,90 980,95 0,88 980,07 0,87 979,20 0,85 978,35 0,84 977,51 0,83 976,68 0,83 0,08 0,09 0,09 0,10 0,12 0,13 0,15 0,16 0,18 0,19 0,21 0,23 7 986,75 1,07 985,68 1,03 984,65 1,00 983,65 0,98 982,67 0,95 981,72 0,92 980,80 0,89 979,91 0,89 979,02 0,86 978,16 0,86 977,30 0,85 976,45 0,85 0,08 0,09 0,11 0,13 0,13 0,14 0,15 0,18 0,19 0,21 0,23 0,25 8 986,67 1,08 985,59 1,05 984,54 1,02 983,52 0,98 982,54 0,96 981,58 0,93 980,65 0,92 979,73 0,90 978,83 0,88 977,95 0,88 977,07 0,87 976,20 0,87 0,10 0,11 0,12 0,12 0,14 0,16 0,18 0,19 0,21 0,22 0,24 0,26 9 986,57 1,09 985,48 1,06 984,42 1,02 983,40 1,00 982,40 0,98 981,42 0,95 980,47 0,93 979,54 0,92 978,62 0,89 977,73 0,90 976,83 0,89 975,94 0,89 0,11 0,12 0,12 0,14 0,16 0,17 0,18 0,20 0,20 0,23 0,24 0,26 10 986,46 1,10 985,36 1,06 984,30 1,04 983,26 1,02 982,24 0,99 981,25 0,96 980,29 0,95 979,34 0,92 978,42 0,92 977,50 0,91 976,59 0,91 975,68 0,91 0,12 0,13 0,14 0,16 0,16 0,17 0,19 0,20 0,23 0,25 0,27 0,29 11 986,34 1,11 985,23 1,07 984,16 1,06 983,10 1,02 982,08 1,00 981,08 0,98 980,10 0,96 979,14 0,95 978,19 0,94 977,25 0,93 976,32 0,93 975,39 0,92 0,13 0,14 0,16 0,16 0,18 0,19 0,21 0,22 0,24 0,25 0,27 0,28 12 986,21 1,12 985,09 1,09 984,00 1,06 982,94 1,04 981,90 1,01 980,89 1,00 979,89 0,97 978,92 0,97 977,95 0,95 977,00 0,95 976,05 0,94 975,11 0,95 0,15 0,16 0,16 0,18 0,19 0,20 0,21 0,23 0,24 0,26 0,28 0,30 13 986,06 1,13 984,93 1,09 983,84 1,08 982,76 1,05 981,71 1,02 980,69 1,01 979,68 0,99 978,69 0,98 977,71 0,97 976,74 0,97 975,77 0,96 974,81 0,96 0,16 0,16 0,18 0,18 0,20 0,22 0,23 0,24 0,26 0,27 0,28 0,30 14 985,90 1,13 984,77 1,11 983,66 1,08 982,58 1,07 981,51 1,04 980,47 1,02 979,45 1,00 978,45 1,00 977,45 0,98 976,47 0,98 975,49 0,98 975,51 0,98 0,17 0,18 0,19 0,20 0,21 0,22 0,24 0,25 0,26 0,28 0,30 0,32 15 985,73 1,14 984,59 1,12 983,47 1,09 982,38 1,08 981,30 1,05 960,25 1,04 979,21 1,01 978,20 1,01 977,19 1,00 976,19 1,00 975,19 1,00 974,19 1,00 0,18 0,19 0,20 0,22 0,22 0,24 0,24 0,27 0,28 0,30 0,31 0,32 16 985,55 1,15 984,40 1,13 983,27 1,11 982,16 1,08 981,08 1,07 980,01 1,04 978,97 1,04 977,93 1,02 976,91 1,02 975,89 1,01 974,88 1,01 973,87 1,02 0,19 0,20 0,21 0,22 0,23 0,24 0,26 0,27 0,29 0,30 0,32 0,33 17 985,36 1,16 984,20 1,14 983,06 1,12 981,94 1,09 980,85 1,08 979,77 1,06 978,71 1,05 977,66 1,04 976,62 1,03 975,59 1,03 974,56 1,02 973,54 1,04 0,21 0,22 0,22 0,23 0,25 0,26 0,27 0,28 0,29 0,31 0,32 0,35 18 985,15 1,17 983,98 1,14 982,84 1,13 981,71 1,11 980,60 1,09 979,51 1,07 978,44 1,06 977,38 1,05 976,33 1,05 975,28 1,04 974,24 1,05 973,19 1,05 0,21 0,22 0,24 0,24 0,25 0,26 0,28 0,29 0,31 0,32 0,34 0,35 19 984,94 1,18 983,76 1,16 982,60 1,13 981,47 1,12 980,35 1,10 979,25 1,09 978,16 1,07 977,09 1,07 976,02 1,06 974,96 1,06 973,90 1,06 972,84 1,06 0,23 0,24 0,24 0,26 0,27 0,28 0,29 0,30 0,31 0,33 0,34 0,36 20 984,71 1,19 983,52 1,16 982,36 1,15 981,21 1,13 980,08 1,11 978,97 1,10 977,87 1,08 976,79 1,08 975,71 1,08 974,63 1,07 973,56 1,08 972,48 1,08 to Alkoholhalt i % vol. 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 20o 984,71 1,19 983,52 1,16 982,36 1,15 981,21 1,13 980,08 1,11 978,97 1,10 977,87 1,08 976,79 1,08 975,71 1,08 974,63 1,07 973,56 1,08 972,48 1,08 0,24 0,24 0,26 0,26 0,27 0,28 0,29 0,31 0,33 0,34 0,36 0,37 21o 984,47 1,19 983,28 1,18 982,10 1,15 980,95 1,14 978,81 1,12 978,69 1,11 977,58 1,10 976,48 1,10 975,38 1,09 974,29 1,09 973,20 1,09 972,11 1,09 0,24 0,26 0,28 0,29 0,30 0,31 0,33 0,33 0,35 0,35 0,36 0,37 22o 984,23 1,21 983,02 1,18 981,84 1,17 980,67 1,15 979,52 1,13 978,39 1,12 977,27 1,12 976,15 1,10 975,05 1,11 973,94 1,10 972,84 1,10 971,74 1,12 0,26 0,26 0,27 0,28 0,29 0,31 0,32 0,33 0,35 0,35 0,37 0,39 23o 983,97 1,20 982,77 1,20 981,57 1,18 980,39 1,16 979,23 1,15 978,08 1,13 976,95 1,13 975,82 1,12 974,70 1,11 973,59 1,12 972,47 1,12 972,47 1,12 0,27 0,29 0,29 0,29 0,30 0,31 0,33 0,33 0,35 0,37 0,38 0,40 24o 983,70 1,22 982,48 1,20 981,28 1,18 980,10 1,17 978,93 1,16 977,77 1,15 976,62 1,13 975,49 1,14 974,35 1,13 973,22 1,13 972,09 1,14 970,95 1,14 0,28 0,28 0,29 0,31 0,32 0,33 0,33 0,35 0,36 0,37 0,39 0,40 25o 983,42 1,22 982,20 1,21 980,99 1,20 979,79 1,18 978,61 1,17 977,44 1,15 976,29 1,15 975,14 1,15 973,99 1,14 972,85 1,15 971,70 1,15 970,55 1,16 0,28 0,30 0,31 0,31 0,32 0,33 0,35 0,36 0,37 0,39 0,40 0,41 26o 983,14 1,24 981,90 1,22 980,68 1,20 979,48 1,19 978,29 1,18 977,11 1,17 975,94 1,16 974,78 1,16 973,62 1,16 972,46 1,16 971,30 1,16 970,14 1,17 0,30 0,30 0,31 0,32 0,33 0,34 0,35 0,36 0,38 0,39 0,40 0,42 27o 982,84 1,24 981,60 1,23 980,37 1,21 979,16 1,20 977,96 1,19 976,77 1,18 975,59 1,17 974,42 1,18 973,24 1,17 972,07 1,17 970,90 1,18 969,72 1,18 0,31 0,32 0,32 0,33 0,34 0,35 0,36 0,38 0,38 0,40 0,41 0,43 28o 982,53 1,25 981,28 1,23 980,05 1,22 978,83 1,21 977,62 1,20 976,42 1,19 975,23 1,19 974,04 1,18 972,86 1,19 971,67 1,18 970,49 1,20 969,29 1,20 0,31 0,32 0,33 0,34 0,35 0,36 0,37 0,38 0,40 0,40 0,42 0,43 29o 982,22 1,26 980,96 1,24 979,72 1,23 978,49 1,22 977,27 1,21 976,06 1,20 974,86 1,20 973,66 1,20 972,46 1,19 971,27 1,20 970,07 1,21 968,86 1,22 0,32 0,33 0,34 0,35 0,36 0,37 0,38 0,40 0,41 0,43 0,44 0,45 30o 981,90 1,27 980,63 1,25 979,38 1,24 978,14 1,23 976,91 1,22 975,69 1,21 974,48 1,22 973,26 1,21 972,05 1,21 970,84 1,21 969,63 1,22 968,41 1,23 0,34 0,34 0,35 0,36 0,37 0,38 0,40 0,40 0,41 0,42 0,44 0,45 31o 981,56 1,27 980,29 1,26 979,03 1,25 977,78 1,24 976,54 1,23 975,31 1,23 974,08 1,22 972,86 1,22 971,64 1,22 970,42 1,23 969,19 1,23 967,96 1,24 0,35 0,36 0,36 0,37 0,38 0,39 0,39 0,40 0,42 0,43 0,44 0,46 32o 981,21 1,28 979,93 1,26 978,67 1,26 977,41 1,25 976,16 1,24 974,92 1,23 973,69 1,23 972,46 1,24 971,22 1,23 969,99 1,24 968,75 1,25 967,50 1,25 0,35 0,35 0,37 0,37 0,38 0,39 0,40 0,42 0,42 0,44 0,45 0,46 33o 980,86 1,28 979,58 1,28 978,30 1,26 977,04 1,26 975,78 1,25 974,53 1,24 973,29 1,25 972,04 1,24 970,80 1,25 969,55 1,25 968,30 1,26 967,04 1,27 0,36 0,37 0,37 0,38 0,39 0,40 0,41 0,42 0,43 0,44 0,46 0,47 34o 980,50 1,29 979,21 1,28 977,93 1,27 976,66 1,27 975,39 1,26 974,13 1,25 972,88 1,26 971,62 1,25 970,37 1,26 969,11 1,27 967,84 1,27 966,57 1,29 0,36 0,37 0,38 0,39 0,39 0,40 0,42 0,42 0,44 0,46 0,46 0,48 35o 980,14 1,30 978,84 1,29 977,55 1,28 976,27 1,27 975,00 1,27 973,73 1,27 972,46 1,26 971,20 1,27 969,93 1,28 968,65 1,27 967,38 1,29 966,09 1,30 0,37 0,38 0,38 0,39 0,40 0,41 0,42 0,44 0,45 0,45 0,47 0,48 36o 979,77 1,31 978,46 1,29 977,17 1,29 975,88 1,28 974,60 1,28 973,32 1,28 972,04 1,28 970,76 1,28 969,48 1,28 968,20 1,29 966,91 1,30 965,61 1,32 0,39 0,39 0,40 0,40 0,41 0,42 0,43 0,44 0,45 0,47 0,48 0,49 37o 978,38 1,31 978,07 1,30 976,77 1,29 975,48 1,29 974,19 1,29 972,90 1,29 971,61 1,29 970,32 1,29 969,03 1,30 967,73 1,30 966,43 1,31 965,12 1,33 0,38 0,39 0,40 0,41 0,42 0,43 0,44 0,45 0,46 0,47 0,49 0,50 38o 979,00 1,32 977,68 1,31 976,37 1,30 975,07 1,30 973,77 1,30 972,47 1,30 971,17 1,30 969,87 1,30 968,57 1,31 967,26 1,32 965,94 1,32 964,62 1,34 0,40 0,40 0,41 0,42 0,42 0,43 0,44 0,45 0,47 0,48 0,49 0,50 39o 978,60 1,32 977,28 1,32 975,96 1,31 974,65 1,30 973,35 1,31 972,04 1,31 970,73 1,31 969,42 1,32 968,10 1,32 966,78 1,33 965,45 1,33 964,12 1,36 0,40 0,41 0,41 0,42 0,43 0,44 0,45 0,46 0,47 0,48 0,49 0,51 40o 978,20 1,33 976,87 1,32 975,55 1,32 974,23 1,31 972,92 1,32 971,60 1,32 970,28 1,32 968,96 1,33 967,63 1,33 966,30 1,34 964,96 1,35 963,61 1,37 to Alkoholhalt i % vol. 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 0 978,56 0,70 977,86 0,70 977,16 0,69 976,47 0,71 975,76 0,71 975,05 0,72 974,33 0,75 973,58 0,77 972,81 0,80 972,01 0,83 971,18 0,87 970,31 0,90 0,14 0,17 0,19 0,22 0,24 0,26 0,29 0,31 0,34 0,36 0,39 0,41 1 978,42 0,73 977,69 0,72 976,97 0,72 976,25 0,73 975,52 0,73 974,79 0,75 974,04 0,77 973,27 0,80 972,47 0,82 971,65 0,86 970,79 0,89 969,90 0,92 0,16 0,18 0,20 0,23 0,25 0,28 0,30 0,32 0,34 0,37 0,39 0,41 2 978,26 0,75 977,51 0,74 976,77 0,75 976,02 0,75 975,27 0,76 974,51 0,77 973,74 0,79 972,95 0,82 972,13 0,85 971,28 0,88 970,40 0,91 969,49 0,95 0,17 0,19 0,22 0,23 0,26 0,28 0,31 0,33 0,36 0,38 0,40 0,42 3 978,09 0,77 977,32 0,77 976,55 0,76 975,79 0,78 975,01 0,78 974,23 0,80 973,43 0,81 972,62 0,85 971,77 0,87 970,90 0,90 970,00 0,93 969,07 0,98 0,18 0,20 0,22 0,25 0,27 0,29 0,31 0,34 0,36 0,38 0,40 0,43 4 977,91 0,79 977,12 0,79 976,33 0,79 975,54 0,80 974,94 0,80 973,94 0,82 973,12 0,84 972,28 0,87 971,41 0,89 970,52 0,92 969,60 0,96 968,64 1,00 0,19 0,22 0,23 0,26 0,27 0,30 0,33 0,35 0,37 0,39 0,42 0,44 5 977,72 0,82 976,90 0,80 976,10 0,82 975,28 0,81 974,47 0,83 973,64 0,85 972,79 0,86 971,93 0,89 971,04 0,91 970,13 0,95 969,18 0,98 968,20 1,01 0,21 0,22 0,25 0,26 0,29 0,31 0,33 0,35 0,37 0,40 0,42 0,44 6 977,51 0,83 976,68 0,83 975,85 0,83 975,02 0,84 974,18 0,85 973,33 0,87 972,46 0,86 971,58 0,91 970,67 0,94 969,73 0,97 968,76 1,00 967,76 1,03 0,21 0,23 0,25 0,28 0,30 0,32 0,34 0,36 0,38 0,40 0,42 0,44 7 977,30 0,85 976,45 0,85 975,60 0,86 974,74 0,86 973,88 0,87 973,01 0,89 972,12 0,90 971,22 0,93 970,29 0,96 969,33 0,99 968,34 1,02 967,32 1,06 0,23 0,25 0,27 0,28 0,31 0,33 0,35 0,37 0,40 0,42 0,43 0,46 8 977,07 0,87 976,20 0,87 975,33 0,87 974,46 0,89 973,57 0,89 972,68 0,91 971,77 0,92 970,85 0,96 969,89 0,98 968,91 1,00 967,91 1,05 966,86 1,07 0,24 0,26 0,28 0,30 0,31 0,34 0,35 0,38 0,39 0,41 0,44 0,46 9 976,83 0,89 975,94 0,89 975,05 0,89 974,16 0,90 973,26 0,92 972,34 0,92 971,42 0,95 970,47 0,97 969,50 1,00 968,50 1,03 967,47 1,07 966,40 1,09 0,24 0,26 0,28 0,30 0,33 0,34 0,37 0,39 0,41 0,43 0,45 0,46 10 976,59 0,91 975,68 0,91 974,77 0,91 973,86 0,93 972,93 0,93 972,00 0,95 971,05 0,97 970,08 0,99 969,09 1,02 968,07 1,05 967,02 1,08 965,94 1,12 0,27 0,29 0,30 0,33 0,34 0,36 0,38 0,40 0,42 0,44 0,46 0,47 11 976,32 0,93 975,39 0,92 974,47 0,94 973,53 0,94 972,59 0,95 971,64 0,97 970,67 0,99 969,68 1,01 968,67 1,04 967,63 1,07 966,56 1,09 965,47 1,13 0,27 0,28 0,31 0,32 0,34 0,36 0,38 0,40 0,42 0,44 0,45 0,48 12 976,05 0,94 975,11 0,95 974,16 0,95 973,21 0,96 972,25 0,97 971,28 0,99 970,29 1,01 969,28 1,03 968,25 1,06 967,19 1,08 966,11 1,12 964,99 1,15 0,28 0,30 0,31 0,33 0,35 0,37 0,39 0,41 0,43 0,45 0,47 0,49 13 975,77 0,96 974,81 0,96 973,85 0,97 972,88 0,98 971,90 0,99 970,91 1,01 969,90 1,03 968,87 1,05 967,82 1,08 966,74 1,10 965,64 1,14 964,50 1,17 0,28 0,30 0,32 0,34 0,36 0,38 0,40 0,41 0,43 0,45 0,47 0,49 14 975,49 0,98 974,51 0,98 973,53 0,99 972,54 1,00 971,54 1,01 970,53 1,03 969,50 1,04 968,46 1,07 967,39 1,10 966,29 1,12 965,17 1,16 964,01 1,19 0,30 0,32 0,34 0,35 0,37 0,39 0,40 0,42 0,44 0,46 0,48 0,49 15 975,19 1,00 974,19 1,00 973,19 1,00 972,19 1,02 971,17 1,03 970,14 1,04 969,10 1,06 968,04 1,09 966,95 1,12 965,83 1,14 964,69 1,17 963,52 1,21 0,31 0,32 0,34 0,36 0,37 0,39 0,41 0,43 0,45 0,46 0,48 0,51 16 974,88 1,01 973,87 1,02 972,85 1,02 971,83 1,03 970,80 1,05 969,75 1,06 968,69 1,08 967,61 1,11 966,50 1,13 965,37 1,16 964,21 1,20 963,01 1,22 0,32 0,33 0,35 0,37 0,39 0,40 0,42 0,44 0,45 0,48 0,50 0,50 17 974,56 1,02 973,54 1,04 972,50 1,04 971,46 1,05 970,41 1,06 969,35 1,08 968,27 1,10 967,17 1,12 966,05 1,16 964,89 1,18 963,71 1,20 962,51 1,24 0,32 0,35 0,36 0,37 0,39 0,41 0,43 0,45 0,47 0,48 0,49 0,52 18 974,24 1,05 973,19 1,05 972,14 1,05 971,09 1,07 970,02 1,08 968,94 1,10 967,84 1,12 966,72 1,14 965,58 1,17 964,41 1,19 963,22 1,23 961,99 1,25 0,34 0,35 0,36 0,39 0,40 0,42 0,43 0,45 0,47 0,48 0,50 0,52 19 973,90 1,06 972,84 1,06 971,78 1,08 970,70 1,08 969,62 1,10 968,52 1,11 967,41 1,14 966,27 1,16 965,11 1,18 963,93 1,21 962,72 1,25 961,47 1,27 0,34 0,36 0,38 0,39 0,41 0,42 0,45 0,46 0,47 0,49 0,51 0,52 20 973,56 1,08 972,48 1,08 971,40 1,09 970,31 1,10 969,21 1,11 968,10 1,14 966,96 1,15 965,81 1,17 964,64 1,20 963,44 1,23 962,21 1,26 960,95 1,29 to Alkoholhalt i % vol. 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 20 973,56 1,08 972,48 1,08 971,40 1,09 970,31 1,10 969,21 1,11 968,10 1,14 966,96 1,15 965,81 1,17 964,64 1,20 963,44 1,23 962,21 1,26 960,95 1,29 0,36 0,37 0,38 0,40 0,42 0,44 0,45 0,46 0,49 0,50 0,52 0,53 21 973,20 1,09 972,11 1,09 971,02 1,11 969,91 1,12 968,79 1,13 967,66 1,15 966,51 1,16 965,35 1,20 964,15 1,21 962,94 1,25 961,69 1,27 960,42 1,31 0,36 0,37 0,40 0,41 0,42 0,44 0,45 0,48 0,49 0,51 0,52 0,54 22 972,84 1,10 971,74 1,12 970,62 1,12 969,50 1,13 968,37 1,15 967,22 1,16 966,06 1,19 964,87 1,21 963,66 1,23 962,43 1,26 961,17 1,29 959,88 1,32 0,37 0,39 0,40 0,42 0,43 0,45 0,47 0,48 0,49 0,51 0,53 0,55 23 972,47 1,12 971,35 1,13 970,22 1,14 969,08 1,14 967,94 1,17 966,77 1,18 965,59 1,20 964,39 1,22 963,17 1,25 961,92 1,28 960,64 1,31 959,33 1,33 0,38 0,40 0,41 0,42 0,44 0,45 0,47 0,49 0,51 0,52 0,54 0,55 24 972,09 1,14 970,95 1,14 969,81 1,15 968,66 1,16 967,50 1,18 966,32 1,20 965,12 1,22 963,90 1,24 962,66 1,26 961,40 1,30 960,10 1,32 958,78 1,35 0,39 0,40 0,42 0,43 0,45 0,47 0,48 0,49 0,51 0,53 0,54 0,55 25 971,70 1,15 970,55 1,16 969,39 1,16 968,23 1,18 967,05 1,20 965,85 1,21 964,64 1,23 963,41 1,26 962,15 1,28 960,87 1,31 959,56 1,33 958,23 1,37 0,40 0,41 0,42 0,44 0,46 0,47 0,49 0,50 0,51 0,53 0,54 0,57 26 971,30 1,16 970,14 1,17 968,97 1,18 967,79 1,20 966,59 1,21 965,38 1,23 964,15 1,24 962,91 1,27 961,64 1,30 960,34 1,32 959,02 1,36 957,66 1,38 0,40 0,42 0,43 0,45 0,46 0,48 0,49 0,51 0,53 0,54 0,56 0,56 27 970,90 1,18 969,72 1,18 968,54 1,20 967,34 1,21 966,13 1,23 964,90 1,24 963,66 1,26 962,40 1,29 961,11 1,31 959,80 1,34 958,46 1,36 957,10 1,40 0,41 0,43 0,45 0,46 0,47 0,48 0,50 0,52 0,54 0,56 0,57 0,59 28 970,49 1,20 969,29 1,20 968,09 1,21 966,88 1,22 965,66 1,24 964,42 1,26 963,16 1,28 961,88 1,31 960,57 1,33 959,24 1,35 957,89 1,38 956,51 1,41 0,42 0,43 0,45 0,47 0,49 0,50 0,52 0,53 0,53 0,55 0,56 0,58 29 970,07 1,21 968,86 1,22 967,64 1,23 966,41 1,24 965,17 1,25 963,92 1,28 962,64 1,29 961,35 1,31 960,04 1,35 958,69 1,36 957,33 1,40 955,93 1,42 0,44 0,45 0,46 0,47 0,49 0,50 0,51 0,53 0,55 0,55 0,58 0,58 30 969,63 1,22 968,41 1,23 967,18 1,24 965,94 1,26 964,68 1,26 963,42 1,29 962,13 1,31 960,82 1,33 959,49 1,35 958,14 1,39 956,75 1,40 955,35 1,44 0,44 0,45 0,46 0,48 0,49 0,51 0,52 0,53 0,55 0,57 0,58 0,60 31 969,19 1,23 967,96 1,24 966,72 1,26 965,46 1,27 964,19 1,28 962,91 1,30 961,61 1,32 960,29 1,35 958,94 1,37 957,57 1,40 956,17 1,42 954,75 1,44 0,44 0,46 0,47 0,48 0,50 0,51 0,53 0,54 0,55 0,57 0,58 0,59 32 968,75 1,25 967,50 1,25 966,25 1,27 964,98 1,29 963,69 1,29 962,40 1,32 961,08 1,33 959,75 1,36 958,39 1,39 957,00 1,41 955,59 1,43 954,16 1,46 0,45 0,46 0,48 0,49 0,50 0,52 0,53 0,55 0,57 0,57 0,59 0,61 33 968,30 1,26 967,04 1,27 965,77 1,28 964,49 1,30 963,19 1,31 961,88 1,33 960,55 1,35 959,20 1,38 957,82 1,39 956,43 1,43 955,00 1,45 953,55 1,47 0,46 0,47 0,49 0,50 0,51 0,53 0,54 0,56 0,56 0,59 0,59 0,60 34 967,84 1,27 966,57 1,29 965,28 1,29 963,99 1,31 962,68 1,33 961,35 1,34 960,01 1,37 958,64 1,38 957,26 1,42 955,84 1,43 954,41 1,46 952,95 1,49 0,46 0,48 0,49 0,51 0,52 0,53 0,55 0,56 0,58 0,58 0,60 0,62 35 967,38 1,29 966,09 1,30 964,79 1,31 963,48 1,32 962,16 1,34 960,82 1,36 959,46 1,38 958,08 1,40 956,68 1,42 955,26 1,45 953,81 1,48 952,33 1,50 0,47 0,48 0,50 0,51 0,53 0,54 0,55 0,57 0,58 0,60 0,61 0,62 36 966,91 1,30 965,61 1,32 964,29 1,32 962,97 1,34 961,63 1,35 960,28 1,37 958,91 1,40 957,51 1,41 956,10 1,44 954,66 1,46 953,20 1,49 951,71 1,51 0,48 0,49 0,50 0,52 0,53 0,55 0,56 0,57 0,59 0,60 0,61 0,62 37 966,43 1,31 965,12 1,33 963,79 1,34 962,45 1,35 961,10 1,37 959,73 1,38 958,35 1,41 956,94 1,43 955,51 1,45 954,06 1,47 952,59 1,50 951,09 1,53 0,49 0,50 0,51 0,52 0,54 0,55 0,57 0,58 0,59 0,60 0,62 0,63 38 965,94 1,32 964,62 1,34 963,28 1,35 961,93 1,37 960,56 1,38 959,18 1,40 957,78 1,42 956,36 1,44 954,92 1,46 953,46 1,49 951,97 1,51 950,46 1,54 0,49 0,50 0,52 0,53 0,54 0,56 0,57 0,58 0,60 0,61 0,62 0,64 39 965,45 1,33 964,12 1,36 962,76 1,36 961,40 1,38 960,02 1,40 958,62 1,41 957,21 1,43 955,78 1,46 954,32 1,47 952,85 1,50 951,35 1,53 949,82 1,55 0,49 0,51 0,52 0,54 0,55 0,56 0,58 0,59 0,60 0,62 0,63 0,64 40 964,96 1,35 963,61 1,37 962,24 1,38 960,86 1,39 959,47 1,41 958,06 1,43 956,63 1,44 955,19 1,47 953,72 1,49 952,23 1,51 950,72 1,54 949,18 1,57

TABELL 2 INTERNATIONELL ALKOHOLHALT VID 20, C

Tabell för korrektion av den skenbara alkoholhalten med hänsyn till temperaturen Den skenbara alkoholhalten vid t °C korrigeras genom addition eller subtraktion enligt nedan (alkoholometer av vanligt glas) Skenbar alkoholhalt vid t °C 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 Temperatur (°C) 0o Addera 0,76 0,77 0,82 0,87 0,95 1,04 1,16 1,31 1,49 1,70 1,95 2,26 2,62 3,03 3,49 4,02 4,56 1o 0,81 0,83 0,87 0,92 1,00 1,09 1,20 1,35 1,52 1,73 1,97 2,26 2,59 2,97 3,40 3,87 4,36 2o 0,85 0,87 0,92 0,97 1,04 1,13 1,24 1,38 1,54 1,74 1,97 2,24 2,54 2,89 3,29 3,72 4,17 3o 0,88 0,91 0,95 1,00 1,07 1,15 1,26 1,39 1,55 1,73 1,95 2,20 2,48 2,80 3,16 3,55 3,95 4o 0,90 0,92 0,97 1,02 1,09 1,17 1,27 1,40 1,55 1,72 1,92 2,15 2,41 2,71 3,03 3,38 3,75 5o 0,91 0,93 0,98 1,03 1,10 1,17 1,27 1,39 1,53 1,69 1,87 2,08 2,33 2,60 2,89 3,21 3,54 6o 0,92 0,94 0,98 1,02 1,09 1,16 1,25 1,37 1,50 1,65 1,82 2,01 2,23 2,47 2,74 3,02 3,32 7o 0,91 0,93 0,97 1,01 1,07 1,14 1,23 1,33 1,45 1,59 1,75 1,92 2,12 2,34 2,58 2,83 3,10 8o 0,89 0,91 0,94 0,98 1,04 1,11 1,19 1,28 1,39 1,52 1,66 1,82 2,00 2,20 2,42 2,65 2,88 9o 0,86 0,88 0,91 0,95 1,01 1,07 1,14 1,23 1,33 1,44 1,57 1,71 1,87 2,05 2,24 2,44 2,65 10o 0,82 0,84 0,87 0,91 0,96 1,01 1,08 1,16 1,25 1,35 1,47 1,60 1,74 1,89 2,06 2,24 2,43 11o 0,78 0,79 0,82 0,86 0,90 0,95 1,01 1,08 1,16 1,25 1,36 1,47 1,60 1,73 1,88 2,03 2,20 12o 0,72 0,74 0,76 0,79 0,83 0,88 0,93 0,99 1,07 1,15 1,24 1,34 1,44 1,56 1,69 1,82 1,96 13o 0,66 0,67 0,69 0,72 0,76 0,80 0,84 0,90 0,96 1,03 1,11 1,19 1,28 1,38 1,49 1,61 1,73 14o 0,59 0,60 0,62 0,64 0,67 0,71 0,74 0,79 0,85 0,91 0,97 1,04 1,12 1,20 1,29 1,39 1,49 15o 0,51 0,52 0,53 0,55 0,58 0,61 0,64 0,68 0,73 0,77 0,83 0,89 0,95 1,02 1,09 1,16 1,24 16o 0,42 0,43 0,44 0,46 0,48 0,50 0,53 0,56 0,60 0,63 0,67 0,72 0,77 0,82 0,88 0,94 1,00 17o 0,33 0,33 0,34 0,35 0,37 0,39 0,41 0,43 0,46 0,48 0,51 0,55 0,59 0,62 0,67 0,71 0,75 18o 0,23 0,23 0,23 0,24 0,25 0,26 0,27 0,29 0,31 0,33 0,35 0,37 0,40 0,42 0,45 0,48 0,51 19o 0,12 0,12 0,12 0,12 0,13 0,13 0,14 0,15 0,16 0,17 0,18 0,19 0,20 0,21 0,23 0,24 0,25 Skenbar alkoholhalt vid t °C 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 Temperatur (°C) 21o Subtrahera 0,13 0,13 0,13 0,14 0,14 0,15 0,16 0,17 0,18 0,19 0,19 0,20 0,22 0,23 0,25 0,26 22o 0,26 0,27 0,28 0,29 0,30 0,31 0,32 0,34 0,36 0,37 0,39 0,41 0,44 0,47 0,49 0,52 23o 0,40 0,41 0,42 0,44 0,45 0,47 0,49 0,51 0,54 0,57 0,60 0,63 0,66 0,70 0,74 0,78 24o 0,55 0,56 0,58 0,60 0,62 0,64 0,67 0,70 0,73 0,77 0,81 0,85 0,89 0,94 0,99 1,04 25o 0,69 0,71 0,73 0,76 0,79 0,82 0,85 0,89 0,93 0,97 1,02 1,07 1,13 1,19 1,25 1,31 26o 0,85 0,87 0,90 0,93 0,96 1,00 1,04 1,08 1,13 1,18 1,24 1,30 1,36 1,43 1,50 1,57 27o 1,03 1,07 1,11 1,15 1,19 1,23 1,28 1,34 1,40 1,46 1,53 1,60 1,68 1,76 1,84 28o 1,21 1,25 1,29 1,33 1,38 1,43 1,49 1,55 1,62 1,69 1,77 1,85 1,93 2,02 2,11 29o 1,39 1,43 1,47 1,52 1,58 1,63 1,70 1,76 1,84 1,92 2,01 2,10 2,19 2,29 2,39 30o 1,57 1,61 1,66 1,72 1,78 1,84 1,91 1,98 2,07 2,15 2,25 2,35 2,45 2,56 2,67 31o 1,75 1,80 1,86 1,92 1,98 2,05 2,13 2,21 2,30 2,39 2,49 2,60 2,71 2,83 2,94 32o 1,94 2,00 2,06 2,13 2,20 2,27 2,35 2,44 2,53 2,63 2,74 2,86 2,97 3,09 3,22 33o 2,20 2,27 2,34 2,42 2,50 2,58 2,67 2,77 2,88 2,99 3,12 3,24 3,37 3,51 34o 2,41 2,48 2,56 2,64 2,72 2,81 2,91 3,02 3,13 3,25 3,38 3,51 3,65 3,79 35o 2,62 2,70 2,78 2,86 2,95 3,05 3,16 3,27 3,39 3,51 3,64 3,78 3,93 4,08 36o 2,83 2,91 3,00 3,09 3,19 3,29 3,41 3,53 3,65 3,78 3,91 4,05 4,21 4,37 37o 3,13 3,23 3,33 3,43 3,54 3,65 3,78 3,91 4,04 4,18 4,33 4,49 4,65 38o 3,36 3,47 3,57 3,68 3,79 3,91 4,03 4,17 4,31 4,46 4,61 4,77 4,94 39o 3,59 3,70 3,81 3,93 4,05 4,17 4,30 4,44 4,58 4,74 4,90 5,06 5,23 40o 3,82 3,94 4,06 4,18 4,31 4,44 4,57 4,71 4,86 5,02 5,19 5,36 5,53 Skenbar alkoholhalt vid t °C 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 Temperatur (°C) 0o Addera 3,49 4,02 4,56 5,11 5,65 6,16 6,63 7,05 7,39 7,67 7,91 8,07 8,20 8,30 8,36 8,39 8,40 1o 3,40 3,87 4,36 4,86 5,35 5,82 6,26 6,64 6,96 7,23 7,45 7,62 7,75 7,85 7,91 7,95 7,96 2o 3,29 3,72 4,17 4,61 5,05 5,49 5,89 6,25 6,55 6,81 7,02 7,18 7,31 7,40 7,47 7,51 7,53 3o 3,16 3,55 3,95 4,36 4,77 5,17 5,53 5,85 6,14 6,39 6,59 6,74 6,86 6,97 7,03 7,07 7,09 4o 3,03 3,38 3,75 4,11 4,48 4,84 5,17 5,48 5,74 5,97 6,16 6,31 6,43 6,53 6,59 6,63 6,66 5o 2,89 3,21 3,54 3,86 4,20 4,52 4,83 5,11 5,35 5,56 5,74 5,89 6,00 6,10 6,16 6,20 6,23 6o 2,74 3,02 3,32 3,61 3,91 4,21 4,49 4,74 4,96 5,16 5,33 5,47 5,58 5,67 5,73 5,77 5,80 7o 2,58 2,83 3,10 3,36 3,63 3,90 4,15 4,38 4,58 4,77 4,92 5,05 5,15 5,24 5,30 5,34 5,37 8o 2,42 2,65 2,88 3,11 3,35 3,59 3,81 4,02 4,21 4,38 4,52 4,64 4,74 4,81 4,87 4,92 4,95 9o 2,24 2,44 2,65 2,86 3,07 3,28 3,48 3,67 3,84 3,99 4,12 4,23 4,32 4,39 4,45 4,50 4,53 10o 2,06 2,24 2,43 2,61 2,80 2,98 3,16 3,33 3,48 3,61 3,73 3,83 3,91 3,98 4,03 4,08 4,11 11o 1,88 2,03 2,20 2,36 2,52 2,68 2,83 2,98 3,12 3,24 3,34 3,43 3,50 3,57 3,62 3,66 3,69 12o 1,69 1,82 1,96 2,10 2,24 2,38 2,51 2,64 2,76 2,87 2,96 3,04 3,10 3,16 3,21 3,25 3,27 13o 1,49 1,61 1,73 1,84 1,96 2,08 2,20 2,31 2,41 2,50 2,58 2,65 2,71 2,76 2,80 2,83 2,85 14o 1,29 1,39 1,49 1,58 1,68 1,78 1,88 1,97 2,06 2,13 2,20 2,26 2,31 2,36 2,39 2,42 2,44 15o 1,09 1,16 1,24 1,32 1,40 1,48 1,56 1,64 1,71 1,77 1,83 1,88 1,92 1,96 1,98 2,01 2,03 16o 0,88 0,94 1,00 1,06 1,12 1,19 1,25 1,31 1,36 1,41 1,46 1,50 1,53 1,56 1,58 1,60 1,62 17o 0,67 0,71 0,75 0,80 0,84 0,89 0,94 0,98 1,02 1,05 1,09 1,12 1,14 1,17 1,18 1,20 1,21 18o 0,45 0,48 0,51 0,53 0,56 0,59 0,62 0,65 0,68 0,70 0,72 0,74 0,76 0,78 0,79 0,80 0,81 19o 0,23 0,24 0,25 0,27 0,28 0,30 0,31 0,33 0,34 0,35 0,36 0,37 0,38 0,39 0,40 0,40 0,41 Skenbar alkoholhalt vid t °C 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 Temperatur (°C) 21o Subtrahera 0,23 0,25 0,26 0,28 0,29 0,30 0,31 0,33 0,34 0,35 0,35 0,37 0,38 0,38 0,39 0,39 0,40 22o 0,47 0,49 0,52 0,55 0,57 0,60 0,62 0,65 0,67 0,70 0,72 0,74 0,75 0,76 0,78 0,79 0,80 23o 0,70 0,74 0,78 0,82 0,86 0,90 0,93 0,97 1,01 1,04 1,07 1,10 1,12 1,15 1,17 1,18 1,19 24o 0,94 0,99 1,04 1,10 1,15 1,20 1,25 1,29 1,34 1,39 1,43 1,46 1,50 1,53 1,55 1,57 1,59 25o 1,19 1,25 1,31 1,37 1,43 1,49 1,56 1,62 1,68 1,73 1,78 1,83 1,87 1,90 1,94 1,97 1,99 26o 1,43 1,50 1,57 1,65 1,73 1,80 1,87 1,94 2,01 2,07 2,13 2,19 2,24 2,28 2,32 2,35 2,38 27o 1,68 1,76 1,84 1,93 2,01 2,10 2,18 2,26 2,34 2,41 2,48 2,55 2,61 2,66 2,70 2,74 2,77 28o 1,93 2,02 2,11 2,21 2,31 2,40 2,49 2,58 2,67 2,76 2,83 2,90 2,98 3,03 3,08 3,13 3,17 29o 2,19 2,29 2,39 2,50 2,60 2,70 2,81 2,91 3,00 3,09 3,18 3,26 3,34 3,40 3,46 3,51 3,55 30o 2,45 2,56 2,67 2,78 2,90 3,01 3,12 3,23 3,34 3,44 3,53 3,62 3,70 3,77 3,84 3,90 3,95 31o 2,71 2,83 2,94 3,07 3,19 3,31 3,43 3,55 3,67 3,78 3,88 3,98 4,07 4,15 4,22 4,28 4,33 32o 2,97 3,09 3,22 3,36 3,49 3,62 3,74 3,87 4,00 4,11 4,22 4,33 4,43 4,51 4,59 4,66 4,72 33o 3,24 3,37 3,51 3,65 3,79 3,92 4,06 4,20 4,33 4,45 4,57 4,68 4,79 4,88 4,97 5,04 5,10 34o 3,51 3,65 3,79 3,94 4,09 4,23 4,37 4,52 4,66 4,79 4,91 5,03 5,15 5,25 5,34 5,42 5,49 35o 3,78 3,93 4,08 4,23 4,38 4,53 4,69 4,84 4,98 5,12 5,26 5,38 5,50 5,61 5,71 5,80 5,87 36o 4,05 4,21 4,37 4,52 4,68 4,84 5,00 5,16 5,31 5,46 5,60 5,73 5,86 5,97 6,08 6,17 6,25 37o 4,33 4,49 4,65 4,82 4,98 5,15 5,31 5,48 5,64 5,80 5,95 6,09 6,22 6,33 6,44 6,54 6,63 38o 4,61 4,77 4,94 5,12 5,29 5,46 5,63 5,80 5,97 6,13 6,29 6,43 6,57 6,69 6,81 6,92 7,01 39o 4,90 5,06 5,23 5,41 5,59 5,77 5,94 6,12 6,30 6,47 6,63 6,78 6,93 7,06 7,18 7,29 7,39 40o 5,19 5,36 5,53 5,71 5,90 6,08 6,26 6,44 6,62 6,80 6,97 7,13 7,28 7,41 7,54 7,66 7,76

TABELL 3 INTERNATIONELL ALKOHOLHALT VID 20 °C

Tabell över skenbar densitet hos etanol/vattenblandningar - Vanlig glasapparatur Densitet vid t °C, korrigerad för luftens upptryck to Alkoholhalt i % vol. 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 0 999,34 1,52 997,82 1,45 996,37 1,39 994,98 1,35 993,63 1,29 992,34 1,24 991,10 1,18 989,92 1,15 988,77 1,09 987,68 1,05 986,63 1,00 985,63 0,96 -0,09 -0,09 -0,09 -0,08 -0,08 -0,08 -0,07 -0,05 -0,05 -0,04 -0,03 -0,02 1 999,43 1,52 997,91 1,45 996,46 1,40 995,06 1,35 993,71 1,29 992,42 1,25 991,17 1,20 989,97 1,15 988,82 1,10 987,72 1,06 986,66 1,01 985,65 0,97 -0,06 -0,06 -0,06 -0,06 -0,06 -0,05 -0,05 -0,04 -0,03 -0,02 -0,02 -0,01 2 999,49 1,52 997,97 1,40 996,52 1,40 995,12 1,35 993,77 1,30 992,47 1,25 991,22 1,21 990,01 1,16 988,85 1,11 987,74 1,06 986,68 1,02 985,66 0,98 -0,05 -0,05 -0,04 -0,04 -0,04 -0,04 -0,03 -0,03 -0,03 -0,02 0,00 0,01 3 999,54 1,52 998,02 1,46 996,56 1,40 995,16 1,35 993,81 1,30 992,51 1,26 991,25 1,21 990,04 1,16 988,88 1,12 987,76 1,08 986,68 1,03 985,65 0,99 -0,03 -0,03 -0,03 -0,03 -0,02 -0,02 -0,02 -0,01 0,00 0,01 0,01 0,02 4 999,57 1,52 998,05 1,46 996,59 1,40 995,19 1,36 993,83 1,30 992,53 1,26 991,27 1,22 990,05 1,17 988,88 1,13 987,75 1,08 986,67 1,04 985,63 1,00 -0,02 -0,02 -0,02 -0,02 -0,02 -0,01 0,00 0,00 0,00 0,01 0,02 0,03 5 999,59 1,52 998,07 1,46 996,61 1,40 995,21 1,36 993,85 1,31 992,54 1,27 991,27 1,22 990,05 1,17 988,88 1,14 987,74 1,09 986,65 1,05 985,60 1,02 0,00 0,00 0,00 0,01 0,01 0,01 0,01 0,02 0,03 0,03 0,04 0,06 6 999,59 1,52 998,07 1,46 996,61 1,41 995,20 1,36 993,84 1,31 992,53 1,27 991,26 1,23 990,03 1,18 988,85 1,14 987,71 1,10 986,61 1,07 985,54 1,02 0,01 0,01 0,01 0,01 0,01 0,02 0,02 0,02 0,03 0,04 0,05 0,06 7 999,58 1,52 998,06 1,46 996,60 1,41 995,19 1,36 993,83 1,32 992,51 1,27 991,24 1,23 990,01 1,19 988,82 1,15 987,67 1,11 986,56 1,08 985,48 1,04 0,03 0,03 0,03 0,03 0,04 0,04 0,05 0,05 0,06 0,07 0,07 0,08 8 999,55 1,52 998,03 1,46 996,57 1,41 995,16 1,37 993,79 1,32 992,47 1,28 991,19 1,23 989,96 1,20 988,76 1,16 987,60 1,11 986,49 1,09 985,40 1,05 0,04 0,04 0,04 0,04 0,04 0,04 0,05 0,06 0,06 0,06 0,08 0,08 9 999,51 1,52 997,99 1,46 996,53 1,41 995,12 1,37 993,75 1,32 992,43 1,29 991,14 1,24 989,90 1,20 988,70 1,16 987,54 1,13 986,41 1,09 985,32 1,06 0,06 0,06 0,06 0,06 0,06 0,07 0,07 0,07 0,08 0,09 0,10 0,11 10 999,45 1,52 997,93 1,46 996,47 1,41 995,06 1,37 993,69 1,33 992,36 1,29 991,07 1,24 989,83 1,21 988,62 1,17 987,45 1,14 986,31 1,10 985,21 1,07 0,07 0,06 0,06 0,07 0,07 0,07 0,07 0,08 0,09 0,10 0,10 0,11 11 999,38 1,51 997,87 1,46 996,41 1,42 994,99 1,37 993,62 1,33 992,29 1,29 991,00 1,25 989,75 1,22 988,53 1,18 987,35 1,14 986,21 1,11 985,10 1,08 0,09 0,09 0,09 0,09 0,09 0,09 0,10 0,11 0,11 0,11 0,12 0,13 12 999,29 1,51 997,78 1,46 996,32 1,42 994,90 1,37 993,53 1,33 992,20 1,30 990,90 1,26 989,64 1,22 988,42 1,18 987,24 1,15 986,09 1,12 984,97 1,09 0,09 0,09 0,09 0,09 0,10 0,10 0,10 0,10 0,11 0,12 0,13 0,14 13 999,20 1,51 997,69 1,46 996,23 1,42 994,81 1,38 993,43 1,33 992,10 1,30 990,80 1,26 989,54 1,23 988,31 1,19 987,12 1,16 985,96 1,13 984,83 1,10 0,11 0,11 0,11 0,11 0,11 0,12 0,12 0,13 0,13 0,14 0,15 0,16 14 999,09 1,51 997,58 1,46 996,12 1,42 994,70 1,38 993,32 1,34 991,98 1,30 990,68 1,27 989,41 1,23 988,18 1,20 986,98 1,17 985,81 1,14 984,67 1,11 0,12 0,12 0,12 0,12 0,12 0,12 0,13 0,13 0,14 0,14 0,15 0,16 15 998,97 1,51 997,46 1,46 996,00 1,42 994,58 1,38 993,20 1,34 991,86 1,31 990,55 1,27 989,28 1,24 988,04 1,20 986,84 1,18 985,66 1,15 984,51 1,12 0,13 0,13 0,13 0,13 0,14 0,14 0,14 0,15 0,15 0,17 0,17 0,18 16 998,84 1,51 997,33 1,46 995,87 1,42 994,45 1,39 993,06 1,34 991,72 1,31 990,41 1,28 989,13 1,24 987,89 1,22 986,67 1,18 985,49 1,16 984,33 1,13 0,14 0,14 0,14 0,14 0,14 0,15 0,15 0,15 0,16 0,17 0,17 0,18 17 998,70 1,51 997,19 1,46 995,73 1,42 994,31 1,39 992,92 1,35 991,57 1,31 990,26 1,28 988,98 1,25 987,73 1,22 986,50 1,18 985,32 1,17 984,15 1,14 0,15 0,15 0,16 0,16 0,16 0,16 0,17 0,17 0,18 0,18 0,19 0,19 18 998,55 1,51 997,04 1,47 995,57 1,42 994,15 1,39 992,76 1,35 991,41 1,32 990,09 1,28 988,81 1,26 987,55 1,23 986,32 1,19 985,13 1,17 983,96 1,15 0,17 0,16 0,16 0,16 0,16 0,16 0,17 0,18 0,18 0,19 0,20 0,21 19 998,38 1,50 996,88 1,47 995,41 1,42 993,99 1,39 992,60 1,35 991,25 1,33 989,92 1,29 988,63 1,26 987,37 1,24 986,13 1,20 984,93 1,18 983,75 1,16 0,18 0,18 0,18 0,18 0,19 0,19 0,19 0,20 0,21 0,22 0,22 0,23 20 998,20 1,50 996,70 1,47 995,23 1,42 993,81 1,40 992,41 1,35 991,06 1,33 989,73 1,30 988,43 1,27 987,16 1,24 985,92 1,21 984,71 1,19 983,52 1,17 to Alkoholhalt i % vol. 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 20 998,20 1,50 996,70 1,47 995,23 1,42 993,81 1,40 992,41 1,35 991,06 1,33 989,73 1,30 988,43 1,27 987,16 1,24 985,92 1,21 984,71 1,19 983,52 1,17 0,19 0,19 0,19 0,19 0,19 0,20 0,20 0,21 0,21 0,22 0,23 0,23 21 998,01 1,50 996,51 1,47 995,04 1,42 993,62 1,40 992,22 1,36 990,86 1,33 989,53 1,31 988,22 1,27 986,95 1,25 985,70 1,22 984,48 1,19 983,29 1,17 0,20 0,20 0,19 0,20 0,20 0,20 0,21 0,21 0,22 0,22 0,23 0,24 22 987,81 1,50 996,31 1,46 994,85 1,43 993,42 1,40 992,02 1,36 990,66 1,34 989,32 1,31 988,01 1,28 986,73 1,25 985,48 1,23 984,25 1,20 983,05 1,18 0,21 0,21 0,21 0,21 0,21 0,22 0,22 0,22 0,23 0,24 0,24 0,25 23 997,60 1,50 996,10 1,46 994,64 1,43 993,21 1,40 991,81 1,37 990,44 1,34 989,10 1,31 987,79 1,29 986,50 1,26 985,24 1,23 984,01 1,21 982,80 1,19 0,21 0,21 0,22 0,22 0,22 0,22 0,23 0,23 0,23 0,24 0,25 0,26 24 997,39 1,50 995,89 1,47 994,42 1,43 992,99 1,40 991,59 1,37 990,22 1,35 988,87 1,31 987,56 1,29 986,27 1,27 985,00 1,24 983,76 1,22 982,54 1,20 0,23 0,23 0,23 0,23 0,24 0,24 0,24 0,25 0,25 0,25 0,26 0,27 25 997,16 1,50 995,66 1,47 994,19 1,43 992,76 1,41 991,35 1,37 989,98 1,35 988,63 1,32 987,31 1,29 986,02 1,27 984,75 1,25 983,50 1,23 982,27 1,21 0,23 0,23 0,23 0,24 0,24 0,24 0,24 0,25 0,26 0,27 0,27 0,28 26 996,93 1,50 995,43 1,47 993,96 1,44 992,52 1,41 991,11 1,37 989,74 1,35 988,39 1,33 987,06 1,30 985,76 1,28 984,48 1,25 983,23 1,24 981,99 1,22 0,25 0,25 0,25 0,25 0,25 0,26 0,26 0,26 0,27 0,28 0,29 0,29 27 996,68 1,50 995,18 1,47 993,71 1,44 992,27 1,41 990,86 1,38 989,48 1,35 988,13 1,33 986,80 1,31 985,49 1,29 984,20 1,26 982,94 1,24 981,70 1,23 0,25 0,25 0,26 0,26 0,26 0,26 0,27 0,28 0,28 0,28 0,29 0,30 28 996,43 1,50 994,93 1,48 993,45 1,44 992,01 1,41 990,60 1,38 989,22 1,36 987,86 1,34 986,52 1,31 985,21 1,29 983,92 1,27 982,65 1,25 981,40 1,23 0,26 0,27 0,27 0,27 0,27 0,28 0,28 0,28 0,29 0,29 0,30 0,31 29 996,17 1,51 994,66 1,48 993,18 1,44 991,74 1,41 990,33 1,39 988,94 1,36 987,58 1,34 986,24 1,32 984,92 1,29 983,63 1,28 982,35 1,26 981,09 1,24 0,27 0,27 0,27 0,28 0,28 0,28 0,28 0,29 0,29 0,30 0,31 0,32 30 995,90 1,51 994,39 1,48 992,91 1,45 991,46 1,41 990,05 1,39 988,66 1,37 987,29 1,34 985,95 1,32 984,63 1,30 983,33 1,29 982,04 1,27 980,77 1,25 0,29 0,29 0,29 0,29 0,30 0,30 0,30 0,31 0,31 0,32 0,32 0,32 31 995,61 1,51 994,10 1,48 992,62 1,45 991,17 1,42 989,75 1,39 988,36 1,37 986,99 1,35 985,64 1,33 984,31 1,30 983,01 1,29 981,72 1,27 980,45 1,26 0,29 0,29 0,29 0,29 0,30 0,31 0,31 0,31 0,31 0,32 0,33 0,34 32 995,32 1,51 993,81 1,48 992,33 1,45 990,88 1,42 989,45 1,40 988,05 1,37 986,68 1,35 985,33 1,33 984,00 1,31 982,69 1,30 981,39 1,28 980,11 1,26 0,30 0,31 0,31 0,31 0,31 0,31 0,31 0,32 0,33 0,33 0,34 0,34 33 995,02 1,52 993,50 1,48 992,02 1,45 990,57 1,43 989,14 1,40 987,74 1,37 986,37 1,36 985,01 1,34 983,67 1,31 982,36 1,31 981,05 1,28 979,77 1,27 0,30 0,31 0,31 0,31 0,31 0,32 0,33 0,33 0,33 0,34 0,34 0,35 34 994,72 1,53 993,19 1,48 991,71 1,45 990,26 1,43 988,83 1,41 987,42 1,38 986,04 1,36 984,68 1,34 983,34 1,32 982,02 1,31 980,71 1,29 979,42 1,28 0,32 0,32 0,32 0,33 0,33 0,33 0,33 0,33 0,33 0,34 0,34 0,35 35 994,40 1,53 992,87 1,48 991,39 1,46 989,93 1,43 988,50 1,41 987,09 1,38 985,71 1,36 984,35 1,34 983,01 1,33 981,68 1,31 980,37 1,30 979,07 1,29 0,32 0,32 0,33 0,33 0,33 0,33 0,34 0,34 0,35 0,35 0,36 0,37 36 994,08 1,53 992,55 1,49 991,06 1,46 989,60 1,43 988,17 1,41 986,76 1,39 985,37 1,36 984,01 1,35 982,66 1,33 981,33 1,32 980,01 1,31 978,70 1,29 0,33 0,34 0,34 0,34 0,35 0,35 0,35 0,35 0,36 0,36 0,36 0,37 37 993,75 1,54 992,21 1,49 990,72 1,46 989,26 1,44 987,82 1,41 986,41 1,39 985,02 1,37 983,65 1,35 982,30 1,33 980,97 1,32 979,65 1,32 978,33 1,30 0,34 0,34 0,35 0,36 0,36 0,36 0,36 0,36 0,37 0,38 0,38 0,38 38 993,41 1,54 991,87 1,50 990,37 1,47 988,90 1,44 987,46 1,41 986,05 1,39 984,66 1,37 983,29 1,36 981,93 1,34 980,59 1,32 979,27 1,32 977,95 1,31 0,35 0,35 0,36 0,36 0,36 0,37 0,37 0,37 0,37 0,38 0,38 0,39 39 993,06 1,54 991,52 1,51 990,01 1,47 988,54 1,44 987,10 1,41 985,68 1,39 984,29 1,37 982,92 1,36 981,56 1,34 980,22 1,33 978,89 1,33 977,56 1,31 0,35 0,36 0,36 0,37 0,38 0,38 0,38 0,38 0,38 0,39 0,39 0,39 40 992,71 1,55 991,16 1,51 989,65 1,48 988,17 1,45 986,72 1,42 985,30 1,39 983,91 1,37 982,54 1,36 981,18 1,35 979,83 1,33 978,50 1,33 977,17 1,32 to Alkoholhalt i % vol. 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 0 986,63 1,00 985,63 0,96 984,67 0,92 983,75 0,87 982,88 0,84 982,04 0,81 981,23 0,77 980,46 0,75 979,71 0,73 978,98 0,72 978,26 0,70 977,56 0,70 -0,03 -0,02 -0,01 0,00 0,02 0,04 0,05 0,07 0,09 0,11 0,13 0,15 1 986,66 1,01 985,65 0,97 984,68 0,93 983,75 0,89 982,86 0,86 982,00 0,82 981,18 0,79 980,39 0,77 979,62 0,75 978,87 0,74 978,13 0,72 977,41 0,72 -0,02 -0,01 0,00 0,01 0,03 0,04 0,06 0,08 0,10 0,12 0,14 0,17 2 986,68 1,02 985,66 0,98 984,68 0,94 983,74 0,91 982,83 0,87 981,96 0,84 981,12 0,81 980,31 0,79 979,52 0,77 978,75 0,76 977,99 0,75 977,24 0,74 0,00 0,01 0,02 0,04 0,05 0,06 0,08 0,10 0,12 0,14 0,16 0,18 3 986,68 1,03 985,65 0,99 984,66 0,96 983,70 0,92 982,78 0,88 981,90 0,86 981,04 0,83 980,21 0,81 979,40 0,79 978,61 0,78 977,83 0,77 977,06 0,76 0,01 0,02 0,03 0,04 0,05 0,07 0,08 0,10 0,12 0,14 0,16 0,18 4 986,67 1,04 985,63 1,00 984,63 0,97 983,66 0,93 982,73 0,90 981,83 0,87 980,96 0,85 980,11 0,83 979,28 0,81 978,47 0,80 977,67 0,79 976,88 0,79 0,02 0,03 0,05 0,06 0,08 0,09 0,11 0,13 0,14 0,16 0,18 0,20 5 986,65 1,05 985,60 1,02 984,58 0,98 983,60 0,95 982,65 0,91 981,74 0,89 980,85 0,87 979,98 0,84 979,14 0,83 978,31 0,82 977,49 0,81 976,68 0,81 0,04 0,06 0,06 0,07 0,08 0,10 0,11 0,13 0,15 0,17 0,19 0,21 6 986,61 1,07 985,54 1,02 984,52 0,99 983,53 0,96 982,57 0,93 981,64 0,90 980,74 0,89 979,85 0,86 978,99 0,85 978,14 0,84 977,30 0,83 976,47 0,83 0,05 0,06 0,08 0,09 0,10 0,12 0,14 0,15 0,17 0,19 0,20 0,22 7 986,56 1,08 985,48 1,04 984,44 1,00 983,44 0,97 982,47 0,95 981,52 0,92 980,60 0,90 979,70 0,88 978,82 0,87 977,95 0,85 977,10 0,85 976,25 0,85 0,07 0,08 0,09 0,10 0,11 0,12 0,14 0,16 0,18 0,19 0,21 0,23 8 986,49 1,09 985,40 1,05 984,35 1,01 983,34 0,98 982,36 0,96 981,40 0,94 980,46 0,92 979,54 0,90 978,64 0,88 977,76 0,87 976,89 0,87 976,02 0,87 0,08 0,08 0,09 0,11 0,13 0,14 0,15 0,16 0,18 0,20 0,22 0,24 9 986,41 1,09 985,32 1,06 984,26 1,03 983,23 1,00 982,23 0,97 981,26 0,95 980,31 0,93 979,38 0,92 978,48 0,90 977,56 0,89 976,67 0,89 975,78 0,89 0,10 0,11 0,12 0,13 0,14 0,16 0,17 0,18 0,19 0,21 0,23 0,25 10 986,31 1,10 985,21 1,07 984,14 1,04 983,10 1,01 982,09 0,99 981,10 0,96 980,14 0,94 979,20 0,93 978,27 0,92 977,35 0,91 976,44 0,91 975,53 0,91 0,10 0,11 0,12 0,13 0,15 0,16 0,17 0,19 0,21 0,23 0,25 0,27 11 986,21 1,11 985,10 1,08 984,02 1,05 982,97 1,03 981,94 1,00 980,94 0,97 979,97 0,96 979,01 0,95 978,06 0,94 977,12 0,93 976,19 0,93 975,26 0,92 0,12 0,13 0,14 0,15 0,16 0,17 0,19 0,21 0,22 0,24 0,26 0,27 12 986,09 1,12 984,97 1,09 983,88 1,06 982,82 1,04 981,78 1,01 980,77 0,99 979,78 0,98 978,80 0,96 977,84 0,96 976,88 0,95 975,93 0,94 974,99 0,94 0,13 0,14 0,15 0,16 0,17 0,19 0,20 0,21 0,23 0,24 0,26 0,28 13 985,96 1,13 984,83 1,10 983,73 1,07 982,66 1,05 981,61 1,03 980,58 1,00 979,58 0,99 978,59 0,98 977,61 0,97 976,64 0,97 975,67 0,96 974,71 0,96 0,15 0,16 0,17 0,18 0,19 0,20 0,22 0,23 0,24 0,26 0,27 0,29 14 985,81 1,14 984,67 1,11 983,56 1,08 982,48 1,06 981,42 1,04 980,38 1,02 979,36 1,00 978,36 0,99 977,37 0,99 976,38 0,98 975,40 0,98 974,42 0,98 0,15 0,16 0,17 0,18 0,19 0,20 0,22 0,24 0,26 0,27 0,28 0,30 15 985,66 1,15 984,51 1,12 983,39 1,09 982,30 1,07 981,23 1,05 980,18 1,04 979,14 1,02 978,12 1,01 977,11 1,00 976,11 0,99 975,12 1,00 974,12 1,00 0,17 0,18 0,19 0,20 0,21 0,22 0,23 0,25 0,26 0,28 0,30 0,31 16 985,49 1,16 984,33 1,13 983,20 1,10 982,10 1,08 981,02 1,06 979,96 1,05 978,91 1,04 977,87 1,02 976,85 1,02 975,83 1,01 974,82 1,01 973,81 1,02 0,17 0,18 0,19 0,20 0,21 0,23 0,24 0,25 0,27 0,29 0,30 0,31 17 985,32 1,17 984,15 1,14 983,01 1,11 981,90 1,09 980,81 1,08 979,73 1,06 978,67 1,05 977,62 1,04 976,58 1,04 975,54 1,02 974,52 1,02 973,50 1,04 0,19 0,19 0,20 0,22 0,24 0,25 0,26 0,27 0,28 0,29 0,31 0,33 18 985,13 1,17 983,96 1,15 982,81 1,13 981,68 1,11 980,57 1,09 979,48 1,07 978,41 1,06 977,35 1,05 976,30 1,05 975,25 1,04 974,21 1,04 973,17 1,05 0,20 0,21 0,22 0,23 0,24 0,25 0,26 0,27 0,29 0,30 0,32 0,34 19 984,93 1,18 983,75 1,16 982,59 1,14 981,45 1,12 980,33 1,10 979,23 1,08 978,15 1,07 977,08 1,07 976,01 1,06 974,94 1,05 973,89 1,06 972,83 1,06 0,22 0,23 0,24 0,24 0,25 0,26 0,28 0,29 0,30 0,31 0,33 0,35 20 984,71 1,19 983,52 1,17 982,35 1,14 981,21 1,13 980,08 1,11 978,97 1,10 977,87 1,08 976,79 1,08 975,71 1,08 974,63 1,07 973,56 1,08 972,48 1,08 to Alkoholhalt i % vol. 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 20o 984,71 1,19 983,52 1,17 982,35 1,14 981,21 1,13 980,08 1,11 978,97 1,10 977,87 1,08 976,79 1,08 975,71 1,08 974,63 1,07 973,56 1,08 972,48 1,08 0,23 0,23 0,23 0,25 0,26 0,28 0,29 0,31 0,32 0,33 0,35 0,36 21o 984,48 1,19 983,29 1,17 982,12 1,16 980,96 1,14 979,82 1,13 978,69 1,11 977,58 1,10 976,48 1,09 975,39 1,09 974,30 1,09 973,21 1,09 972,12 1,09 0,23 0,24 0,25 0,26 0,27 0,28 0,29 0,31 0,32 0,33 0,35 0,36 22 984,25 1,20 983,05 1,18 981,97 1,17 980,70 1,15 979,55 1,14 978,41 1,12 977,29 1,12 976,17 1,10 975,07 1,10 973,97 1,10 972,86 1,10 971,76 1,11 0,24 0,25 0,26 0,27 0,28 0,29 0,30 0,31 0,33 0,34 0,35 0,37 23 984,01 1,21 982,80 1,19 981,61 1,18 980,43 1,16 979,27 1,15 978,12 1,13 976,99 1,13 975,86 1,12 974,74 1,11 973,63 1,12 972,51 1,12 971,39 1,13 0,25 0,26 0,27 0,28 0,29 0,30 0,31 0,32 0,33 0,35 0,36 0,38 24 983,76 1,22 982,54 1,20 981,34 1,19 980,15 1,17 978,98 1,16 977,82 1,14 976,68 1,14 975,54 1,13 974,41 1,13 973,28 1,13 972,15 1,14 971,01 1,14 0,26 0,27 0,28 0,29 0,30 0,31 0,32 0,33 0,35 0,36 0,38 0,39 25 983,50 1,23 982,27 1,21 981,06 1,20 979,86 1,18 978,68 1,17 977,51 1,16 976,36 1,15 975,21 1,15 974,06 1,14 972,92 1,15 971,77 1,15 970,62 1,15 0,27 0,28 0,29 0,29 0,30 0,31 0,33 0,34 0,35 0,37 0,38 0,39 26 983,23 1,24 981,99 1,22 980,77 1,20 979,57 1,19 978,38 1,18 977,20 1,17 976,03 1,16 974,87 1,16 973,71 1,16 972,55 1,16 971,39 1,16 970,23 1,17 0,29 0,29 0,30 0,31 0,32 0,33 0,34 0,36 0,37 0,38 0,39 0,41 27 982,94 1,24 981,70 1,23 980,47 1,21 979,26 1,20 978,06 1,19 976,87 1,18 975,69 1,18 974,51 1,17 973,34 1,17 972,17 1,17 921,00 1,18 969,82 1,18 0,29 0,30 0,30 0,31 0,32 0,33 0,35 0,36 0,38 0,39 0,40 0,41 28 982,65 1,25 981,40 1,23 980,17 1,22 978,95 1,21 977,74 1,20 976,54 1,20 975,34 1,19 974,15 1,19 972,96 1,18 971,78 1,18 970,60 1,19 969,41 1,20 0,30 0,31 0,32 0,33 0,34 0,35 0,36 0,37 0,38 0,39 0,40 0,42 29 982,35 1,26 981,09 1,24 979,85 1,23 978,62 1,22 977,40 1,21 976,19 1,21 974,98 1,20 973,78 1,20 972,58 1,19 971,39 1,19 970,20 1,21 968,99 1,21 0,31 0,32 0,33 0,34 0,35 0,36 0,37 0,38 0,38 0,40 0,42 0,43 30 982,04 1,27 980,77 1,25 979,52 1,24 978,28 1,23 977,05 1,22 975,83 1,21 974,62 1,21 973,41 1,21 972,20 1,21 970,99 1,21 969,78 1,22 968,56 1,23 0,32 0,32 0,33 0,34 0,35 0,36 0,37 0,38 0,39 0,40 0,42 0,43 31 981,72 1,27 980,45 1,26 979,19 1,25 977,94 1,24 976,70 1,23 975,47 1,22 974,25 1,22 973,03 1,22 971,81 1,22 970,59 1,23 969,36 1,23 968,13 1,24 0,33 0,34 0,34 0,35 0,36 0,37 0,38 0,39 0,40 0,42 0,43 0,45 32 981,39 1,28 980,11 1,26 978,85 1,26 977,59 1,25 976,34 1,24 975,10 1,23 973,87 1,23 972,64 1,23 971,41 1,24 970,17 1,24 968,93 1,25 967,68 1,26 0,34 0,34 0,35 0,35 0,36 0,37 0,39 0,40 0,41 0,42 0,43 0,45 33 981,05 1,28 979,77 1,27 978,50 1,26 977,24 1,26 975,78 1,25 974,73 1,25 973,48 1,24 972,24 1,24 971,00 1,25 969,75 1,25 968,50 1,27 967,23 1,27 0,34 0,35 0,36 0,37 0,38 0,39 0,40 0,41 0,42 0,43 0,45 0,45 34 980,71 1,29 979,42 1,28 978,14 1,27 976,87 1,27 975,60 1,26 974,34 1,26 973,08 1,25 971,83 1,25 970,58 1,26 969,32 1,27 968,05 1,27 966,78 1,29 0,34 0,35 0,36 0,37 0,38 0,39 0,40 0,41 0,43 0,44 0,45 0,47 35 980,37 1,30 979,07 1,29 977,78 1,28 976,50 1,28 975,22 1,27 973,95 1,27 972,68 1,26 971,42 1,27 970,15 1,27 968,88 1,28 967,60 1,29 966,31 1,30 0,36 0,37 0,37 0,38 0,38 0,39 0,40 0,42 0,43 0,44 0,45 0,47 36 980,01 1,31 978,70 1,29 977,41 1,29 976,12 1,28 974,84 1,28 973,56 1,28 972,28 1,28 971,00 1,28 969,72 1,28 968,44 1,29 967,15 1,31 965,84 1,31 0,36 0,37 0,38 0,39 0,40 0,41 0,42 0,43 0,44 0,45 0,46 0,47 37 979,65 1,32 978,33 1,30 977,03 1,30 975,73 1,29 974,44 1,29 973,15 1,29 971,86 1,29 970,57 1,29 969,28 1,29 967,99 1,30 966,69 1,32 965,37 1,32 0,38 0,38 0,39 0,39 0,40 0,41 0,42 0,43 0,44 0,46 0,47 0,48 38 979,27 1,32 977,95 1,31 976,64 1,30 975,34 1,30 974,04 1,30 972,74 1,30 971,44 1,30 970,14 1,30 968,84 1,31 967,53 1,31 966,22 1,33 964,89 1,34 0,38 0,39 0,39 0,40 0,41 0,42 0,43 0,44 0,45 0,46 0,48 0,49 39 978,89 1,33 977,56 1,31 976,25 1,31 974,94 1,31 973,63 1,31 972,32 1,31 971,01 1,31 969,70 1,31 968,39 1,32 967,07 1,33 965,74 1,34 964,40 1,36 0,39 0,39 0,40 0,41 0,42 0,42 0,43 0,45 0,47 0,48 0,49 0,50 40 978,50 1,33 977,17 1,32 975,85 1,32 974,53 1,32 973,21 1,31 971,90 1,32 970,58 1,33 969,25 1,33 967,92 1,33 966,59 1,34 965,25 1,35 963,90 1,37 to Alkoholhalt i % vol. 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 0 978,26 0,70 977,56 0,70 976,86 0,69 976,17 0,70 975,47 0,72 974,75 0,72 974,03 0,74 973,29 0,77 972,52 0,80 971,72 0,83 970,89 0,87 970,02 0,90 0,13 0,15 0,17 0,20 0,22 0,24 0,27 0,30 0,32 0,35 0,37 0,39 1 978,13 0,72 977,41 0,72 976,69 0,72 975,97 0,72 975,25 0,74 974,51 0,75 973,76 0,77 972,99 0,79 972,20 0,83 971,37 0,85 970,52 0,89 969,63 0,93 0,14 0,17 0,19 0,21 0,24 0,26 0,29 0,31 0,34 0,36 0,38 0,41 2 977,99 0,75 977,24 0,74 976,50 0,74 975,76 0,75 975,01 0,76 974,25 0,78 973,47 0,79 972,68 0,82 971,86 0,85 971,01 0,87 970,14 0,92 960,22 0,96 0,16 0,18 0,20 0,23 0,25 0,27 0,29 0,32 0,34 0,36 0,38 0,40 3 977,83 0,77 977,06 0,76 976,30 0,77 975,53 0,77 974,76 0,78 973,98 0,80 973,18 0,82 972,36 0,84 971,52 0,87 970,65 0,89 969,76 0,94 968,82 0,98 0,16 0,18 0,21 0,23 0,25 0,28 0,30 0,32 0,34 0,36 0,39 0,42 4 977,67 0,79 976,88 0,79 976,09 0,79 975,30 0,79 974,51 0,81 973,70 0,82 972,88 0,84 972,04 0,86 971,18 0,89 970,29 0,92 969,37 0,96 968,40 1,00 0,18 0,20 0,22 0,24 0,26 0,28 0,30 0,33 0,35 0,38 0,40 0,41 5 977,49 0,81 976,68 0,81 975,87 0,81 975,06 0,81 974,25 0,83 973,42 0,84 972,58 0,86 971,71 0,88 970,83 0,92 969,91 0,94 968,97 0,98 967,99 1,02 0,19 0,21 0,23 0,25 0,27 0,30 0,33 0,34 0,37 0,39 0,41 0,43 6 977,30 0,83 976,47 0,83 975,64 0,83 974,81 0,84 973,97 0,85 973,12 0,87 972,25 0,88 971,37 0,91 970,46 0,94 969,52 0,96 968,56 1,00 967,56 1,04 0,20 0,22 0,24 0,26 0,28 0,30 0,32 0,35 0,37 0,39 0,41 0,43 7 976,10 0,85 976,25 0,85 975,40 0,85 974,55 0,86 973,69 0,87 972,82 0,89 971,93 0,91 971,02 0,93 970,09 0,96 969,13 0,98 968,15 1,02 967,13 1,06 0,21 0,23 0,25 0,27 0,29 0,31 0,33 0,35 0,37 0,39 0,42 0,44 8 976,89 0,87 976,02 0,87 975,15 0,87 974,28 0,88 973,40 0,89 972,51 0,91 971,60 0,93 970,67 0,95 969,72 0,98 968,74 1,01 967,73 1,04 966,69 1,08 0,22 0,24 0,26 0,28 0,30 0,32 0,34 0,36 0,39 0,41 0,43 0,45 9 976,67 0,89 975,78 0,89 974,89 0,89 974,00 0,90 973,10 0,91 972,19 0,93 971,26 0,95 970,31 0,98 969,33 1,00 968,33 1,03 967,30 1,06 966,24 1,09 0,23 0,25 0,27 0,29 0,31 0,33 0,35 0,37 0,39 0,41 0,43 0,45 10 976,44 0,91 975,53 0,91 974,62 0,91 973,71 0,92 972,79 0,93 971,86 0,95 970,91 0,97 969,94 1,00 968,94 1,02 967,92 1,05 966,87 1,08 965,79 1,11 0,25 0,27 0,28 0,30 0,32 0,34 0,36 0,38 0,40 0,42 0,44 0,45 11 976,11 0,93 975,26 0,92 974,34 0,93 973,41 0,94 972,47 0,95 971,52 0,97 970,55 0,99 969,56 1,02 968,54 1,04 967,50 1,07 966,43 1,09 965,34 1,13 0,26 0,27 0,29 0,31 0,33 0,35 0,37 0,39 0,40 0,42 0,44 0,46 12 975,93 0,94 974,99 0,94 974,05 0,95 973,10 0,96 972,14 0,97 971,17 0,99 970,18 1,01 969,17 1,03 968,14 1,06 967,08 1,09 965,99 1,11 964,88 1,15 0,26 0,28 0,30 0,32 0,34 0,36 0,38 0,39 0,41 0,43 0,45 0,47 13 975,67 0,96 974,71 0,96 973,75 0,97 972,78 0,98 971,80 0,99 970,81 1,01 969,80 1,02 968,78 1,05 967,73 1,08 966,65 1,11 965,54 1,13 964,41 1,17 0,27 0,29 0,31 0,33 0,35 0,37 0,38 0,40 0,42 0,44 0,45 0,47 14 975,40 0,98 974,42 0,98 973,44 0,99 972,45 1,00 971,45 1,01 970,44 1,02 969,42 1,04 968,38 1,07 967,31 1,10 966,21 1,12 965,09 1,15 963,94 1,19 0,28 0,30 0,32 0,33 0,35 0,37 0,39 0,41 0,43 0,45 0,47 0,49 15 975,12 1,00 974,12 1,00 973,12 1,00 972,12 1,02 971,10 1,03 970,07 1,04 969,03 1,06 967,97 1,09 966,88 1,12 965,76 1,14 964,62 1,17 963,45 1,20 0,30 0,31 0,33 0,35 0,36 0,38 0,40 0,42 0,44 0,45 0,47 0,49 16 974,82 1,01 973,81 1,02 972,79 1,02 971,77 1,03 970,74 1,05 969,69 1,06 968,63 1,08 967,55 1,11 966,44 1,13 965,31 1,16 964,15 1,19 962,96 1,22 0,30 0,31 0,33 0,35 0,37 0,38 0,40 0,42 0,43 0,45 0,47 0,49 17 974,52 1,02 973,50 1,04 972,46 1,04 971,42 1,05 970,37 1,06 969,31 1,08 968,23 1,10 967,13 1,12 966,01 1,15 964,86 1,18 963,68 1,21 962,47 1,24 0,31 0,33 0,34 0,36 0,38 0,40 0,42 0,43 0,45 0,47 0,48 0,50 18 974,21 1,04 973,17 1,05 972,12 1,06 971,06 1,07 969,99 1,08 968,91 1,10 967,81 1,11 966,70 1,14 965,56 1,17 964,39 1,19 963,20 1,23 961,97 1,26 0,32 0,34 0,35 0,36 0,38 0,40 0,42 0,44 0,46 0,47 0,49 0,50 19 973,89 1,06 972,83 1,06 971,77 1,07 970,70 1,09 969,61 1,10 968,51 1,11 967,39 1,13 966,26 1,16 965,10 1,18 963,92 1,21 962,71 1,24 961,47 1,28 0,33 0,35 0,37 0,39 0,40 0,41 0,42 0,45 0,46 0,48 0,50 0,52 20 973,56 1,08 972,48 1,08 971,40 1,09 970,31 1,10 969,21 1,11 968,10 1,13 966,97 1,14 965,81 1,17 964,64 1,20 963,44 1,23 962,21 1,26 960,95 1,29 to Alkoholhalt i % vol. 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 20o 973,56 1,08 972,48 1,08 971,40 1,09 970,31 1,10 969,21 1,11 968,10 1,13 966,97 1,16 965,81 1,17 964,64 1,20 963,44 1,23 962,21 1,26 960,95 1,29 0,35 0,36 0,37 0,39 0,40 0,42 0,44 0,45 0,47 0,49 0,50 0,52 21o 973,21 1,09 972,12 1,09 971,03 1,11 969,92 1,11 968,81 1,13 967,68 1,15 966,53 1,17 965,36 1,19 964,17 1,22 962,95 1,24 961,71 1,28 960,43 1,31 0,35 0,36 0,38 0,39 0,41 0,43 0,44 0,46 0,48 0,49 0,51 0,52 22 972,86 1,10 971,76 1,11 970,65 1,12 969,53 1,13 968,40 1,15 967,25 1,16 966,09 1,19 964,90 1,21 963,69 1,23 962,46 1,26 961,20 1,29 959,91 1,32 0,35 0,37 0,39 0,40 0,42 0,43 0,45 0,46 0,48 0,50 0,52 0,53 23 972,51 1,12 971,39 1,13 970,26 1,13 969,13 1,15 967,98 1,16 966,82 1,18 965,64 1,20 964,44 1,23 963,21 1,25 961,96 1,28 960,68 1,30 959,38 1,33 0,36 0,38 0,39 0,41 0,42 0,44 0,46 0,48 0,49 0,51 0,53 0,54 24 972,15 1,14 971,01 1,14 969,87 1,15 968,72 1,16 967,56 1,18 966,38 1,20 965,18 1,22 963,96 1,24 962,72 1,27 961,45 1,29 960,16 1,32 958,84 1,34 0,38 0,39 0,40 0,42 0,44 0,45 0,46 0,48 0,50 0,51 0,53 0,54 25 971,77 1,15 970,62 1,15 969,47 1,17 968,30 1,18 967,12 1,19 965,93 1,21 964,72 1,24 963,48 1,26 962,22 1,28 960,94 1,31 959,63 1,33 958,30 1,36 0,38 0,39 0,41 0,42 0,44 0,46 0,48 0,49 0,50 0,52 0,53 0,55 26 971,39 1,16 970,23 1,17 969,06 1,18 967,88 1,20 966,68 1,21 965,47 1,23 964,24 1,25 962,99 1,27 961,72 1,30 960,42 1,32 959,10 1,35 957,75 1,38 0,39 0,41 0,42 0,44 0,45 0,46 0,48 0,50 0,51 0,52 0,53 0,55 27 971,00 1,18 969,82 1,18 968,64 1,20 967,44 1,21 966,23 1,22 965,01 1,25 963,76 1,27 962,49 1,28 961,21 1,31 959,90 1,33 958,57 1,37 957,20 1,40 0,40 0,41 0,43 0,44 0,46 0,48 0,49 0,50 0,52 0,53 0,55 0,56 28 970,60 1,19 969,41 1,20 968,21 1,21 967,00 1,23 965,77 1,24 964,53 1,26 963,27 1,28 961,99 1,30 960,69 1,32 959,37 1,35 958,02 1,38 956,64 1,41 0,40 0,42 0,43 0,45 0,46 0,48 0,49 0,50 0,52 0,54 0,55 0,56 29 970,20 1,21 968,99 1,21 967,78 1,23 966,55 1,24 965,31 1,26 964,05 1,27 962,78 1,29 961,49 1,32 960,17 1,34 958,83 1,36 957,47 1,39 956,08 1,43 0,42 0,43 0,45 0,46 0,47 0,48 0,50 0,52 0,53 0,54 0,56 0,58 30 969,78 1,22 968,56 1,23 967,33 1,24 966,09 1,25 964,84 1,27 963,57 1,29 962,28 1,31 960,97 1,33 959,64 1,35 958,29 1,38 956,91 1,41 955,50 1,44 0,42 0,43 0,44 0,45 0,47 0,49 0,51 0,52 0,53 0,55 0,56 0,58 31 969,36 1,23 968,13 1,24 966,89 1,25 965,64 1,27 964,37 1,29 963,08 1,31 961,77 1,32 960,45 1,34 959,11 1,37 957,74 1,39 956,35 1,43 954,92 1,45 0,43 0,45 0,46 0,48 0,49 0,50 0,51 0,52 0,54 0,56 0,57 0,58 32 968,93 1,25 967,68 1,25 966,43 1,27 965,16 1,28 963,88 1,30 962,58 1,32 961,26 1,33 959,93 1,36 958,57 1,39 957,18 1,40 955,78 1,44 954,34 1,47 0,43 0,45 0,47 0,48 0,50 0,51 0,52 0,54 0,55 0,56 0,58 0,59 33 968,50 1,27 967,23 1,27 965,96 1,28 964,68 1,30 963,38 1,31 962,07 1,33 960,74 1,35 959,39 1,37 958,02 1,40 956,62 1,42 955,20 1,45 953,75 1,48 0,45 0,45 0,47 0,49 0,50 0,51 0,52 0,54 0,55 0,56 0,58 0,60 34 968,05 1,27 966,78 1,29 965,49 1,30 964,19 1,31 962,88 1,32 961,56 1,34 960,22 1,37 958,85 1,38 957,47 1,41 956,06 1,44 954,62 1,47 953,15 1,49 0,45 0,47 0,48 0,49 0,50 0,52 0,54 0,55 0,57 0,58 0,59 0,60 35 967,60 1,29 996,31 1,30 965,01 1,31 963,70 1,32 962,38 1,34 961,04 1,36 959,68 1,38 958,30 1,40 956,90 1,42 955,48 1,45 954,03 1,48 952,55 1,50 0,45 0,47 0,48 0,49 0,51 0,53 0,54 0,55 0,57 0,59 0,60 0,61 36 967,15 1,31 965,84 1,31 964,53 1,32 963,21 1,34 961,87 1,36 960,51 1,37 959,14 1,39 957,75 1,42 956,33 1,44 954,89 1,46 953,43 1,49 951,94 1,51 0,46 0,47 0,48 0,50 0,52 0,53 0,55 0,56 0,57 0,58 0,60 0,61 37 966,69 1,32 965,37 1,32 964,05 1,34 962,71 1,36 961,35 1,37 959,98 1,39 958,59 1,40 957,19 1,43 955,76 1,45 954,31 1,48 952,83 1,50 951,33 1,52 0,47 0,48 0,50 0,51 0,52 0,54 0,55 0,57 0,58 0,59 0,60 0,61 38 966,22 1,33 964,89 1,34 963,55 1,35 962,20 1,37 960,83 1,39 959,44 1,40 958,04 1,42 956,62 1,44 955,18 1,46 953,72 1,49 952,23 1,51 950,72 1,54 0,48 0,49 0,51 0,52 0,53 0,54 0,56 0,57 0,58 0,60 0,61 0,62 39 965,74 1,34 964,40 1,36 963,04 1,36 961,68 1,38 960,30 1,40 958,90 1,42 957,48 1,43 956,05 1,45 954,60 1,48 953,12 1,50 951,62 1,52 950,10 1,55 0,49 0,50 0,51 0,53 0,54 0,55 0,56 0,58 0,60 0,61 0,62 0,64 40 965,25 1,35 963,90 1,37 962,53 1,38 961,15 1,39 959,76 1,41 958,35 1,43 956,92 1,45 955,47 1,47 954,00 1,49 952,51 1,51 951,00 1,54 949,49 1,56

TABELL 4 Tabellen återger brytningsindex för rena blandningar av etanol/vatten och destillat vid 20 °C och motsvarande alkoholhalt i % vol. vid 20 °C.

4. TOTALT TORREXTRAKT Totala mängden torrsubstans

1. DEFINITION

Det totala torrextraktet är mängden av alla ämnen som inte förflyktigas under givna fysikaliska betingelser. De fysikaliska betingelserna skall vara sådana att det ämne som utgör torrsubstansen förändras så lite som möjligt under undersökningen.

Det sockerfria extraktet är skillnaden mellan det totala torrextraktet och den totala mängden av socker.

Det reducerade extraktet är skillnaden mellan det totala torrextraktet och den totala mängden av socker som överskrider 1 g/l, den totala mängden kaliumsulfat som överskrider 1 g/l samt eventuellt förekommande mannitol och andra kemiska ämnen som kan ha tillsatts vinet.

Restextraktet är det sockerfria extraktet minus icke-flyktiga syror, uttryckta som vinsyra.

Extraktet uttrycks i gram per liter och skall bestämmas med en noggrannhet av 0,5 g.

2. PRINCIP FÖR METODEN

Enda metod: bestämning med densimeter.

Det totala torrextraktet beräknas indirekt utifrån mustens specifika vikt och, för vin, utifrån det alkoholfria vinets specifika vikt.

Torrextraktet uttrycks som den mängd sackaros, som när den löses i vatten och späds till en volym på en liter, ger en lösning med samma specifika vikt som musten eller det alkoholfria vinet. Denna mängd anges i tabell 1.

3. BERÄKNINGSMETOD

Det ”alkoholfria vinets” specifika vikt d 20 20 (dr) beräknas med hjälp av följande formel:

dr = dv - da + 1,000

där

dv = vinets specifika vikt vid 20 °C (korrigerad för flyktiga syror),

da = fifika vikten vid 20 °C för en blandning av alkohol och vatten med samma alkoholstyrka som vinet

dr kan också beräknas med hjälp av nedanstående formel, utifrån densiteterna vid 20 °C, ρv för vinet och ρa för blandningen av vatten och alkohol med samma alkoholstyrka:

dr = 1,0018(ρv - ρa) + 1,000

där koefficienten 1,0018 avrundas till 1 när ρv är mindre än 1,05, vilket oftast är fallet.

4. REDOVISNING AV RESULTATEN

Tabell 1 används för att beräkna det totala torrextraktet i g/l utifrån det alkoholfria vinets relativa densitet dr 20 20 eller mustens relativa densitet d 20 20.

Det totala torrextraktet uttrycks i g/l med en decimal.

TABELL 4 För beräkning av det totala torrextraktet (g/l)

Tredje decimalen för den specifika vikten Den specifika vikten med två decimaler 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 Torrextrakt i g/l 1,00 0 2,6 5,1 7,7 10,3 12,9 15,4 18,0 20,6 23,2 1,01 25,8 28,4 31,0 33,6 36,2 38,8 41,3 43,9 46,5 49,1 1,02 51,7 54,3 56,9 59,5 62,1 64,7 67,3 69,9 72,5 75,1 1,03 77,7 80,3 82,9 85,5 88,1 90,7 93,3 95,9 98,5 101,1 1,04 103,7 106,3 109,0 111,6 114,2 116,8 119,4 122,0 124,6 127,2 1,05 129,8 132,4 135,0 137,6 140,3 142,9 145,5 148,1 150,7 153,3 1,06 155,9 158,6 161,2 163,8 166,4 169,0 171,6 174,3 176,9 179,5 1,07 182,1 184,8 187,4 190,0 192,6 195,2 197,8 200,5 203,1 205,8 1,08 208,4 211,0 213,6 216,2 218,9 221,5 224,1 226,8 229,4 232,0 1,09 234,7 237,3 239,9 242,5 245,2 247,8 250,4 253,1 255,7 258,4 1,10 261,0 263,6 266,3 268,9 271,5 274,2 276,8 279,5 282,1 284,8 1,11 287,4 290,0 292,7 295,3 298,0 300,6 303,3 305,9 308,6 311,2 1,12 313,9 316,5 319,2 321,8 324,5 327,1 329,8 332,4 335,1 337,8 1,13 340,4 343,0 345,7 348,3 351,0 353,7 356,3 359,0 361,6 364,3 1,14 366,9 369,6 372,3 375,0 377,6 380,3 382,9 385,6 388,3 390,9 1,15 393,6 396,2 398,9 401,6 404,3 406,9 409,6 412,3 415,0 417,6 1,16 420,3 423,0 425,7 428,3 431,0 433,7 436,4 439,0 441,7 444,4 1,17 447,1 449,8 452,4 455,2 457,8 460,5 463,2 465,9 468,6 471,3 1,18 473,9 476,6 479,3 482,0 484,7 487,4 490,1 492,8 495,5 498,2 1,19 500,9 503,5 506,2 508,9 511,6 514,3 517,0 519,7 522,4 525,1 1,20 527,8 — — — — — — — — —

Interpoleringstabell Fjärde decimalen för den specifika vikten Torrextrakt i g/l Fjärde decimalen för den specifika vikten Torrextrakt i g/l Fjärde decimalen för den specifika vikten Torrextrakt i g/l 1 0,3 4 1,0 7 1,8 2 0,5 5 1,3 8 2,1 3 0,8 6 1,6 9 2,3

5. REDUCERANDE SOCKER

1. DEFINITION

Reducerande socker omfattar alla sockerarter med keton- och aldehydgrupper och kännetecknas av sin reducerande verkan på en basisk kopparsaltlösning.

2. PRINCIPER FÖR METODERNA

2.1 Klarning

Referensmetod: Efter neutralisering och avlägsnande av alkoholen förs vinet genom en jonbytarkolonn där anjonerna byts mot acetatjoner, och klaras därefter med neutralt blyacetat.

Rutinmetod: Vinet behandlas med något av följande reagenser:

Neutralt blyacetat

Zinkhexacyanoferrat (II)

2.2. Bestämning

Enda metod: Det klarade vinet eller den klarade musten reageras med en given mängd basisk kopparsaltlösning och överskottet av kopparjoner bestäms därefter jodometriskt.

3. KLARNING

Sockermängden i den vätska vars sockerhalt skall bestämmas skall vara mellan 0,5 och 5 g/l.

Torra viner bör inte spädas under klarningen. Söta viner bör spädas under klarningen så att sockerhalten ligger inom gränserna i tabellen nedan:

Benämning Sockerhalt (g/l) Densitet Spädning (%) Must och mistella > 125 > 1,038 1 Söta viner, med eller utan tillsats av alkohol 25-125 1,005-1,038 4 Halvsöta 5-25 0,997-1,005 20 Torra viner < 5 < 0,997 Ingen spädning

3.1. Referensmetod

3.1.1. Reagenser

1 M saltsyra (HCI)

1 M natriumhydroxid (NaOH)

4 M ättiksyra (CH3COOH)

2 M natriumhydroxid (NaOH)

Anjonbytare (Dowex 3, mesh 20-50) eller likvärdig jonbytare.

Beredning av anjonbytarkolonnen. Placera en liten tuss glasull och 15 ml av anjonbytaren (3.1.1.5) på byrettens botten.

Innan jonbytaren används skall den behandlas i två fullständiga regenereringscykler genom att 1 M lösningar av saltsyra (3.1.1.1) och natriumhydroxid (3.1.1.2) omväxlande passeras genom den. Skölj i 50 ml destillerat vatten och flytta över jonbytaren till en bägare. Tillsätt 50 ml av 4 M ättiksyran (3.1.1.3) och rör om i fem minuter. Fyll på nytt byretten med jonbytare och häll 100 ml 4 M ättiksyra (3.1.1.3) genom kolonnen. (Det är lämpligt att ha ett lager av jonbytare i en flaska med 4 M ättiksyra.) Tvätta kolonnen med destillerat vatten till dess att utflödet är neutralt.

Regenerering av jonbytaren. Häll 150 ml av en 2 M natriumhydroxidlösning genom jonbytaren för att avlägsna syror och större delen av de färgämnen som är bundna i jonbytaren. Skölj med 100 ml vatten och häll sedan 100 ml 4 M ättiksyra genom jonbytaren. Tvätta kolonnen till dess att utflödet är neutralt.

Neutral blyacetatlösning (nästan mättad):

neutralt blyacetat Pb (CH3COO)2,3 H2O 250 g mycket hett vatten till 500 ml

Rör om tills blyacetat et är löst.

Kalciumkarbonat (CaCO3)

3.1.2 Metod

Torra viner

Häll 50 ml av vinet i en bägare med en diameter av 10-12 cm, tillsammans med 1/2 (n-0,5) ml av 1 M natriumhydroxidlösning (3.1.1.2) (n är den volym 0,1 M natriumhydroxidlösning som åtgår för bestämning av totala syrahalten i 10 ml vin) och låt indunsta över vattenbad med kokande vatten i en varm luftström till dess att vätskan reducerats till cirka 20 ml.

Häll denna vätska genom en anjonbytarkolonn i acetatform (3.1.1.5) med en hastighet av 3 ml per 2 minuter. Samla upp utflödet i en 100 ml mätkolv. Tvätta kärlet och kolonnen sex gånger med 10 ml destillerat vatten per gång. Rör om hela tiden, tillsätt 2,5 ml mättad blyacetatlösning (3.1.1.6) och 0,5 g kalciumkarbonat (3.1.1.7) till utflödet. Skaka om flera gånger och låt stå i minst 15 minuter. Fyll upp med vatten till märket. Filtrera.

1 ml filtrat motsvarar 0,5 ml vin.

Must, mistella, sött och halvsött vin:

Nedanstående spädningar är endast avsedda som vägledning.

1. Must och mistella:

bered en 10 % lösning av den vätska som skall analyseras och ta 10 ml av det utspädda provet.

Söta viner, med eller utan tillsats av alkohol, med en densitet mellan 1,005 och 1,038: bered en 20 % lösning av den vätska som skall analyseras och ta 20 ml av det utspädda provet.

Halvsöta viner med en densitet vid 20 °C mellan 0,997 och 1,005: ta 20 ml av det outspädda vinet.

Låt ovan angivna volym vin eller must passera genom en anjonbytarkolonn i acetatform med en hastighet av 3 ml per 2 minuter. Samla upp utflödet i en 100 ml mätkolv och skölj kolonnen med vatten tills cirka 90 ml utflöde har erhållits. Tillsätt 0,5 g kalciumkarbonat och 1 ml mättad blyacetatlösning till utflödet. Rör om och låt stå i 15 minuter. Rör om då och då. Fyll upp med vatten till märket. Filtrera.

1) 1 ml filtrat motsvarar 0,01 ml must eller mistella.

2) 1 ml filtrat motsvarar 0,04 ml sött vin.

3) 1 ml filtrat motsvarar 0,20 ml halvsött vin.

3.2 Rutinmetoder

3.2.1 Klarning med neutralt blyacetat

Reagenser

Lösning av neutralt blyacetat (nästan mättad) (se 3.1.1.6).

Kalciumkarbonat.

Metod

3.2.1.2.1 Torra viner:

Häll 50 ml av vinet i en 100 ml mätkolv. Tillsätt 1/2 (n-0,5) ml 1 M natriumhydroxidlösning (3.1.1.2) (n är den volym av 0,1 M natriumhydroxidlösning som åtgår för bestämning av den totala syrahalten i 10 ml vin). Tillsätt under omrörning 2,5 ml mättad blyacetatlösning (3.1.1.6) och 0,5 g kalciumkarbonat (3.1.1.7). Skaka om flera gånger och låt stå i minst 15 minuter. Fyll upp med vatten till märket. Filtrera.

1 ml filtrat motsvarar 0,5 ml vin.

3.2.1.2.2 Must, mistella, söta och halvsöta viner:

Häll följande mängder vin (eller must eller mistella) i en 100 ml mätkolv. Angivna spädningar är endast avsedda som vägledning.

1. Must och mistella:

Bered en 10 % lösning av den vätska som skall analyseras och ta 10 ml av det utspädda provet.

Söta viner, med eller utan tillsats av alkohol, med en densitet mellan 1,005 och 1,038: bered en 20 % lösning av den vätska som skall analyseras och ta 20 ml av det utspädda provet.

Halvsöta viner med en densitet vid 20 °C mellan 0,997 och 1,005: ta 20 ml av det outspädda vinet.

Tillsätt 0,5 g kalciumkarbonat, cirka 60 ml vatten och 0,5 1 eller 2 ml mättad blyacetatlösning. Rör om och låt stå i minst 15 minuter. Rör om då och då. Fyll upp med vatten till märket. Filtrera.

1) 1 ml filtrat motsvarar 0,01 ml must eller mistella.

2) 1 ml filtrat motsvarar 0,04 ml sött vin.

3) 1 ml filtrat motsvarar 0,20 ml halvsött vin.

3.2.2 Klarning med zink-2-hexacyanoferrat

Denna klarningsprocess bör endast användas för vita viner, svagt färgade söta viner och must.

Reagenser

3.2.2.1.1. Lösning 1, kalium-2-hexacyanoferrat:

kalium-2-hexacyanoferrat [K4 Fe (CN)6, 3 H2O] 150 g Vatten till 1000 ml

3.2.2.1.2. Lösning 2, zinksulfat:

zinksulfat (Zn SO4, 7 H2O) 300 g Vatten till 1000 ml

Metod

Häll följande mängder vin (eller must eller mistella) i en 100 ml mätkolv. Angivna spädningar är endast avsedda som vägledning.

1. Must och mistella:

Bered en 10 % lösning av den vätska som skall analyseras och ta 10 ml av det utspädda provet.

Söta viner, med eller utan tillsats av alkohol, med en densitet mellan 1,005 och 1,038: bered en 20 % lösning av den vätska som skall analyseras och ta 20 ml av det utspädda provet.

Halvsöta viner med en densitet mellan 0,997 och 1,005: ta 20 ml av det outspädda vinet.

Torra viner: ta 50 ml av det outspädda vinet.

Tillsätt 5 ml av lösning 1, kalium-2-hexacyanoferrat (3.2.2.1.1), och 5 ml av lösning 2, zinksulfat (3.2.2.1.2). Blanda. Fyll upp med vatten till märket. Vänta 10 minuter. Filtrera.

1) 1 ml filtrat motsvarar 0,01 ml must eller mistella.

2) 1 ml filtrat motsvarar 0,04 ml sött vin.

3) 1 ml filtrat motsvarar 0,20 ml halvsött vin.

4) 1 ml filtrat motsvarar 0,50 ml torrt vin.

4. BESTÄMNING AV SOCKER

4.1 Reagenser

4.1.1 Basisk kopparlösning:

kopparsulfat, rent, (CuSO4, 5 H2O) 25 g citronsyra (C6H8O7, H2O) 50 g kristalliniskt natriumkarbonat (Na2CO3, 10 H2O) 388 g vatten till 1000 ml

Lös kopparsulfatet i 100 ml vatten, citronsyran i 300 ml vatten och natriumkarbonatet i 300-400 ml hett vatten. Blanda citronsyra- och natriumkarbonatlösningarna. Tillsätt kopparsulfatlösningen och späd till en liter.

4.1.2 30 % kaliumjodidlösning:

kaliumjodid (KI) 30 g vatten till 100 ml

Förvara i en flaska av färgat glas.

4.1.3 25 % svavelsyra:

koncentrerad svavelsyra (H2SO4) ρ20 = 1,84 g/ml 25 g vatten till 100 ml

Tillsätt långsamt syran till vattnet, låt svalna och späd med vatten till 100 ml.

4.1.4 Stärklselösning 5 g/l:

Blanda 5 g stärkelse med cirka 500 ml vatten. Låt koka upp under omrörning och koka i tio minuter. Tillsätt 200 g natriumklorid (NaCl). Låt svalna och späd med vatten till en liter.

0,1 M natriumtiosulfaltlösning

Invertsockerlösning, 5 g/l, används för att kontrollera bestämningsmetoden.

Häll följande i en 200 ml mätkolv:

torr, ren sackaros (C12H22O11) 4,75 g vatten, ca 100 ml koncentrerad saltsyra (HCl) (ρ 20 = 1,16-1,19 g/ml) 5 ml

Värm kolven i vattenbad vid 60 °C till dess att lösningens temperatur är 50 °C. Håll kolven och lösningen vid 50 °C i 15 minuter. Låt kolven svalna naturligt i 30 minuter och sänk därefter ned den i ett kallt vattenbad. Häll över lösningen i en 1 l mätkolv och späd till en liter. Denna lösning kan förvaras i en månad. När den skall användas neutraliseras den (lösningen har en surhet av cirka 0,06 M) med natriumhydroxidlösning.

4.2 Metod

Blanda 25 ml av den basiska kopparlösningen, 15 ml vatten och 10 ml av den klarade lösningen i en 300 ml konisk kolv. Denna volym sockerlösning får inte innehålla mer än 60 mg invertsocker.

Tillsätt några bitar pimpsten. Anbringa en återloppskylare på kolven och låt blandningen koka upp inom två minuter. Låt blandningen koka i exakt tio minuter.

Kyl av kolven omedelbart under kallt rinnande vatten. När den är helt avkyld, tillsätt 10 ml 30 % kaliumjodidlösning (4.1.2), 25 ml 25 % svavelsyra (4.1.3) och 2 ml stärkelselösning (4.1.4).

Titrera med 0,1 M natriumtiosulfatlösning (4.1.5). Den använda mängden i ml betecknas n.

Utför också ett nollprov där sockerlösningen på 10 ml ersätts med 10 ml destillerat vatten. Den använda mängden natriumtiosulfat i ml betecknas n′.

4.3 Redovisning av resultaten

4.3.1 Beräkningar

Sockermängden i provet, uttryckt som invertsocker, anges i tabellen nedan som en funktion av den använda mängden (n′ - n) natriumtiosulfat i ml.

Vinets sockerhalt uttrycks i gram invertsocker per liter med en decimal, med hänsyn tagen till den spädning som görs under klarningen samt till provets volym.

4.3.2 Repeterbarhet

r = 0,015 xi

xi = halten invertsocker i g/l per prov.

4.3.3 Reproducerbarhet

R = 0,058 xi

xi = halt av invertsocker i g/l per prov.

Förhållandet mellan mängden 0,1 M natriumtiosulfatlösning, (n′-n) ml, och mängden reducerande socker i mg Na2S2O3 (ml 0,1M) Reducerande socker (mg) Skillnad Na2S2O3 (ml 0,1 M) Reducerande socker (mg) Skillnad 1 2,4 2,4 13 33,0 2,7 2 4,8 2,4 14 35,7 2,8 3 7,2 2,5 15 38,5 2,8 4 9,7 2,5 16 41,3 2,9 5 12,2 2,5 17 44,2 2,9 6 14,7 2,6 18 47,2 2,9 7 17,2 2,6 19 50,0 3,0 8 19,8 2,6 20 53,0 3,0 9 22,4 2,6 21 56,0 3,1 10 25,0 2,6 22 59,1 3,1 11 27,6 2,7 23 62,2 12 30,3 2,7

6. SACKAROS

1. PRINCIPER FÖR METODERNA

Kvalitativ undersökning med tunnskiktskromatografi. Sackaros separeras från andra sockerarter med tunnskiktskromatografi på en cellulosabelagd platta och påvisas med hjälp av ureasaltsyrareagens vid 105 °C.

Undersökning och bestämning med HPLC (vätskekromatografi): sackaros separeras i en kolonn av alkylaminbunden silica och påvisas med refraktometri. Resultatet kvantifieras i förhållande till en extern standard som analyseras under samma betingelser.

Anmärkning:

Äktheten hos en must eller ett vin kan kontrolleras med den metod som använder deuterium-NMR och som har beskrivits för att påvisa sockertillsats i must, renad koncentrerad must och vin.

För undersökning och bestämning av sackaros kan också gaskromatografi användas, såsom beskrivs i kapitel 42, punkt f.

2. KVALITATIV UNDERSÖKNING MED TUNNSKIKTSKROMATOGRAFI

2.1 Apparatur

Kromatografiplattor täckta med cellulosapulver till önskad tjocklek (t.ex. MN 300) (20×20).

Kromatografikärl.

Mikrometerspruta eller mikropipett.

Torkskåp som kan regleras till 105 ± 2 °C.

2.2 Reagenser

2.2.1. Aktivt kol för avfärgning.

Mobil fas: diklormetan — isättika (ρ20 = 1,05 g/ml) — etanol — metanol — vatten (50:25:9:6:10).

2.2.3 Framkallare

Urea 5 g 2 M saltsyra 20 ml Etanol 100 ml

2.2.4 Referenslösningar

Glukos 35 g Fruktos 35 g Sackaros 0,5 g Destillerat vatten 1000 ml

2.3 Metod

2.3.1 Beredning av provet

Must eller vin med kraftig färg avfärgas genom behandling med aktivt kol.

För renad koncentrerad must används en lösning med en sockerhalt av 25 % (m/m) (25 oBrix) som bereds enligt anvisningarna i kapitlet ”pH-värde”, punkt 4.1.2, och späds till en fjärdedel av koncentrationen genom att 25 ml späds med vatten till 100 ml i en mätkolv.

2.3.2 Framställning av kromatogram

Placera följande bredvid varandra, 2,5 cm från plattans nederkant:

10 μl av provet

10 μl standardlösning.

Placera plattan i kärlet som tidigare mättats med ånga från den mobila fasen. Låt den mobila fasen vandra till inom 1 cm från plattans överkant. Avlägsna plattan och torka den i en varm luftström. Upprepa vandringen ytterligare två gånger och torka plattan varje gång. Spraya på 15 ml av framkallaren i ett jämnt lager och lägg plattan i 105 °C i ett torkskåp i ca fem minuter.

2.4 Resultat

Sackaros och fruktos framträder som mörkblå fläckar mot vit bakgrund, medan glukos framträder som en svagare grönfärgad fläck.

3. UNDERSÖKNING OCH BESTÄMNING MED HPLC

Anvisningarna för kromatografi lämnas endast som vägledning.

3.1 Utrustning

3.1.1. HPLC-apparat utrustad med följande:

10 μl injektor.

Detektor: differentialrefraktometer eller refraktometer av interferometertyp.

Alkylaminbunden silicakolonn (25 cm lång, 4 mm innerdiameter).

Förkolonn fylld med samma fas.

Anordning for isolering eller termostatkontroll (vid 30 °C) av förkolonnen och provkolonnerna.

Skrivare samt eventuellt integrator.

Flödeshastighet i mobil fas: 1 ml/min.

3.1.2 Anordning för membranfiltrering (0,45 μm).

3.2 Reagenser

3.2.1. Dubbeldestillerat vatten.

3.2.2. Acetonitril av HPLC-kvalitet (CH3CN).

Mobil fas: acetonitrilvatten som genomgått membranfiltrering (0,45 μm), (80:20, v/v).

Den mobila fasen skall avgasas före användning.

Standardlösning: 1,2 g/l vattenhaltig sackaroslösning. Filtreringsanordning med 0,45 μm membranfilter.

3.3 Metod

3.3.1. Beredning av provet

För vin och must: filtreringsanordning med 0,45 μm membranfilter.

För renad koncentrerad must: använd en lösning som erhålls genom spädning av den renade koncentrerade musten till 40 % (m/v) enligt anvisningarna i kapitlet ”Total syrahalt”, punkt 5.1.2, och filtrera den genom ett 0,45 μm membranfilter.

3.3.2 Kromatografisk bestämning

Injicera först 10 μl av standardlösningen i kromatografen och därefter 10 μl av provet som beretts enligt anvisningarna i 3.3.1. Upprepa injektionerna i samma ordning.

Skriv ut kromatogrammet.

Retentionstiden för sackaros är cirka 10 minuter.

3.4 Beräkningar

För beräkningen används medelvärdet av två resultat för standardlösningen och provet.

3.4.1 För vin och must:

Beräkna koncentrationen i g/l.

3.4.2 För renad koncentrerad must:

Sackaroshalten i g/l i den 40-procentiga (m/v) lösningen av renad koncentrerad must betecknas C.

Sackaroshalten i g/kg i den renade koncentrerade musten blir då 2,5 C.

3.5 Redovisning av resultaten

Sackaroshalten i vin, must och renad koncentrerad must uttrycks i gram per liter för vin och must och i gram per kilogram för renad koncentrerad must, i båda fallen med en decimal.

7. GLUKOS OCH FRUKTOS

1. DEFINITION

Glukos och fruktos kan bestämmas var för sig med en enzymatisk metod enbart i syfte att beräkna förhållandet glukos/fruktos.

2. PRINCIP

Glukos och fruktos fosforyleras med adenosintrifosfat (ATP) under en enzymreaktion som katalyseras av hexokinas (HK) och ger då glukos-6-fosfat (G6P) och fruktos-6-fosfat (F6P):

glukos + ATP G6P + ADP

fruktos + ATP F6P + ADP

Glukos-6-fosfat oxideras först till glukonat-6-fosfat med nikotinamid-adenin-dinukleotidfosfat (NADP) i närvaro av enzymet glukos-6-fosfatdehydrogenas (G6PDH). Den mängd reducerat nikotinamid-adenin-dinukleotidfosfat (NADPH) som erhålls motsvarar mängden glukos-6-fosfat och därmed också mängden glukos.

G6P + NADP+ glukonat-6-fosfat + NADPH + H+

Det reducerade nikotinamid-adenin-dinukleotidfosfatet bestäms utifrån dess absorption vid 340 nm.

I slutet av reaktionsförloppet omvandlas fruktos-6-fosfat till glukos-6-fosfat under påverkan av fosfoglukosisomeras (PGI):

F6P G6P

Glukos-6-fosfat reagerar i sin tur med nikotinamid-adenin-dinukleotidfosfatet och producerar glukonat-6-fosfat och reducerat nikotinamid-adenin-dinukleotidfosfat, som därefter bestäms.

3. APPARATUR

Spektrofotometer för mätning vid 340 nm, den våglängd där NADPH har maximal absorption. Eftersom absoluta mätningar görs (dvs. kalibreringskurvor används inte, utan standardisering görs med hjälp av extinktionskoefficienten för NADPH), måste apparatens våglängdsskalor och absorptionsvärden kontrolleras. Om ovanstående utrustning inte finns tillgänglig kan en spektrofotometer med diskontinuerligt spektrum användas, för mätning vid 334 nm eller 365 nm.

Glaskuvetter med en optisk väglängd på 1 cm eller engångskuvetter.

Pipetter för de enzymatiska provlösningarna, 0,02 — 0,05 — 0,1 — 0,2 ml.

4. REAGENSER

Lösning 1: buffertlösning (0,3 M trietanolamin, pH 7,6; 4 × 10-3 M Mg2+). Lös 11,2 g trietanolaminhydroklorid ((C2H5)3N × HCl) och 0,2 g MgSO4 × 7H2O i 150 ml dubbeldestillerat vatten. Tillsätt cirka 4 ml 5 M natriumhydroxidlösning (NaOH) för att uppnå pH 7,6. Späd till 200 ml.

Denna buffertlösning kan förvaras i fyra veckor vid + 4 °C.

Lösning 2: nikotinamid-adenin-dinukleotidfosfatlösning (ca 11,5 × 10-3 M). Lös 50 mg dinatrium-nikotinamid-adenin-dinukleotidfosfat i 5 ml dubbeldestillerat vatten.

Lösningen kan förvaras i fyra veckor vid + 4 °C.

Lösning 3: adenosin-5'-trifosfatlösning (ca 81 × 10-3 M). Lös 250 mg dinatrium-adenosin-5'-trifosfat och 250 mg natriumhydrogenkarbonat (NaHCO3) i 5 ml dubbeldestillerat vatten.

Lösningen kan förvaras i fyra veckor vid + 4 °C.

Lösning 4: hexokinas/glukos-6-fosfatdehydrogenas: Blanda 0,5 ml hexokinas (2 mg protein/ml eller 280 E/ml) med 0,5 ml glukos-6-fosfatdehydrogenas (1 mg protein/ml).

Blandningen kan förvaras i ett år vid + 4 °C.

Lösning 5: fosfoglukosisomeras (2 mg protein/ml eller 700 E/ml). Suspensionen används outspädd.

Kan förvaras i ett år vid + 4 °C.

Anmärkning:

Samtliga ovan angivna lösningar finns i handeln.

5. METOD

5.1 Beredning av provet

Beroende på den uppskattade mängden glukos + fruktos per liter skall provet spädas enligt följande:

Mätning vid 340 och 334 nm Mätning vid 365 nm Spädning med vatten Spädningsfaktor F < 0,4 g/l 0,8 g/l — — < 4,0 g/l 8,0 g/l 1 + 9 10 < 10,0 g/l 20,0 g/l 1 + 24 25 <20,0 g/l 40,0 g/l 1 + 49 50 < 40,0 g/l 80,0 g/l 1 + 99 100 > 40,0 g/l 80,0 g/l 1 + 999 1000

5.2 Bestämning

Ställ in spektrofotometern på våglängden 340 nm och utför bestämningarna i förhållande till luften (ingen kuvett i strålgången) eller till vatten.

Temperatur mellan 20 och 25 °C.

Placera följande i två kuvetter med 1 cm väglängd:

Referenskuvett Provkuvette Lösning 1 (4.1) (uppvärmd till 20 °C) 2,50 ml 2,50 ml Lösning 2 (4.2) 0,10 ml 0,10 ml Lôsning 3 (4.3) 0,10 ml 0,10 ml Analysprov 0,20 ml Dubbeldestillerat vatten 0,20 ml

Blanda och läs av lösningarnas absorbans (A1) efter cirka tre minuter. Sätt igång reaktionen genom att tillsätta

Lösning 4 (4.4) 0,02 ml 0,02 ml

Blanda. Vänta 15 minuter och läs av absorbansen. Kontrollera efter ytterligare 2 minuter (A2) att reaktionen har avstannat.

Tillsätt omedelbart:

Lösning 5 (4.5) 0,02 ml 0,02 ml

Blanda, läs av absorbansen (A3) efter 10 minuter och kontrollera efter ytterligare 2 minuter att reaktionen har avstannat.

Beräkna absorbansdifferenserna:

A2 - A1 motsvarar glukos

A3 - A2 motsvarar fruktos

för såväl referens- som provvätskan.

Beräkna absorbansdifferenserna för referensvätskan (ΔAT) och provvätskan (ΔDP) och gör följande beräkningar:

för glukos: ΔAG = ΔAD - ΔAT

för fruktos: ΔAF = ΔAD - ΔAT

Anmärkning:

Tidsåtgången för att enzymerna skall utöva sin fulla verkan varierar mellan olika prover. Ovanstående värde anges endast som vägledning och vârdet bör bestämmas individuellt för varje prov.

5.3 Redovisning av resulttaten

5.3.1. Beräkning

Följande allmänna formel används för att beräkna koncentrationerna:

C = V × PM ε × d × v × 1000 Δ A g/l

där

V = provlösningens volym (ml)

v = provets volym (ml)

PM = molekylvikten för den substans som skall bestämmas

d = väglängden i kuvetten (cm)

Σ = NADPH:s absorptionskoefficient vid 340 nm = 6,3 (nmol-1 × 1 × cm-1)

och

V = 2,92 ml vid bestâmning av glukos

V = 2,94 ml vid bestämning av fruktos

v = 0,20 ml

PM = 180

d = 1

Då erhålls:

För glukos: C(g/l) = 0,417 ΔAG

För fruktos: C(g/l) = 0,420 ΔAF

Om provet har spätts i samband med beredningen multipliceras resultatet med spädningsfaktorn F.

Anmärkning:

Om bestämningarna görs vid 334 eller 365 nm erhålls följande resultat:

bestämning vid 334 nm: Σ = 6,2 (mnol-1 × 1 × cm-1) För glukos: C(g/l) = 0,425 ΔAG För fruktos: C(g/l) = 0,428 ΔAF

bestämning vid 365 nm: Σ = 3,4 (nmol-1 × 1 × cm-1) För glukos: C(g/l) = 0,773 ΔAG För fruktos: C(g/l) = 0,778 ΔAF

5.3.2 Repeterbarhet (r)

r = 0,056 xi

5.3.3 Reproducerbarhet (R)

R = 0,12 + 0,076 xi

xi = halt av glukos eller fruktos i g/l.

8. PÅVISANDE AV SOCKERTILLSATS I DRUVMUST, KONCENTRERAD DRUVMUST, RENAD KONCENTRERAD DRUVMUST OCH VIN GENOM TILLÄMPNING AV KÄRNMAGNETISK RESONANS AV DEUTERIUM (SNIF-NMR/RMN-FINS)

1. DEFINITION

De deuteriumatomer som finns i socker och i vattnet i druvmust omfördelas efter jäsning i molekylerna I, II, III och IV i vinet:

CH2D CH2 OH CH3 CHD OH I II CH3 CH2 OD HOD III IV

Tillsats av främmande sockerarter (chaptalisering) före jäsning av musten påverkar deuteriumfördelningen.

Vid en jämförelse med värdena för motsvarande parametrar i ett naturligt referensvin från samma område jakttas följande variationer efter tillsats av främmande sockerarter:

Parametrar Vin (D/H)I (D/H)II (D/H) W Q R — Naturligt — Tillsatt: — betsocker — rörsocker — majssocker

(D/H)I: Isotopförhållande i molekyl I

(D/H)II: Isotopförhållande i molekyl II

(D/H) W Q: Isotopförhållande i vattnet i vinet

R = 2(D/H)II/(D/H)I uttrycker den relativa distributionen av deuterium i molekylerna I och II. R mäts direkt från signalernas h-intensitet, så att R = 3hII/hI.

(D/H)I karakteriserar främst den växtart i vilken sockret har syntetiserats och i mindre utsträckning de geografiska förhållandena på den plats där skörden ägt rum (typ av vatten vid fotosyntesen).

(D/H)II representerar klimatförhållandena på den plats där druvorna vuxit (regnvatten och väderleksförhållanden) och i mindre utsträckning sockerhalten i den ursprungliga musten.

(D/H) W Q representerar klimatförhållandena på produkttionsplaten och sockerhalten i den ursprungliga musten.

2. PRINCIP

Ovan angivna parametrar [R, (D/H)I, (D/H)II] bestäms med deuterium-NMR i etanol som extraherats från vinet eller från de jäsningsprodukter från den must, den koncentrerade must eller den renade koncentrerade must som bar producerats under de givna förhållandena. Bestämningarna kan kompletteras med en bestämning av isotopförhållandet i vatten som extraherats från vinet, (D/H) W Q, och en bestämning av förhållandet 13C/12C i etanolen.

I avvaktan på at en databank upprättas på gemenskapsnivå gâller följande:

Vad gäller vin, skall kontrollprover som har tagits inom de olika områdena åtföljas av naturliga kontrollprover (minst tre) av samma ursprung (geografisk plats och årgång). Tre provserier skall tas.

Vad gäller must, koncentrerad must och renad koncentrerad must, skall tre serier av kontrollprover tas på naturlig must av samma ursprung (geografisk plats och årgång).

I avvaktan på att en databank upprättas på gemenskapsnivå kan medlemsstaterna för kontroll av produkter som framställs inom det egna territoriet använda en egen nationell databank under en övergångsperiod.

3. BEREDNING AV PROVET FÖR ANALYS

3.1 Extraktion av etanol och vatten från vin

Anmärkning: Valfri metod får användas för extraktion av etanol, så länge 98-98,5 % av vinets totala alkoholhalt utvinns i ett destillat som innehåller 92-93 % mas (95 % vol.).

3.1.1 Apparatur och reagenser

Apparatur för extraktion av etanol (figur 1) bestående av:

elektriskt uppvärmd kolv med spänningsregulator,

1 l rundbottnad kolv med halskoppling av slipat glas,

cadiotkolonn med roterande band (rörlig del av teflon),

125 ml koniska kolvar med halskoppling av slipat glas,

125 ml och 60 ml flaskor med plastproppar.

Reagenser för bestämning av vatten enligt Karl Fischer-metoden (t.ex. Merck 9241 och 9243).

3.1.2 Metod

Bestäm alkoholstyrkan i vinet (tv) med en noggrannhet av minst 0,05 % vol.

Extraktion av etanol

Ett homogent vinprov på 500 ml med en alkoholhalt tv hälls i destillationsapparatens kolv med ett konstant återflödesförhållande på ca 0,9. En 125 ml slipad förlagskolv som kalibrerats i förväg används för att fånga upp destillatet. Extrahera 40-60 ml av vätskan, som kokar mellan 78,0 och 78,2 °C. Om temperaturen överstiger 78,5 °C avbryts extraktionen i fem minuter.

När temperaturen återgår till 78 °C fortsätts uppsamlingen av destillatet tills temperaturen återigen når 78,5 °C. Upprepa detta förfarande till dess att temperaturen, efter avbruten extraktion och funktion i ett slutet kretslopp, förblir konstant. Fullständig destillation tar ca fem timmar. Detta förfarande gör det möjligt att extrahera 98-98,5 % av vinets totala alkoholhalt, vilket ger ett destillat med en alkoholhalt av 92-93 % mas (95 % vol.), dvs. den halt som har valts för NMR-betingelserna i punkt 4.

Väg den extraherade etanolen.

Ett homogent 60 ml prov av destillationsresterna förvaras i en 60 ml kolv och representerar vattnet i vinet. Dess isotopförhållande kan bestämmas om så önskas.

Anmärkning:

Om en spektrometer med 10 mm sond finns tillgänglig (jfr punkt 4), är ett homogent prov på 300 ml vin tillräckligt.

Bestämning av alkoholhalten i den extraherade alkoholen

Vattenhalten (p'g) bestäms enligt Karl Fischer-metoden i ett prov på ca 0,5 ml alkohol med exakt känd massa p.

Figur 1 - Destillationsapparat för extraktion av alkohol

Etanolhalten per enhet massa erhålls med formeln:

t m D = p - p′ p × 100

3.2 Jäsning av must, koncentrerad must och renad koncentrerad must

3.2.1 Apparatur och reagenser

Vinsyra

DIFCO Bacto Yeast Nitrogen Base utan aminosyror

Aktiv torrjäst (Saccharomyces cerevisae)

Om isotopförhållandet i musten är känt, kan jästen reaktiveras före användning i 15 minuter i minsta möjliga mängd ljummet icke-destillerat vatten (1 g/50 ml), så att isotopförhållandet blir detsamma som i musten.

Om mustens isotopförhållande inte är känt är det bättre att använda torrjästen direkt.

Mängden torrjäst som tillsätt skall vara 1 g (1010 celler) per liter must.

Ett 1,5-liters jäskärl, med en anordning som gör det lufttätt och möjliggör kondensation av alkoholångor, eftersom det inte får ske något svinn av etanol under jäsningen. Graden av omvandling av jäsbara sockerarter till etanol bör överstiga 98 %.

3.2.2 Metod

Must

Färsk must Häll 1 liter must, med i förväg bestämd sockerhalt, i jäskärlet. Tillsätt 1 g i förväg reaktiverad torrjäst. Tillslut kärlet så att det är lufttätt. Låt jäsning ske vid omkring 20 °C till dess att allt socker har förbrukats. Efter bestämning av alkoholhalten i jäsningsprodukten och beräkning av graden av omvandling av socker till etanol centrifugeras den jästa vätskan och destilleras för att extrahera etanolen.

Must som förhindrats att jäsa genom tillsats av svaveldioxid Avsvavla drygt 1 liter must (dvs. 1,2 l) genom att leda kväve genom musten under återflöde i ett vattenbad vid 70-80 °C, tills den total svaveldioxidhalten är mindre än 200 mg/l. Sörj för effektiv kylning av musten för att förhindra att den koncentreras genom indunstning av vattnet. Häll 1 liter av den avsvavlade musten i jäskärlet och fortsätt enligt anvisningarna för färsk must.

Anmärkning:

Om kaliummetabisulfit används för sulfitbehandlingen av musten måste 0,25 ml svavelsyra (ρ20 = 1,84 g/ml) per gram metabisulfit använd per liter must tillsättas musten före avsvavling.

Koncentrerad must

Häll V ml koncentrerad must med känd sockerhalt (omkring 170 g) i ett jäskärl. Fyll upp till 1 liter med (1000 - V) ml vatten från den vattenkälla som normalt används, som skall ha samma isotopförhållande som vattnet i naturlig must. Tillsätt (3.2.1) torrjäst (1 g) och 3 g DIFCO Bacto Yeast Nitrogen Base utan aminosyror. Homogenisera och fortsätt enligt ovan.

Renad koncentrerad must

Förfar enligt anvisningarna i 3.2.2.2 och fyll upp till 1 liter med (1000 - V) ml vatten med samma isotopförhållande som vatten i naturlig must, med en tillsats av 3 g löst vinsyra.

Anmärkning Behåll 50 ml av mustprovet eller av den svaveldioxidbehandlade musten eller den renade koncentrerade musten, för att vid behov kunna extrahera vattnet och bestämma dess isotopförhållande (D/H) W Q.

Extraktion av vattnet i musten kan utföras mycket enkelt genom azeotropisk destillation med toluen.

3.3 Beredning av provet för NMR-bestämning

3.3.1 Reagenser

N, N-tetrametylurea (TMU). Använd TMU-standardprov med givet, kontrollerat isotopförhållande D/H. Detta prov kan tillhandahållas av:

Generaldirektoratet för vetenskap, forskning och utveckling EG:s referensbyrå 200. rue de la Loi, B-1409 Bryssel Belgien

3.3.2 Metod

NMR-sond, 15 mm i diameter: Häll 7 ml alkohol som framställts enligt anvisningarna i 3.1.2 i en på förhand vägd flaska och bestäm alkoholens vikt med 0,1 mg noggrannhet (mA). Ta ut ett 3 ml prov av intern standard (TMU) och bestäm dess vikt med 0,1 mg noggrannhet (mst). Homogenisera genom omskakning.

NMR-sond, 10 mm i diameter: 3,2 ml alkohol och 1,3 ml TMU är tillräckligt. Beroende på vilken typ av spektrometer och sond som används (jfr punkt 4) tillsätts en tillräcklig mängd hexafluorbensen som fältfrekvensstabilisator (lås):

Spektrometer Sond 10 mm 15 mm 7,05 T 150 μl 200 μl 9,4 T 35 μl 50 μl

3.4 Beredning av vattenprov för NMR-bestämning för eventuell bestämning av vattnets isotopförhållande

3.4.1 Reagenser

N, N-tetrametylurea (TMU): se 3.3.1.

3.4.2 Metod

Häll 3 ml vatten som har erhållits enligt 3.1.2 eller 3.2 (anmärkning) ovan i en tarerad kolv och bestäm vikten ± 0,1 mg (m'E). Tillsätt 4 ml intern standard (TMU) och bestäm vikten med 0,1 mg noggrannhet (m'st). Homogenisera genom omskakning.

Anmärkning Om laboratoriet har tillgång till masspektrometer för bestämning av isotopförhållandet kan mätningen utföras med denna apparat för att minska belastningen på NMR-spektrometern. TIV-förhållandet (5.2) måste kalibreras för varje vinserie som undersöks.

4. REGISTRERING AV 2H-NMR-SPEKTRUM I ALKOHOL OCH VIN

Bestämning av isotopparametrar.

4.1 Apparatur

NMR-spektrometer med speciell ”deuteriumsond” som är avstämd efter den karakteristiska frekvensen Vo för fältet Bo (t.ex. för Bo = 7,05T, Vo = 46,05 MHz och för Bo = 9,4 T, Vo = 61,4 MHz), med en protonavkopplingskanal (B2) och kanal för stabilisering av fältfrekvensen (lås) vid frekvensen för fluor. Den på spektrumet bestämda upplösningen (transformerad utan exponentiell multiplikation, dvs. LB = 0), (figur 2b) som uttrycks genom linjebredden vid halv höjd av metyl- och metylensignalerna för etanol och metylsignalen för TMU, måste vara mindre än 0,5 Hz. Noggrannheten, som bestäms med en exponentiell multiplikationsfaktor LB = 2 (figur 2a), måste vara större än eller lika med 150 för metylsignalen för etanol med en alkoholhalt av 95 % vol. (93,5 %) (vikt). Under dessa betingelser blir konfidensintervallet för bestämning av signalhöjden, beräknad med 97,5 % sannolikhet (ensidigt test) och 10 repetitioner av spektrumet, 0,35 %.

Automatisk provväxlare (eventuellt)

Programvara för databehandling

15 mm eller 10 mm provrör, beroende på spektrometerns prestanda.

4.2 Kalibrering av spektrometer och kontroller

4.2.1 Kalibrering

Kalibrera för homogenitet och noggrannhet i enlighet med tillverkarens specifikationer.

4.2.2 Kontroll av kalibreringens korrekthet

Använd prover av standardetanol, markerad med bokstäverna C, V och B, med olika, men kända, isotopkoncentrationer. Bokstävernas innebörd är för C: alkohol från rörsocker eller majs; för V: alkohol från vin; för B: alkohol från betsocker. Proven tillhandahålls av gemenskapens referensbyrå.

Bestäm alkoholprovernas isotopvärden med hjälp av den metod som beskrivs i 4.3, och beteckna dem Cbest, Vbest, Bbest (se 5.3).

Jämför dessa med motsvarande angivna standardvärden, betecknade Cst,Bst, Vst(se 5.3).

Figur 2a 2H-NMR-spektrum för vinetanol med intern standard (TMU: N, N-tetrametylurea)

Figur 2b 2H-spektrum för etanol bestämt under samma förhållanden som i figur 2a, men utan exponentiell multiplikation (LB = 0).

Standardavvikelsen för repeterbarheten beräknad som medelvärdet av 10 repetitioner av varje spektrum skall vara mindre än 0,01 för förhållandet R och mindre än 0,3 ppm för (D/H)I och (D/H)II.

De medelvärden som erhålls för de olika isotopparametrarna (R, (D/H)I, (D/H)II) skall ligga inom den av gemenskapens referensbyrå angivna motsvarande standardavvikelsen för repeterbarheten för dessa parametrar vad gäller de tre referensalkoholerna. Om så inte är fallet utförs kontrollen igen.

4.3 Betingelser för bestämning av NMR-spektra

Häll ett alkoholprov, berett enligt 3.3 (eller ett vattenprov berett enligt 3.4) i ett 15 mm eller 10 mm rör och för in det i sonden.

NMR-spektrumet bestäms under följande betingelser:

Konstant sondtemperatur (t.ex. 302 K).

En uppsamlingstid av minst 6,8 s vid en spektrumbredd om 1200 Hz (16K minne) (dvs. omkring 20 ppm vid 61,4 MHz eller 27 ppm vid 46,1 MHz).

Pulsvinkel: 90o.

Väntetiden för uppsamlingen (”acquisition delay”) skall vara i samma storleksordning som uppsamlingstiden för en enskild mätpunkt (”dwell time”).

Kvadratisk likriktning: ”offset” 01 ställs in mellan OD- och CHD-referenssignalerna för etanol och mellan HOD- och TMU-referenssignalerna för vatten.

Bestäm värdet för frånkopplingsoffset 02 utifrån det protonspektrum som bestämts med avkopplingsspolen på samma rör. Bra frånkoppling erhålls när 02 ligger i mitten av frekvensintervallet mellan CH3- och CH2-grupperna. Använd bredbandsavkoppling.

För varje spektrum utförs så många ackumulationer NS som behövs för att uppnå det signal/brusförhållande som anges i 4.1. Upprepa NS-ackumulationerna NE = 10 gånger. NS-värdena beror på vilken typ av spektrometer och sond som används (jfr. punkt 4). Följande är exempel på möjliga kombinationer:

Spektrometer Sond 10 mm 15 mm 7,05 T NS = 304 NS = 200 9,4 T NS = 200 NS = 128

5. REDOVISNING AV RESULTATEN

5.1 Etanol

För vart och ett av de 10 spektra (se NMR-spektrum för etanol, figur 2a) bestäms följande:

R = 3 h II h I = 3 × höjden på signal II CH 3CHD OH höjden på signal I CH 2D CH 2OH

D/H I = 1,5866 × T I × m st m A × D/H st t m D

D/H II = 2,3799 × T II × m st m A × D/H st t m D

med

T I = höjden på signal I CH 2D CH 2OH höjden på signalen för intern standard TMU

T II = höjden på signal II CH 3T CHD OH höjden på signalen för intern standard TMU

CH3CHDOH mst och mA, se 3.3.2.

t m D se 3.1.2.3.

(D/H)st = isotopförhållandet i intern standard (TMU) (anges på den flaska som tillhandahålls av gemenskapens referensbyrå).

Användning av signalernas topphöjd, i stället för toppens yta som är ett mindre exakt mått, förutsätter att linjebredden vid halv höjd är den samma och utgör en rimlig uppskattning (figur 2b).

5.2 Vatten

För bestämning av vattens isotopförhållande med NMR utifrån en blandning av vatten och TMU används följande formel:

D/H W Q = 0,9306 × T IV × m′ st m′ E × D/H st

där

T IV = HOD-signalens område för vatten som extraherats från vinet signalområde från intern standard TMU

m'st och m'E, se 3.4.2.

(D/H)st = isotopförhållandet i intern standard (TMU) (anges på den flaska som tillhandahålls av EG:s referensbyrå).

För var och en av isotopparametrarna beräknas medelvärdet av 10 bestämningar och konfidensintervallet.

Med valfri programvara (t. ex. SNIF-NMR), anpassad till spektrometerns dator, kan dessa beräkningar utföras on-line.

Anmärkning:

Om en systematisk differens, inom standardavvikelsen, föreligger efter inställning av spektrometern mellan de medelvärden som erhålls för referensalkoholernas karakteristiska isotoper (4.2.2) och de värden som anges av EG:s referensbyrå kan det korrekta värdet för ett prov X erhållas genom korrektion enligt följande.

Interpolering utförs med hjälp av de värden för referensprovet som ligger på vardera sidan om värdet för provet X.

Om (D/H) I Xbest är det uppmätta värdet och (D/H) I Xkorr är det korrigerade värdet erhålls följande:

(D/H) i Xkorr = (D/H) i Bst + α (D/H) i Xbest - (D/H) i Bbest

där α = D/H I Vst × D/H I Bst D/H I Vmes × D/H I Bmes

Exempel:

Referensprover som tillhandahålls och kalibreras av gemenskapens referensbyrå:

(D/H) I Vst = 102,0 ppm (D/H) I B st = 91,95 ppm

Referensprover bestämda i laboratoriet:

(D/H) I Vbest = 102,8 ppm (D/H)IBbest = 93,0 ppm

Misstänkt okorrigerat prov:

(D/H) I Xbest = 100,2 ppm

α = 1,0255 och (D/H) I Xkorr = 99,3 ppm är beräknade.

6. TOLKNING AV RESULTATEN

Jämför värdet Rx, som anger förhållandet R för det misstänkt uppblandade provet, med de förhållanden som erhålls för referensvinerna. Om Rx avviker med mer än två standardavvikelser från medelvärdet RT för referensvinet kan uppblandning misstänkas.

6.1 Tillsats av betsocker, rörsocker eller majsglukos

6.1.1 Vin

RX högre än RT: förmodad tillsats av betsocker.

RX lägre än RT: förmodad tillsats av rörsocker eller majssocker.

Observera att (D/H) II X och (D/H) W QX är förhöjda.

Undersök (D/H) I X:

Förmodad tillsats av betsocker: (D/H) I X för det misstänkta provet är mer än en standardavvikelse lägre än medelvärdet för referensproven (D/H) I T.

Förmodad tillsats av rörsocker eller majssocker: (D/H) I X är mer än en standardavvikelse högre än (D/H) I T.

Beräkning av tillsatsen E, uttryckt i % vol. etanol:

Tillsats av betsocker: E % vol = t v D/H I T - D/H I X D/H I T - D/H I B där (D/H) I B - isotopförhållandet för position I i alkohol från betsocker. (D/H) I B = 92,5

tv = alkoholhalten i det analyserade vinet (X).

Tillsats av rörsocker eller majssocker: E % vol = t v D/H I X - D/H I T D/H I C - D/H I T där (D/H) I C - isotopförhållandet för plats I i alkohol från rörsocker eller majssocker: (D/H) I C = 110,5

tv = alkoholhalten i det analyserade vinet (X).

6.1.2 Must, koncentrerad must och renad koncentrerad must

Värdena för isotopparametrarna för den enligt i 3.1 extraherade alkoholen från de jäsprodukter som erhålls (3.2) från must, koncentrerad must och renad koncentrerad must undersöks enligt de anvisningar som ges i 6, ”Tolkning av resultat” (6.1.1), och jämförs med den alkohol som extraheras från jäsprodukterna från must.

E % vol. representerar den alkoholvolym som har tillsatts den jästa produkten. Om man känner till den eventuella spädning som gjorts före jäsning (koncentrerad must och renad koncentrerad must) och antar att 16,83 g socker ger 1 % vol. alkohol kan man beräkna mängden socker (vikt) som har tillsatts per liter must, koncentrerad must eller renad koncentrerad must.

6.2 Tillsats av en blandning av betsocker och rörsocker eller majsglukos

Isotopförhållandena (D/H)I och R är mindre förändrade än när endast en sockertyp har tillsatts.

(D/H)II och (D/H) W Q är förhöjda.

Dessa tillsatser kan konstateras genom bestämning av etanolens 13C/12C-förhållande med masspektrometri. I detta fall blir förhållandet högre.

9. ASKHALT

1. DEFINITION

Askhalten definieras som alla produkter som återstår efter glödgning av den rest som återstår efter indunstning av vinet. Glödgningen utförs så att alla katjoner (med undantag av ammonium) omvandlas till karbonater eller andra vattenfria oorganiska salter.

2. PRINCIP FÖR METODEN

Vinextraktet glödgas vid en temperatur mellan 500 och 550 °C, till dess att allt organiskt material helt har förbränts (oxiderats).

3. APPARATUR

Kokande vattenbad.

Våg med 0,1 mg noggrannhet.

Värmeplatta eller infraröd förångare.

Elektrisk muffelugn med temperaturreglering.

Exsickator.

Flatbottnad platinaskål, 25 mm hög och 70 mm i diameter.

4. METOD

20 ml vin sugs upp med pipett i en i förväg tarerad platinaskål (tom vikt P0 g). Vinet indunstas över det kokande vattenbadet och resten värms upp på värmeplattan till 200 °C eller under IR-förångaren till förkolning. När ånga inte längre avges placeras skålen i en elektrisk muffelugn med en temperatur på 525 ± 25 °C. Efter 15 minuters förkolning tas skålen ut ur ugnen. Tillsätt 5 ml destillerat vatten, låt indunsta över vattenbadet eller under IR-förångaren och hetta upp resten igen till 525 °C i 10 minuter.

Om förbränningen (oxidationen) av de förkolnade partiklarna inte är fullständig upprepas förfarandet med tvättning av de förkolnade partiklarna, indunstning av vatten och glödgning.

För viner med hög sockerhalt bör några droppar ren vegetabilisk olja tillsättas extraktet före första glödgningen för att förhindra alltför kraftig skumbildning.

Efter avkylning i exsickatorn vägs skålen (P1 g).

Vikten av askan i provet (20 ml) är p = (P1 - P0) g.

5. REDOVISNING AV RESULTATEN

Beräkningsmetod

Askans vikt P i gram per liter anges med två decimaler och uttrycks som P = 50 × p.

10. ASKANS ALKALITET

1. DEFINITION

Askans alkalitet definieras som summan av samtliga katjoner, utom ammonium, som är bundna till vinets organiska syror.

2. PRINCIP FÖR METODEN

Askan löses i en känd (överskotts-) mängd av en het kalibrerad syralösning. Överskottet bestäms genom titrering med metylorange som indikator.

3. REAGENSER OCH APPARATUR

0,05 M svavelsyralösning (H2SO4).

0,1 M natriumlösning (NaOH).

Metylorange, 0,1 % lösning i destillerat vatten.

Kokande vattenbad.

4. METOD

Tillsätt 10 ml 0,05 M svavelsyralösning (3.1) till platinaskålen med askan från 20 ml vin. Placera skålen över det kokande vattenbadet i ca 15 minuter. Rör om resten med en glasstav för att påskynda upplösningen. Tillsätt två droppar metylorangelösning och titrera överskottet av svavelsyra med 0,1 M natriumhydroxid (3.2) till dess att indikatorn slår om till gult.

5. REDOVISNING AV RESULTATEN

Beräkningsmetod

Askans alkalitet, uttryckt i milliekvivalenter per liter med en decimal, erhålls med formeln:

A = 5 (10 - n)

där n ml är den använda volymen 0,1 M natriumhydroxid.

11. KLORIDER

1. PRINCIP

Klorider bestäms direkt i vinet genom potentiometri med hjälp av en Ag/AgCl-elektrod.

2. APPARATUR

pH/mV-meter, graderad i intervall om minst 2mV.

Magnetomrörare.

Ag/AgCl-elektrod med mättad lösning av kaliumnitrat som elektrolyt.

Mikrobyrett, indelad i 1/100 ml.

Kronometer.

3. REAGENSER

Standardkloridlösning: 2,1027 g kaliumklorid, KCl (max. 0,005 % Br), som före användningen torkats i exsickator i flera dagar, späds ut i destillerat vatten till 1 liter. 1 ml av denna lösning innehåller 1 mg Cl-.

Titreringslösning av silvernitrat: 4,7912 g silvernitrat, AgNO3 av analyskvalitet, späds i en 10 % (v/v) alkohollösning till 1 liter. 1 ml av denna lösning motsvarar 1 mg Cl-.

Salpetersyra, minst 65 % renhetsgrad ( ρ20 = 1,40 g/ml).

4. METOD

5,0 ml av standardkloridlösningen mäts upp i ett 150 ml cylindriskt kärl som placeras över en magnetomrörare, späds med destillerat vatten till ca 100 ml och surgörs med 1,0 ml salpetersyra (minst 65 %). Sänk ned elektroden och titrera genom att tillsätta titreringslösningen av silvernitrat med mikrobyretten under måttlig omrörning. Börja med att tillsätta 1,00 ml för de första 4 ml och läs av motsvarande värden i millivolt. Tillsätt nästa 2 ml i fraktioner om 0,20 ml. Fortsätt därefter med att tillsätta lösningen i fraktioner om 1 ml till dess att totalt 10 ml har tillsatts. Vänta ca 30 sekunder efter varje tillsats av lösningen innan motsvarande millivoltvärde läses av. Överför de avlästa värdena till millimeterpapper som funktioner av motsvarande antal milliliter titreringslösning och bestäm ekvivalenspunktens potential utifrån vändpunkten på den kurva som erhålls.

5 ml av standardkloridlösningen mäts upp i ett 150 ml cylindriskt kärl med 95 ml destillerat vatten och 1 ml salpetersyra (minst 65 %). Sänk ned elektroden och titrera under omrörning tills ekvivalenspunktens potential uppnås. Denna bestämning upprepas till dess att det råder god överensstämmelse mellan resultaten. Denna kontroll måste utföras före varje serie kloridbestämningar i proven.

50 ml vin för analys mäts upp i ett 150 ml cylindriskt kärl. Tillsätt 50 ml destillerat vatten och 1 ml salpetersyra (minst 65 %) och titrera enligt förfarandet i 4.2.

5. REDOVISNING AV RESULTATEN

5.1 Beräkningar

Om n anger antalet milliliter av titreringslösningen av silvernitrat blir kloridhalten i den analyserade vätskan

20 × n, uttryckt i milligram Cl per liter, 0,5633 × n, uttryckt i milliekvivalenter per liter, 32,9 × n, uttryckt i milligram natriumklorid per liter.

5.2 Repeterbarhet (r):

r = 1,2 mg Cl/l

r = 0,03 mval/l

r = 2,0 mg NaCl/l.

5.3 Reproducerbarhet (R):

R = 4,1 mg Cl/l

R = 0,12 mval/l

R = 6,8 mg NaCl/l.

Anmärkning: Mycket exakt bestämning Det hänvisas till den fullständiga titreringskurva som erhålls vid bestämning av analysvätskan med silvernitratlösningen. Bestämningens slutpunkt och den exakta volym silvernitrat som används erhålls: Exempel: Mängd AgNO3 titreringslösning E-potential i mV Differens ΔE Sekundär differens ΔΔ E 0 204 4 0,2 208 0 4 0,4 212 2 6 0,6 218 0 6 0,8 224 0 6 1,0 230 2 8 1,2 238 4 12 1,4 250 10 22 1,6 272 22 44 1,8 316 10 34 2,0 350 8 26 2,2 376 6 20 2,4 396 I detta exempel ligger titreringens slutpunkt mellan 1,6 och 1,8 ml. Den största potentialförändringen (ΔE = 44 mV) uppträder i detta intervall. Den mängd titreringslösning av silvernitrat som används för att bestämma kloriderna i provet blir: V = 1,6 + 0,2 22 22 + 10 = 1,74 ml.

a) Mät upp 50 ml av det vin som skall analyseras i ett 150 ml cylindriskt kärl. Tillsätt 50 ml destillerat vatten och 1 ml salpetersyra (minst 65 %). Titrera med silvernitratlösningen och tillsätt 0,5 ml i taget. Notera den motsvarande potentialen i millivolt. Från den första titreringen avläses den ungefärliga mängd silvernitrat som behövs.

b) Inled bestämningen igen under samma betingelser. Börja med att tillsätta 0,5 ml titreringslösning i taget, till dess att den tillsatta volymen är 1,5-2 ml mindre än den volym som bestäms enligt a. Fortsätt med att tillsätta lösningen, först med 0,2 ml och därefter 0,5 ml i taget, bortom den ungefärligt avlästa ekvivalenspunkten.

antingen genom att kurvan ritas och ekvivalenspunkten bestäms,

eller med följande formel: V = V′ + Δ Vi ΔΔ E 1 ΔΔ E 1 + ΔΔ E 2 där

V = titreringslösningens volym vid ekvivalenspunkten,

V′ = titreringslösningens volym före den största potentialförändringen,

ΔVi = konstant ökning av titreringslösningens volym, dvs. 0,2 ml,

ΔΔE1 = sekundär potentialskillnad före den största potentialförändringen,

ΔΔE2 = sekundär potentialskillnad efter den största potentialförändringen.

12. SULFATER

1. PRINCIP

1.1 Referensmetod

Utfällning av bariumsulfat och vägning. Det bariumfosfat som fällts ut under samma betingelser avlägsnas genom tvättning av fällningen i saltsyra.

För must och viner med höga halter av svaveldioxid rekommenderas föregående avsvavling genom kokning i ett lufttätt kärl.

1.2 Snabb analysmetod

Klassificering av viner i kategorier med den så kallade gränsmetoden som baseras på utfällning av bariumsulfat med en titreringslösning av bariumjoner.

2. REFERENSMETOD

2.1 Reagenser

2 M saltsyrelösning.

Bariumkloridlösning av 200 g/l BaCl2, 2 H2O.

2.2 Metod

2.2.1 Allmän metod:

Mät upp 40 ml av analysprovet i ett 50 ml centrifugrör. Tillsätt 2 ml 2 M saltsyra och 2 ml bariumkloridlösning, 200 g/l. Rör om med en glasstav. Skölj staven med lite destillerat vatten och låt lösningen stå i fem minuter. Centrifugera i fem minuter, varefter centrifugatet dekanteras försiktigt.

Därefter tvättas bariumsulfatfällningen på följande sätt: tillsätt 10 ml 2 M saltsyra, slamma upp fällningen och centrifugera i fem minuter. Dekantera försiktigt centrifugatet. Upprepa tvättningen två gånger under samma betingelser med 15 ml destillerat vatten varje gång.

Överför fällningen kvantitativt genom sköljning med destillerat vatten till en tarerad platinakapsel. Placera över ett vattenbad vid 100 °C till dess att fullständig indunstning skett. Den torkade fällningen kalcineras flera gånger kortvarigt över en låga tills en vit rest erhålls. Låt svalna i exsickator och väg.

Den erhållna massan i mg av bariumsulfatet betecknas m.

Specialmetod: svavlad must och svavlat vin med hög svaveldioxidhalt.

Svaveldioxiden avlägsnas först.

Mät upp 25 ml vatten och 1 ml ren saltsyra ( ρ20 = 1,15 - 1,18 g/ml) i en 500 ml konisk kolv med dropptratt och utloppsrör. Koka lösningen för att avlägsna luften och tillsätt 100 ml vin genom dropptratten. Fortsätt att koka till dess att vätskevolymen i kolven har reducerats till ca 75 ml och överför den kvantitativt efter kylning till en 100 ml mätkolv. Fyll upp till märket med vatten. Bestäm sulfaterna i ett prov på 40 ml enligt 2.2.1 ovan

2.3 Redovisning av resultaten

2.3.1 Beräkningar

Sulfathalten, uttryckt i milligram per liter kaliumsulfat, K2SO4, är:

18,67 × m

Sulfathalten i must eller vin uttrycks i milligram per liter kaliumsulfat, utan några decimaler.

2.3.2 Repeterbarhet

upp till 1000 mg/l: r = 27 mg/l

ca 1500 mg/l: r = 41 mg/l

2.3.3 Reproducerbarhet

upp till 1000 mg/l: R = 51 mg/l

ca 1500 mg/l: R = 81 mg/l

3. SNABB ANALYSMETOD

3.1 Reagenser

Titreringslösning av bariumklorid

2,804 g bariumklorid, BaCl2, 2 H2O och 10 ml saltsyra ( ρ20 = 1,15-1,18 g/ml) löses i tillräckligt mycket vatten för att ge 1 liter lösning. 1 ml av denna lösning fäller en mängd sulfatjoner motsvarande 2 mg kaliumsulfat.

Svavelsyra (ρ20 = 1,84 g/ml), 1/10 (w/v)-lösning.

3.2 Metod

Mät upp 10 ml must eller vin i tre provrör. Tillsätt 3,5; 5 respektive 10 ml av bariumkloridlösningen till rör 1, 2 och 3. Skaka om och låt koka upp. Låt stå i 1-2 timmar. Vätskan i rören dekanteras, filtreras och delas i två delar. Till den ena delen tillsätts ett flertal droppar av den spädda svavelsyralösningen, till den andra några droppar bariumkloridlösning. Notera om vätskan i de olika rören är klar eller grumlig. Observationerna tolkas enligt tabellen nedan.

Vin Bariumklorid Filtrerat vin + Spädd svavelsyra Bariumkloridlösning Första analys (ml) (ml) grumlig klar 10 3,5 (mindre än 0,7g K2SO4/l) grumlig klar (mer än 0,7 g K2SO4/l) Andra analys 10 5 grumlig klar (mindre än 1 g K2SO4/l) grumlig klar (mer än 1 g K2SO4/l) Tredje analys 10 10 grumlig klar (mindre än 2 g K2SO4/l) grumlig klar (mer än 2 g K2SO4/l)

13. TOTAL SYRAHALT

1. DEFINITION

Vinets totala syrahalt är summan av dess titrerbara syror när en alkalisk standardlösning tillsätts så att vinets pH blir 7.

Koldioxid ingår inte i den totala syrahalten.

2. PRINCIP FÖR METODEN

Potentiometrisk titrering eller titrering med bromtymolblått som indikator och jämförelse med färgstandard.

3. REAGENSER

Buffertlösning pH 7,00:

monokaliumfosfat (KH2PO4): 107,3 g

1 M natriumhydroxidlösning (NaOH): 500 ml

vatten till: 1000 ml

Alternativt kan färdiga buffertlösningar som finns i handeln användas.

0,1 M natriumhydroxidlösning (NaOH).

4 g/l indikatorlösning av bromtymolblått:

bromtymolblått (C27H28Br2O5S) … 4 g neutral etanol, 96 % vol. … 200 ml Lös upp och tillsätt CO2-fritt vatten … 200 ml 1 M natriumhydroxidlösning i en mängd som är tillräcklig för att blågrön färg skall uppträda (pH 7) ca … 7,5 ml vatten till … 1000 ml

4. APPARATUR

Vattensug.

500 ml vakuumsugkolv.

Potentiometer med skalindelning i pH-enheter och med elektroder. Glaselektroden skall förvaras i destillerat vatten. Elektroden med kalomelmättad kaliumklorid skall förvaras i mättad kaliumkloridlösning. Oftast används en kombinerad elektrod, som skall förvaras i destillerat vatten.

Mätglas på 50 ml (vin) resp. 100 ml (renad koncentrerad must).

5. METOD

5.1 Beredning av provet

5.1.1 Vin:

Avlägsna koldioxiden. Häll ca 50 ml av vinet i en vakuumsugkolv. Sug med vattensugen i 1-2 minuter under omskakning.

5.1.2 Renad koncentrerad must:

Häll i 200 g noggrant uppvägd renad koncentrerad must i en 500 ml mätkolv. Fyll upp till märket med vatten. Homogenisera blandningen.

5.2 Potentiometrisk titrering

5.2.1 Kalibrering av pH-mätare

Kalibrering av pH-mätaren görs vid 20 °C med buffertlösning med pH 7,00 vid 20 °C enligt tillverkarens anvisningar.

5.2.2 Mätmetod

Häll ett prov, berett som i 5.1, på 10 ml för vin och 50 ml för renad koncentrerad must i en mätcylinder (4.4). Tillsätt ca 10 ml destillerat vatten och därefter 0,1 M natriumhydroxidlösning (3.2) från byretten, till dess att pH är 7 vid 20 °C. Natriumhydroxiden skall tillsättas långsamt under kontinuerlig omrörning av lösningen. Den tillsatta mängden milliliter 0,1 M NaOH betecknas n.

5.3 Titrering med indikator (bromtymolblått)

5.3.1 Förberedande analys: färgbestämning

Häll 25 ml kokt destillerat vatten, 1 ml lösning av bromtymolblått (3.3) och ett prov, berett enligt 5.1, på 10 ml för vin och 50 ml för renad koncentrerad must i en mätcylinder (4.4). Tillsätt 0,1 M natriumhydroxidlösningen (3.2), till dess att färgen slår om till blågrönt. Tillsätt därefter 5 ml av buffertlösningen med pH 7 (3.1).

5.3.2 Bestämning

Häll 30 ml kokt destillerat vatten, 1 ml lösning av bromtymolblått (3.3) och ett prov, berett enligt 5.1, på 10 ml för vin och 50 ml för renad koncentrerad must i en mätcylinder (4.4). Tillsätt 0,1 M natriumhydroxidlösning (3.2), till dess att samma färg som i det förberedande provet (5.3.1) uppträder. Den tillsatta mängden natriumhydroxid betecknas n.

6. REDOVISNING AV RESULTATEN

6.1 Beräkningsmetod

6.1.1 Vin

Den totala syrahalten uttryckt i milliekvivalenter per liter blir:

A = 10n

Halten anges med en decimal.

Den totala syrahalten uttryckt i gram vinsyra per liter blir:

A' = 0,075 × A

Halten anges med en decimal.

6.1.2 Renad koncentrerad must

Den totala syrahalten uttryckt i milliekvivalenter per kg för renad koncentrerad must blir: a = 5 × n.

Den totala syrahalten uttryckt i milliekvivalenter per kg totalsocker blir: A = 500 × n P Halten anges med en decimal.

P = halten i % (w/w) av totalsocker.

6.2 Repeterbarhet (r) för titrering med indikatorn

r = 0,9 mval/l

r = 0,07 g vinsyra/l

för vita viner, roséviner och röda viner.

6.3 Reproducerbarhet (R) för titrering med indikatorn (5.3)

För vitviner och rosévin:

R = 3,6 mval/l

R = 0,3 g vinsyra/l

För rödvin:

R = 5,1 mval/l

R = 0,4 g vinsyra/l

14. FLYKTIGA SYROR

1. DEFINITION

De flyktiga syrorna består av de syror i ättiksyraserien som förekommer i vin i fri form och som salt.

2. PRINCIP FÖR METODEN

Titrering av flyktiga syror, som har separerats från vinet genom ångdestillation och titrering av destillatet.

Koldioxid avlägsnas först från vinet.

Syran i fri och bunden svaveldioxid som destilleras på så sätt skall dras ifrån destillatets syrahalt.

Eventuell sorbinsyra som har tillsatts vinet skall också dras ifrån.

Anmärkning:

En del av den salicylsyra som används i vissa länder för att stabilisera viner före analys återfinns i destillatet. Denna måste bestämmas och dras ifrån syrahalten. Bestämningsmetoden anges i punkt 7 i detta kapitel.

3. REAGENSER

Kristalliserad vinsyra (C4H6O6).

0,1 M natriumhydroxidlösning (NaOH).

1 % fenolftalinlösning i 96 % vol. neutral alkohol.

Saltsyra (ρ20 = 1,18-1,19 g/ml), spädd 1:4 (v/v).

0,005 M jodlösning (I2).

Kristalliserad kaliumjodid (KI).

Stärkelselösning 5 g/l.

Blanda 5 g stärkelse med ca 500 ml vatten. Koka upp under omrörning och koka i tio minuter. Tillsätt 200 g natriumklorid, kyl och späd till 1 liter.

Mättad lösning av natriumborat (Na2B4O7, 10H2O), dvs. ca 55 g/l vid 20 °C.

4. APPARATUR

Ångdestillationsapparat bestående av

1) Ånggenerator. Ångan skall vara fri från koldioxid.

2) Kolv med ångrör.

3) Destillationskolonn.

4) Kylare. Apparaturen skall uppfylla följande tre krav:

a) Häll 20 ml kokt vatten i kolven. Samla upp 250 ml av destillatet och tillsätt 0,1 ml 0,1 M natriumhydroxidlösning (3.2) och två droppar av fenolftalinlösningen (3.3). Rosafärgningen skall vara stabil i minst tio sekunder (dvs. ångan skall vara fri från koldioxid).

b) Häll 20 ml av en 0,1 M ättiksyralösning i kolven. Samla upp 250 ml av destillatet. Titrera med 0,1 M natriumhydroxidlösning (3.2). Den använda volymen skall vara minst 19,9 ml (dvs. minst 99,5 % av ättiksyran skall avlägsnas med ångan).

c) Häll 20 ml av 1 M mjölksyralösning i kolven. Samla upp 250 ml av destillatet och titrera syran med 0,1 M natriumhydroxidlösning (3.2). Den volym natriumhydroxidlösning som tillsätts skall vara mindre än eller lika med 1,0 ml (dvs. inte mer än 0,5 % mjölksyra destilleras). Apparatur och metoder som klarar dessa prov med godkänt resultat uppfyller de officiella internationella apparat- och metodkraven.

Vattenpump.

Vakuumkolv.

5. METOD

Beredning av provet: avlägsna koldioxiden.

Häll ca 50 ml vin i en vakuumkolv. Sug med vattenpumpen i 1-2 minuter under ständig omrörning.

5.2 Ångdestillation

20 ml vin från vilket koldioxiden avlägsnats enligt 5.1 hälls i kolven. Tillsätt ca 0,5 g vinsyra (3.1). Samla upp minst 250 ml av destillatet.

5.3 Titrering

Titrera med 0,1 M natriumhydroxidlösning (3.2) som innehåller två droppar fenolftalin (3.3) som indikator. Den använda mängden natriumhydroxid betecknas n ml.

Tillsätt fyra droppar saltsyra, spädd 1:4 (3.4), 2 ml stärkelselösning (3.7) och några kristaller kaliumjodid (3.6). Titrera den fria svaveldioxiden med 0,005 M jodlösning (3.5). Den använda mängden betecknas n′.

Tillsätt den mättade natriumboratlösningen (3.8) till dess att den rosa färgen kommer tillbaka. Titrera den bundna svaveldioxiden med 0,005 M jodlösning (3.5). Den använda volymen betecknas n″.

6. REDOVISNING AV RESULTATEN

6.1 Beräkningsmetod

Halten av flyktiga syror, uttryckt i milliekvivalenter/liter med en decimal, blir:

A = 5 (n - 0,1 n′ - 0,05 n″).

Halten av flyktiga syror, uttryckt i gram ättiksyra/liter med två decimaler, blir:

0,300 (n - 0,1 n′ - 0,05 n″).

6.2 Repeterbarhet (r)

r = 0,7 mval/liter

r = 0,04 g ättiksyra/liter

6.3 Reproducerbarhet (R)

R = 1,3 mval/liter

R = 0,08 g ättiksyra/liter

6.4 Vin tillsatt med sorbinsyra

Eftersom 96 % av sorbinsyran ångsdestilleras vid en destillatvolym på 250 ml måste denna syra dras ifrån de flyktiga syrorna. 100 mg sorbinsyra motsvarar en syrahalt av 0,89 milliekvivalenter eller 0,053 g ättiksyra; halten av sorbinsyra i mg/l bestäms med en annan metod.

7. BESTÄMNING AV SALICYLSYRA SOM FÖLJER MED DESTILLATET FRÅN FLYKTIGA SYROR

7.1 Princip

Efter bestämning av de flyktiga syrorna och korrektion för svaveldioxid påvisas förekomsten av salicylsyra efter surgöring av att provet lilafärgas när ett järn(III)salt tillsätts.

Bestämning av salicylsyra som följer med destillatet från de flyktiga syrorna utförs på ett andra destillat med samma volym som den på vilken halten av flyktiga syror bestämdes. I detta destillat bestäms salicylsyran med en jämförande kolorimetrisk metod. Den dras ifrån syrahalten i destillatet av flyktiga syror.

7.2 Reagenser

Saltsyra (HCl) (ρ20 = 1,18 - 1,19 g/l).

Natriumtiosulfat (Na2S2O3, 5H2O) i en 0,1 M lösning.

10 % (w/v) lösning av järn(III)ammoniumsulfat (Fe2(SO4)3. (NH4)2SO4 × 24H2O).

0,01 M lösning av natriumsalicylat. Lösningen skall innehålla 1,60 g natriumsalicylat (NaC7H5O3) per liter.

7.3 Metod

7.3.1 Identifiering av salicylsyra i destillatet av flyktiga syror

Omedelbart efter bestämning av de flyktiga syrorna och korrektion för fri och bunden svaveldioxid hälls 0,5 ml saltsyra (7.2.1), 3 ml 0,1 M natriumtiosulfatlösning (7.2.2) och 1 ml järn(III)ammoniumsulfatlösning (7.2.3) i en konisk kolv.

Om destillatet innehåller salicylsyra träder en lila färg fram.

7.3.2 Bestämning av salicylsyrahalten

Destillatets volym markeras på den koniska kolven. Töm och skölj flaskan.

Ett nytt analysprov på 20 ml vin ångdestilleras och destillatet samlas upp i den koniska kolven till märket. Tillsätt 0,3 ml ren saltsyra (7.2.1) och 1 ml järn(III)ammoniumsulfatlösning (7.2.3). Innehållet i kolven lilafärgas.

Häll i destillerat vatten i en konisk kolv som är identisk med den kolv på vilken volymen har markerats upp till samma nivå som destillatnivån. Tillsätt 0,3 ml ren saltsyra (7.2.1) och 1 ml järn(III)ammoniumsulfatlösning (7.2.3). Natriumsalicylatlösning, 0,01 M (7.2.4), tillsätts via byretten, till dess att lilafärgningen är av samma intensitet som i kolven med vindestillatet.

Den mängd lösning som tillsätts från byretten betecknas n‴.

7.4 Korrektion av flyktiga syror

Dra ifrån volymen 0,1 × n‴ ml från volymen n ml av 0,1 M natriumhydroxidlösning som använts för att titrera destillatets surhetsgrad under bestämningen av de flyktiga syrorna.

15. HALTEN AV ICKE-FLYKTIGA SYROR

1. PRINCIP

Halten av icke-flyktiga syror beräknas som skillnaden mellan den totala syrahalten och halten av flyktiga syror.

2. REDOVISNING AV RESULTATEN

Halten av icke-flyktiga syror uttrycks i:

milliekvivalenter per liter,

gram vinsyra per liter.

16. VINSYRA

1. PRINCIP FÖR METODERNA

1.1 Referensmetod

Vinsyra fälls ut i form av kalcium(±)tartrat och bestäms gravimetriskt. Bestämningen kan kompletteras med volymetrisk bestämning. Utfällningsbetingelserna (pH, total använd volym, koncentrationer av utfällande joner) innebär att kalcium(±)tartrat fälls ut fullständigt, medan kalcium-D(-)-tartrat förblir i lösning.

När metavinsyra har tillsatts vinet måste detta först hydrolyseras eftersom metavinsyra gör att utfällningen av kalcium(±)tartrat blir ofullständig.

1.2 Rutinmetod

Vinsyran separeras med en jonbytarkolonn och bestäms kolorimetriskt i eluatet genom mätning av den röda färg som framträder vid reaktion med vanadinsyra. Eluatet innehåller också mjölksyra och äppelsyra, som dock inte stör analysen.

2. REFERENSMETOD

2.1 Gravimetrisk metod

2.1.1 Reagenser

Kalciumacetatlösning innehållande 10 g kalcium per liter:

Kalciumkarbonat (CaCO3) … 25 g Isättika (CH3COOH) (ρ20 = 1,05 g/ml) … 40 ml Vatten till … 1 l

Kalcium(±)tartrat, kristalliserat: CaC4O6H4. 4H2O:

Häll 20 ml av en lösning av L(+)vinsyra (5 g/l) i en 400 ml bägare. Tillsätt 20 ml av en ammonium D(-)tartratlösning (6,126 g/l) och 6 ml kalciumacetatlösning innehållande 10 g kalcium per liter (2.1.1.1).

Låt utfällning pågå i två timmar. Samla upp fällningen på en degel av sintrat glas med porositeten 4 och tvätta den tre gånger med omkring 30 ml destillerat vatten. Torka till konstant vikt i torkskåp vid 70 °C. Med de reagensmängder som anges ovan erhålls ca 340 mg kristalliserat kalcium(±)tartrat.

Förvara i en flaska med propp.

Fällningslösning (pH 4,75):

— D(-) vinsyra … 122 mg — 25 % (v/v) ammoniumhydroxidlösning (ρ20 = 0,97 g/ml) … 0,3 ml — kalciumacetatlösning (10 g kalcium/l) … 8,8 ml Vatten till … 1000 ml

Lös D(-)vinsyran, tillsätt ammoniumhydroxiden och fyll upp till ca 900 ml. Tillsätt 8,8 ml kalciumacetatlösning (2.1.1), fyll upp till 1 liter och justera pH-värdet till 4,75 med ättiksyra.

Eftersom kalcium(±)tartrat är lätt lösligt i denna lösning tillsätts 5 mg kalcium(±)tartrat per liter. Rör om i 12 timmar och filtrera.

2.1.2 Metod

Vin utan tillsats av metavinsyra

Häll 500 ml av fällningslösningen och 10 ml vin i en 600 ml bägare. Blanda och sätt igång utfällningen genom att gnida kärlets sidor med en glasstav. Låt utfällning pågå i 12 timmar (över natten).

Filtrera vätskan och fällningen genom en vägd degel av sintrat glas med porositeten 4 som placerats på en ren vakuumkolv. Skölj det kärl där fällningen gjordes med filtratet så att alla utfällda partiklar följer med.

Torka till konstant vikt i torkskåp vid 70 °C. Väg. Låt p ange vikten av den mängd kristalliserat kalcium(±)tartrat (CaC4O6H4) som erhålls.

Vin med tillsats av metavinsyra

Vid analys av vin med konstaterad eller misstänkt tillsats av metavinsyra skall syran först hydrolyseras enligt följande:

Häll 10 ml av vinet och 0,4 ml isättika (CH3COOH, ρ20 = 1,05 g/ml) i en 50 ml konisk kolv. Tillslut kolven med en återloppskylare och koka i 30 minuter. Låt svalna och överför sedan lösningen i den koniska kolven till en 600 ml bägare. Skölj kolven två gånger med 5 ml vatten och fortsätt därefter enligt anvisningarna ovan.

Metavinsyran bestäms och inräknas som vinsyra i bestämningsresultatet.

2.1.3 Redovisning av resultaten

En molekyl kalcium(±)tartrat motsvarar en halv molekyl L(+) vinsyra i vinet.

Mängden vinsyra per liter vin, uttryckt i milliekvivalenter, motsvarar 384,5 p.

Mängden anges med en decimal.

Mängden vinsyra per liter vin, uttryckt i gram vinsyra, motsvarar 28,84 p.

Mängden anges med en decimal.

Mängden vinsyra per liter, uttryckt i gram kaliumvätetartrat, motsvarar 36,15 p.

Mängden anges med en decimal.

2.2. Jämförande volymetrisk analys

2.2.1 Reagenser

Saltsyra (HCl) (1:5 v/v) (ρ20 = 1,18-1,19 g/ml)

EDTA-lösning, 0,05 M:

EDTA (etylendiamin-tetraättiksyra-dinatriumsalt: C10H14N2O8Na2, 2H2O) … 18,61 g destillerat vatten till … 1000 ml

Natriumhydroxidlösning, 40 % (w/v):

natriumhydroxid (NaOH) … 40 g destillerat vatten till … 100 ml

Komplexometrisk indikator: 1 % (w/w)

2-hydroxi-1-(2-hydroxi-4-sulfo-1-naftylazo)-3-naftylsyra (C21H14N2O7S, 3H2O) … 1 g vattenfritt natriumsulfat (Na2SO4)… 100 g

2.2.2 Metod

Efter vägning sätts degeln av sintrat glas med kalcium(±)tartratfällningen tillbaka på vakuumkolven och fällningen löses med 10 ml utspädd saltsyra (2.2.1.1). Tvätta degeln med 50 ml destillerat vatten.

Tillsätt 5 ml 40 % natriumhydroxidlösning (2.2.1.3) och ca 30 mg indikator (2.2.1.4). Titrera med 0,05 M EDTA-lösning (2.2.1.2). Det antal ml som används betecknas n.

2.2.3 Redovisning av resultaten

Mängden vinsyra per liter vin, uttryckt i milliekvivalenter, motsvarar 5 n.

Mängden anges med en decimal.

Mängden vinsyra per liter vin, uttryckt i gram vinsyra, motsvarar 0,375 n.

Mängden anges med en decimal.

Mängden vinsyra per liter vin, uttryckt i gram kaliumvätetartrat, motsvarar 0,470 n.

Mängden anges med en decimal.

3. RUTINMETOD

3.1 Reagenser

3.1.1 Vid den inledande behandlingen av vinet

Ättiksyra (CH3COOH, ρ20 = 1,05 g/ml), utspädd till 30 % (v/v).

Kraftigt basisk jonbytarharts (t. ex. anjonbytarharts Merck III, mesh 20 - 50) i acetatform. Bered en suspension av jonbytaren (ca 100 g) i 200 ml 30 % ättiksyra (3.1.1.1). Låt stå i minst 24 timmar före användning. Förvara jonbytarhartsen i 30 % ättiksyra för senare bestämningar.

Ättiksyra (CH3COOH, ρ20 = 1,05 g/ml), utspädd till 0,5 % (v/v).

Natriumsulfatlösning, 7,1 g per 100 ml (0,5 M).

Lös 71 g vattenfritt natriumsulfat (Na2SO4) i destillerat vatten och fyll upp till 1000 ml med destillerat vatten.

3.1.2 Bestämning av vinsyra

Natriumacetatlösning (NaCH3COO) 27 % (w/v):

Lös 270 g vattenfritt natriumacetat (NaCH3COO) i destillerat vatten och fyll upp till 1000 ml.

Vanadinreagens

Lös 10 g ammoniummetavanadat (NH4VO3) i 150 ml 1 M natriumhydroxidlösning (3.1.2.10). Överför lösningen till en 500 ml mätkolv och tillsätt 200 ml av den 27-procentiga natriumacetatlösningen (3.1.2.1). Fyll upp till 500 ml med destillerat vatten.

1 M H2SO4-lösning.

0,5 M H2SO4-lösning.

0,05 M H2SO4-lösning.

0,05 M perjodsyralösning:

Häll 10,696 natriumperjodat, NaIO4, och 50 ml 0,5 M svavelsyra (3.1.2.4) i en 1000 ml mätkolv och fyll upp till 1000 ml med destillerat vatten.

Glycerollösning, 10 % (w/v):

Häll 10 g glycerol, C3H8O3; i en 100 ml mätkolv och fyll upp till 100 ml med destillerat vatten.

Natriumsulfatlösning, 7,1 g per 100 ml (se 3.1.1.4).

Vinsyralösning, 1 g/l:

Häll 0,5 g vinsyra och 6,66 ml 1 M natriumhydroxidlösning (3.1.2.10) i en 500 ml mätkolv och fyll upp till 500 ml med 7,1 % natriumsulfatlösning (3.1.1.4).

Natriumhydroxidlösning, NaOH, 1 M.

3.2 Apparatur

Glaskolonn, ca 300 mm lång, innerdiameter 10-11 mm, med en avtappningskran.

Spektrofotometer för bestämning av absorbansen vid en väglängd om 490 nm och kuvetter med 10 mm optisk våglängd.

3.3 Metod

3.3.1 Beredning av jonbytarkolonn

Placera en propp av glasull i glaskolonnen ovanför avtappningskranen (3.2.1). Vät proppen med destillerat vatten. Häll 10 ml av suspensionen av jonbytarharts i acetatform (3.1.1.2) i kolonnen. Låt jonbytaren sedimentera. Placera en propp av glasull ovanpå jonbytaren (för att förhindra att denna slammas upp igen vid påföljande tvättningar).

Jonbytaren får endast användas en gång.

3.3.2 Separation av organiska syror

Öppna avtappningskranen och låt ättiksyralösningen rinna ner längs kolonnen till ca 2-3 mm från den övre glasullproppen.

Tillsätt 10 ml av den 0,5-procentiga ättiksyralösningen (3.1.1.3) och låt vätskan rinna ut igen till samma nivå som i föregående steg. Upprepa tvättningen ytterligare fyra gånger.

Efter den sista tvättningen stängs kranen och 10 ml av vinet eller musten hälls över jonbytarhartsen. Låt vätskan rinna i med en droppe i taget (1 droppe/sekund i genomsnitt) och avbryt när nivån ligger precis ovanför jonbytaren. Tillsätt ytterligare 10 ml av den 0,5-procentiga ättiksyralösningen (3.1.1.3) till kolonnen, låt rinna ut med samma hastighet som tidigare och tvätta därefter sju gånger på samma sätt med 10 ml vatten varje gång. Under den sista tvättningen stängs kranen så snart vätskenivån är precis ovanför den övre glasullproppen.

Eluera de syror som absorberats på jonbytaren med en 7,1-procentig lösning av natriumsulfat (3.1.1.4). Samla upp eluatet i en 100 ml graderad mätkolv upp till det kalibrerade märket.

3.3.3 Bestämning av vinsyra

Vin utan tillsats av metavinsyra

Häll 20 ml av eluatet i två koniska kolvar, a och b.

Använd kolv a för bestämning och kolv b, i vilken vinsyran destruerats av perjodsyra, för bestämning av nollvärdet.

Häll i kolv a:

2 ml M H2SO4 (3.1.2.3),

5 ml 0,05 M H2SO4 (3.1.2.5),

1 ml 10 % glycerol (3.1.2.7).

Häll i kolv b:

2 ml M H2SO4 (3.1.2.3),

5 ml 0,05 M perjodsyralösning (3.1.2.6),

Tillsätt efter 15 minuter:

1 ml 10 % glycerol (3.1.2.7) för att destruera överskottet av perjodsyra.

Vänta två minuter.

Tillsätt med pipett under omrörning 5 ml vanadinreagens (3.1.2.2), först till kolv b och omedelbart därefter till kolv a. Starta ett stoppur omedelbart och häll innehållet i kolvarna a och b i spektrofotometerkuvetterna. Läs efter 90 sekunder av absorbansen vid 490 nm hos vätskan i kolv a (bestämning) i förhållande till vätska b (nollvärde).

Lösningar med hög halt av vinsyra med för hög absorbans bör spädas med 7,1-procentig natriumsulfat och därefter bestämmas enligt ovan.

Vin utan tillsats av metavinsyra

Vid analys av vin med konstaterad eller misstänkt tillsats av metavinsyra skall syran först hydrolyseras enligt anvisningarna för referensmetoden.

Efter kylning hälls innehållet i den koniska kolven i jonbytarkolonnen, varefter sköljvatten hälls i (5 ml × 2). Fortsätt enligt anvisningarna ovan.

Metavinsyran räknas in i den totala syrahalten i slutresultatet av bestämningen.

3.3.4 Utskrift av kalibreringskurva

Pipettera 10, 20, 30, 40 resp. 50 ml av 1 g/l vinsyralösningen (3.1.2.9) i 100 ml graderade mätkolvar och fyll upp till 100 ml med den 7,1-procentiga natriumsulfatlösningen (3.1.1.4). Dessa lösningars koncentrationer motsvarar vineluat med en vinsyrahalt av 1, 2, 3, 4 resp. 5 g/l.

Häll 20 ml av lösningarna i två koniska kolvar, a och b, och fortsätt enligt anvisningarna ovan för vineluatet.

Kurvan över dessa lösningars absorbanser som en funktion av deras vinsyrahalt blir en rak linje som böjer av något i närheten av nollpunkten. Vid behov ritas denna del av kurvan med större noggrannhet på grundval av bestämningar utförda på lösningar med exakt kända koncentrationer under 1,0 g/l.

3.3.5 Redovisning av resultaten

Den för eluatet bestämda absorbansen framgår av kurvan och anger halten av vinsyra i vinet i gram per liter.

Resultatet anges med en decimal.

17. CITRONSYRA

1. PRINCIP FÖR METODEN

Citronsyra omvandlas till oxalacetat och acetat i en reaktion som katalyseras av citratlyas (CL):

citrat oxalacetat + acetat

I närvaro av malatdehydrogenas (MDH) och laktatdehydrogenas (LDH) reduceras oxalacetatet och dess dekarbolyxeringsderivat, pyruvat, till L-malat och L-laktat med hjälp av reducerad nikotinamid-adenin-dinukleotid (NADH):

oxalacetat + NADH + H+ L-malat + NAD+

pyruvat + NADH + H+ L-laktat + NAD+

Mängden NADH som oxideras till NAD+ i dessa reaktioner är proportionerlig mot den mängd citrat som finns närvarande. Oxidationen av NADH bestäms med hjälp av den resulterande absorbansminskningen vid 340 nm våglängd.

2. REAGENSER

Buffertlösning, pH 7,8

(0,51 M glycylglycin, pH = 7,8, Zn2+: 0,6 × 10-3 M):

Lös 7,13 g glycylglycin i ca 70 ml dubbeldestillerat vatten.

Justera pH till 7,8 med ca 13 ml 5 M natriumhydroxidlösning, tillsätt 10 ml zinkkloridlösning (80 mg ZnCl2 i 100 ml H2O) och fyll upp till 100 ml med dubbeldestillerat vatten.

Denna tosning är hällbar i minst fyra veckor vid 4 °C.

Reducerad nikotinamid-adenin-dinukleotidlösning (NADH) (ca 6. 10-3M): lös 30 mg NADH och 60 mg NaHCO3 i 6 ml dubbeldestillerat vatten.

Lösning av malathydrogenas/laktathydrogenas (MDH/LDH, 0,5 mg MDH/ml, 2,5 mg LDH/ml): blanda 0,1 ml MDH (5 mg MDH/ml), 0,4 ml ammoniumsulfatlösning (3,2 M) och 0,5 ml LDH (5 mg/ml). Denna suspension är hållbar i minst ett år vid 4 °C.

Citratlyas (CL, 5 mg protein/ml): lös 168 mg lyofilisat i 1 ml iskallt vatten. Denna lösning är hållbar i minst en vecka vid 4 °C och i minst fyra veckor i fruset tillstånd.

Enzymaktiviteten bör kontrolleras före bestämningen.

Polyvinylpolypyrrolidon (PVPP)

Anmärkning: Samtliga ovannämnda reagenser finns i handeln.

3. APPARATUR

Spektrofotometer för bestämning vid 340 nm, den våglängd där NADH har maximal absorption.

Om denna utrustning saknas, kan en spektrofotometer med diskontinuerligt spektrum för bestämning vid 334 nm eller 365 nm användas. Eftersom absoluta absorbansbestämningar skall utföras (dvs. kalibreringskurvor används inte, utan bestämning görs med hjälp av extinktionskoefficienten för NADH), måste apparatens våglängdsskalor och absorption kontrolleras.

Glaskuvetter med en optisk vågängd av 1 cm eller engångskuvetter.

Mikropipetter för pipettering av volymer mellan 0,02 och 2 ml.

4. BEREDNING AV PROVET

Citratbestämning utförs normalt direkt i vinet utan föregående avfärgning och spädning, under förutsättning att citronsyrahalten är lägre än 400 mg/l. Om så inte är fallet späds vinet till dess att citrathalten är mellan 20 och 400 mg/l (dvs. mellan 5 och 80 μg citrat i provet).

För röda viner med höga halter av fenolföreningar rekommenderas förbehandling med PVPP:

Slamma upp ca 0,2 g PVPP i vatten och låt stå i 15 minuter. Filtrera genom ett veckfilter.

Häll 10 ml vin i en 50 ml konisk kolv, tillsätt fuktad PVPP som skrapats av från filtret med en spatel. Skaka om i två till tre minuter. Filtrera.

5. METOD

Spektrofotometern ställs in på våglängden 340 nm. Bestämning sker med 1 cm kuvetter med luft som nollabsorbansstandard (referens, ingen kuvett i strålgången). Sätt följande till 1 cm kuvetterna:

Referenskuvett (ml) Provkuvett (ml) Lösning 2.1 1,00 1,00 Lösning 2.2 0,10 0,10 Prov — 0,20 Dubbeldestillerat vatten 2,00 1,80 Lösning 2.3 0,02 0,02

Blanda och läs av absorbansen för lösningarna i referens- och provkuvetterna (A1) efter ca fem minuter.

Tillsätt:

Lösning 2.4 0,02 ml 0,02 ml

Blanda och vänta till dess att reaktionen är avslutad (ca fem minuter) och läs av absorbansen för lösningarna i referens- och provkuvetterna (A2).

Beräkna absorbansdifferensen (A2 - A1) för referens- och provkuvetterna, ΔAR och ΔAP.

Beräkna slutligen skillnaden mellan dessa differenser:

ΔA = ΔAD - ΔAT

Anmärkning: Den tid som krävs för enzymerna att verka kan variera mellan serierna och värdet ovan anges endast som vägledning. Värdet bör bestämmas för varje serie.

6. REDOVISNING AV RESULTATEN

Citronsyrahalten anges i milligram per liter och avrundas till närmaste heltal.

6.1 Beräkningsmetod

Nedanstående allmänna formel används för beräkning av koncentrationen i mg/l:

C = V × PM ε × d × v × Δ A

där

V = provlösningens volym i ml (här 3,14 ml)

v = provvolymen i ml (här 0,2 ml)

PM = molekylvikten av den substans som skall bestämmas (för vattenfri citronsyra M = 192,1)

d = kuvettens optiska väglängd i cm (här 1 cm)

ε = NADHs absorptionskoefficient (vid 340 nm, ε = 6,3 mmol-1 × 1 × cm-1)

så att

C = 479 × ΔA

Om lösningen har spätts i samband med beredningen multipliceras resultatet med spädningsfaktorn.

Anmärkning:

Vid 334 nm: C = 488 × ΔA (ε = 6,2 mmol-1 × 1 × cm-1)

Vid 365 nm: C = 887 × ΔA (ε = 3,4 mmol-1 × 1 × cm-1)

6.2 Repeterbarhet (r)

Citronsyrahalt under 400 mg/l: r = 14 mg/l.

Citronsyrahalt över 400 mg/l: r = 28 mg/l.

6.3 Reproducerbarhet (R)

Citronsyrahalt under 400 mg/l: R = 39 mg/l.

Citronsyrahalt över 400 mg/l: R = 65 mg/l.

18. MJÖLKSYRA

1. PRINCIP FÖR METODEN

All mjölksyra (L-laktat och D-laktat) oxideras till pyruvat i närvaro av nikotinamid-adenin-dinukleotid (NAD) i en reaktion som katalyseras av L-laktatdehydrogenas (L-LDH) och D-laktatdehydrogenas (D-LDH).

Reaktionsjämvikten ligger vanligtvis närmare laktat. Om pyruvatet avlägsnas från reaktionsblandningen förflyttas reaktionsjämvikten mot bildning av pyruvat.

I närvaro av L-glutamat omvandlas pyruvat till L-alanin i en reaktion som katalyseras av glutamatpyruvattransaminas (GPT):

1) L-laktat + NAD+ pyruvat + NADH + H+

2) D-laktat + NAD+ pyruvat + NADH + H+

3) Pyruvat + L-glutamat L-alanin + α-ketoglutarat

Den mängd NADH som bildas, bestämd på grundval av absorbansökningen vid 340 nm våglängd, är proportionell mot den ursprungliga mängden laktat.

Anmärkning:

L-mjölksyra kan bestämmas separat med reaktionerna 1 och 3.

D-mjölksyra kan bestämmas separat med reaktionerna 2 och 3.

1.2 Rutinmetod

Mjölksyra som separeras i en jonbytarkolonn oxideras till etanal och bestäms kolorimetriskt efter reaktion med natriumnitroprussid och piperidin.

2. REFERENSMETOD

2.1 Reagenser

Buffertlösning, pH 10 (glycylglycin 0,6 mol/l, L-glutamat 0,1 mol/l).

Lös 4,75 g glycylglycin och 0,88 g L-glutaminsyra i ca 50 ml dubbeldestillerat vatten. Justera pH till 10 med några ml 10 M natriumhydroxid och fyll upp till 60 ml med dubbeldestillerat vatten.

Denna lösning är hållbar i minst 12 veckor vid 4 °C.

Nikotinamid-adenin-dinukleotidlösning (NAD), ca 40 × 10-3 M. Lös 900 mg NAD i 30 ml dubbeldestillerat vatten. Lösningen är hållbar i minst fyra veckor vid 4 °C.

Glutamat-pyruvat-transaminas-suspension (GPT), 20 mg/ml. Suspensionen är hållbar i minst ett år vid 4 °C.

L-laktatdehydrogenas-suspension (L-LDH), 5 mg/ml. Suspensionen är hållbar i minst ett år vid 4 °C.

D-laktatdehydrogenas-suspension (D-LDH), 5 mg/ml. Suspensionen är hållbar i minst ett år vid 4 °C.

Enzymaktiviteten bör kontrolleras före bestämningen.

Anmärkning: Samtliga reagenser finns i handeln.

2.2 Apparatur

Spektrofotometer för bestämning vid 340 nm, den våglängd där NADH har maximal absorption.

I avsaknad av sådan apparatur kan en spektrofotometer med diskontinuerligt spektrum för bestämning vid 334 nm eller 365 nm användas.

Eftersom absoluta absorbansbestämningar skall utföras (dvs. kalibreringskurvor används inte, utan bestämning görs med hjälp av extinktionskoefficienten för NADH), måste apparatens våglängdsskalor och absorptionsvärden kontrolleras.

Glaskuvetter med en optisk väglängd av 1 cm eller engångskuvetter.

Mikropipetter för pipettering av provvolymer mellan 0,02 och 2 ml.

2.3 Beredning av provet

Ingen glasdel i apparaturen som kommer i kontakt med reaktionsblandningen får vidröras med fingrarna eftersom detta kan leda till en ökning av halten av L-mjölksyra, vilket leder till ett felaktigt provresultat.

Laktatbestämning utförs normalt direkt i vinet utan föregående avfärgning och spädning, förutsatt att mjölksyrahalten är lägre än 100 mg/l. Om mjölksyrahalten ligger mellan:

100 mg/l och 1 g/l, späd 1:10 med dubbeldestillerat vatten,

1 g/l och 2,5 g/l, späd 1:25 med dubbeldestillerat vatten,

2,5 g/l och 5 g/l, späd 1:50 med dubbeldestillerat vatten.

2.4 Metod

2.4.1 Bestämning av den totala halten av mjölksyra

Buffertlösningen skall ha en temperatur mellan 20 och 25 °C innan bestämningen utförs.

Med spektrofotometern inställd på 340 nm bestäms absorbansen med kuvetter med en optisk väglängd av 1 cm. Bestämningen görs i förhållande till luft (absorbans 0, ingen kuvett i strålgången) eller i förhållande till vatten.

Häll följande i kuvetter med 1 cm optisk väglängd:

Referenskuvett (ml) Provkuvett (ml) Lösning 2.1.1 1,00 1,00 Lösning 2.1.2 0,20 0,20 Dubbeldestillerat vatten 1,00 0,80 Suspension 2.1.3 0,02 0,02 Prov — 0,20

Blanda om med en glas- eller plaststav som är platt i ena änden och läs av absorbansen för lösningarna i referens- och provkuvetterna (A1) efter ca fem minuter.

Tillsätt 0,02 ml av lösning 2.1.4 och 0,05 ml av lösning 2.1.5. Homogenisera och vänta tills reaktionen är avslutad (ca 30 minuter). Läs av absorbansen för lösningarna i referens- och provkuvetterna (A2).

Beräkna absorbansdifferensen (A2 - A1) för referens- och provkuvetterna.

Beräkna slutligen skillnaden mellan dessa differenser:

ΔA = ΔAP - ΔAR

2.4.2 Bestämning av L-mjölksyra och D-mjölksyra

Bestämning av L-mjölksyra eller D-mjölksyra kan utföras separat genom tillämpning av samma förfarande som ovan för den totala halten av mjölksyra, fram till bestämning av A1. Fortsätt därefter enligt följande anvisningar.

Tillsätt 0,02 ml av lösning 2.1.4. Homogenisera och vänta tills reaktionen är avslutad (ca 20 minuter). Läs av absorbansen för lösningarna i referens- och provkuvetterna (A2).

Tillsätt 0,05 ml av lösning 2.1.5. Homogenisera och vänta tills reaktionen är avslutad (ca 30 minuter). Läs av absorbansen för lösningarna i referens- och provkuvetterna (A3).

Beräkna absorbansdifferensen (A2 - A1) för L-mjölksyra och (A3 - A2) för D-mjölksyra mellan absorbansen för lösningarna i referens- och provkuvetterna.

Beräkna slutligen skillnaden mellan dessa differenser:

ΔA = ΔAP - ΔAR

Anmärkning: Den tid som åtgår för att enzymerna skall verka kan variera mellan serierna och värdet ovan anges endast som vägledning. Värdet bör bestämmas för varje serie. När bestämning görs av enbart L-mjölksyra kan inkubationstiden minskas till 10 minuter.

2.5 Redovisning av resultaten

Mjölksyrahalten anges i gram per liter med en decimal.

2.5.1 Beräkningsmetod

Nedanstående allmänna formel används för beräkning av koncentrationen i g/l:

C = V × PM ε × d × v × 1000 × Δ A

där

V = provlösningens volym i ml (V = 2,24 ml för L-mjölksyra, V = 2,29 ml för D-mjölksyra och den totala halten av mjölksyra)

v = provvolymen i ml (här 0,2 ml)

PM = molekylvikten av den substans som skall bestämmas (för DL-mjölksyra M = 90,08)

d = kuvettens optiska våglängd i cm (här 1 cm)

ε: NADHs absorptionskoefficient (vid 340 nm, ε = 6,3 mmol-1 × 1 × cm-1)

Den totala halten av mjölksyra och D-mjölksyra

C = 0,164 × ΔA

Om lösningen har spätts i samband med beredningen multipliceras resultatet med spädningsfaktorn.

Anmärkning:

Bestämning vid 334 nm: C = 0,167 × ΔA (ε = 6,2 mmol-1 × 1 × cm-1).

Bestämning vid 365 nm: C = 0,303 × ΔA (ε = 3,4 mmol-1 × 1 × cm-1).

2.5.1.2. L-mjölksyra

C = 0,160 × ΔA

Om lösningen har spätts i samband med beredningen multipliceras resultatet med spädningsfaktorn.

Anmärkning:

Bestämning vid 334 nm: C = 0,163 × ΔA (ε = 6,2 mmol-1 × 1 × cm-1).

Bestämning vid 365 nm: C = 0,297 × ΔA (ε = 3,4 mmol-1 × 1 × cm-1).

2.5.2 Repeterbarhet (r)

r = 0,02 + 0,07xi g/l.

xi är mjölksyrakoncentrationen i provet i g/l.

2.5.3 Reproducerbarhet (R)

R = 0,05 + 0,125xi g/l.

xi är mjölksyrakoncentrationen i provet i g/l.

3. RUTINMETOD

3.1.1 För förbehandling av vinet

Se kapitlet ”Vinsyra”, rutinmetod, punkt 3.1.1.

3.1.2 För bestämning av mjölksyra

0,1 M lösning av cerium(IV)sulfat i 0,35 M svavelsyra:

Håll lösningen kall, lös 40,431 g cerium(IV)sulfat, Ce(SO4)2, 4H2O i exakt 350 ml 1 M svavelsyralösning (3.1.2.4). Fyll upp till 1000 ml med destillerat vatten.

2,5 M natriumhydroxidlösning (NaOH).

Natriumacetatlösning, 270 g/l (beredd av torrt natriumacetat, NaCH3COO).

1 M svavelsyra (H2SO4).

2 % (w/v) natriumnitroprussidlösning [Na2(Fe(CN)5NO) × 2H2O]

Förvaras mörkt i en väl tillsluten flaska.

Hållbar i högst åtta timmar.

10 % (v/v) piperidinlösning (C5H11N).

1 M mjölksyralösning.

100 ml mjölksyra (C3H6O3) löses i 400 ml vatten. Lösningen upphettas i en indunstningsskål över kokande vattenbad i fyra timmar. Fyll på emellanåt med destillerat vatten. Kyl och fyll upp till 1 liter. Titrera mjölksyran i 10 ml av lösningen med 1 M natriumhydroxidlösning (3.1.2.8). Justera lösningen till 1 M mjölksyra (90 g).

1 M natriumhydroxidlösning (NaOH).

3.2 Apparatur

Glaskolonn, ca 300 mm lång, med 10-11 mm innerdiameter och utloppsrör för reglering av flödet.

Vattenbad med en konstant temperatur av 65 °C.

Spektrofotometer för absorbansbestämning vid 570 nm med kuvetter med 1 cm optisk väglängd.

3.3 Metod

3.3.1 Beredning av jonbytarkolonn

Se kapitlet ”Vinsyra”, rutinmetod, 3.3.1.

3.3.2 Separering av organiska syror

Se kapitlet ”Vinsyra”, rutinmetod, 3.3.2.

3.3.3 Bestämning av mjölksyra

Häll 10 ml eluat i ett 50 ml provrör med en propp av slipat glas och tillsätt 10 ml ceriumsulfatlösning (3.1.2.1). Rör om och placera i vattenbad med en konstant temperatur av 65 °C i exakt 10 minuter. När röret sänks ner i vattenbadet avlägsnas glasproppen i några sekunder för att kompensera för tryckhöjningen till följd av uppvärmningen. Proppen sätts därefter tillbaka så att röret tillsluts och den etanal (acetaldehyd) som bildas inte förflyktigas. Avlägsna röret från vattenbadet och kyl under rinnande vatten till en temperatur av ca 20 °C. Tillsätt 5 ml 2,5 M natriumhydroxidlösning (3.1.2.2), blanda och filtrera.

Tag 15 ml av filtratet och häll det i en 50 ml kolv med propp som redan innehåller en homogen blandning av 5 ml 27 % natriumacetatlösning (3.1.2.3) och 2 ml 1 M svavelsyra (3.1.2.4). Tillsätt 5 ml natriumnitroprussidlösning (3.1.2.5), blanda och tillsätt därefter 5 ml piperidinlösning (3.1.2.6). Blanda om snabbt och häll omedelbart i lösningen i kuvetten i spektrofotometern. Den färgning som uppträder varierar från grön till violett och bestäms vid 570 nm i förhållande till luft (ingen kuvett i strålgången). Den ökar och minskar därefter snabbt.

Följ motsvarande absorbansvariation och välj det högsta värdet som slutvärde.

Om eluatet innehåller för mycket mjölksyra och absorbansen är för hög, späds eluatet med 7,1 % natriumsulfatlösning (3.1.1). Utför bestämningen på den spädda lösningen.

3.3.4 Utskrift av kalibreringskurvan

Pipettera 10 ml av 1 M mjölksyralösning (3.1.2.7) och 10 ml av den titrerade 1 M natriumhydroxidlösningen (3.1.2.8) i en 1000 ml mätkolv och fyll upp till märket med 7,1 % natriumsulfatlösning. Ta 5, 10, 15, 20 resp. 25 ml av lösningen och häll i 100 ml mätkolvar. Fyll upp till referensmärket med 7,1 % natriumsulfatlösning (3.1.1). Tag 10 ml av var av en av de erhållna lösningarna och bestäm deras absorbans enligt den metod som beskrivs i 3.3.3 för eluatet.

Dessa lösningars koncentrationer motsvarar vineluat som innehåller 0,45; 0,9; 1,35; 1,80 resp. 2,25 gram mjölksyra per liter.

En grafisk framställning av dessa lösningars absorbansvärden som en funktion av halten av mjölksyra blir en rak linje.

3.4 Redovisning av resultaten

Den för eluatet bestämda absorbansen kan sökas på kalibreringskurvan och anger halten av mjölksyra i gram per liter vin.

Resultatet anges med en decimal.

Anmärkning:

Vin som innehåller mer än 250 mg svaveldioxid per liter kan ha en halt av etanalsulfonsyra som inräknas i halten av mjölksyra. I detta fall måste resultatet korrigeras med en mängd som erhålls genom följande extra beräkning: 15 ml av eluatet blandas i ett provrör med propp med 5 ml 27 % natriumacetat (3.1.2.3) och 2 ml 0,775 M H2SO4 (77,5 ml 1 M H2SO4 späds till 100 ml med destillerat vatten). Därefter tillsätts, som vid bestämning av mjölksyra, 5 ml 2 % natriumnitroprussid (3.1.2.5) och 5 ml 10 % (3.1.1.6) piperidin. Efter blandning bestäms absorbansen under samma betingelser som de som har angivits för bestämning av mjölksyra. Finn absorbansen på kalibreringskurvan för att erhålla värde B för mjölksyran i gram per liter i förhållande till etanalsulfonsyra. Om L' är den skenbara koncentrationen av mjölksyra i vinet i gram per liter, erhålls den verkliga koncentrationen L' av mjölksyra med formeln:

L = L′ - B × 0,4 (g/l)

19. L-ÄPPELSYRA

1. PRINCIP FÖR METODEN

L-äppelsyra (L-malat) oxiderar i närvaro av nikotinamid-adenindinukleotid (NAD) till oxalacetat i en reaktion som katalyseras av L-malatdehydrogenas (L-MDH).

Reaktionsjämvikten ligger vanligtvis närmare malat. Om oxalacetat avlägsnas från reaktionsblandningen förflyttas reaktionsjämvikten mot bildning av oxalacetat. I närvaro av L-glutamat omvandlas oxalacetat till L-aspartat i en reaktion som katalyseras av glutamat-oxalacetat-transaminas (GOT):

1) L-malat + NAD+ oxalacetat + NADH + H+

2) Oxalacetat + L-glutamat L-aspartat + α-ketoglutarat

Den mängd NADH som bildas, bestämd på grundval av absorbansökningen vid 340 nm, är proportionell mot den ursprungliga mängden L-malat.

2. REAGENSER

Buffertlösning, pH 10

(0,60 M glycylglycin, 0,1 M L-glutamat).

Lös 4,75 g glycylglycin och 0,88 g L-glutaminsyra i ca 50 ml dubbeldestillerat vatten. Justera pH till 10 med ca 4,6 ml 10 M natriumhydroxid och späd till 60 ml med dubbeldestillerat vatten.

Denna lösning är hållbar i minst 12 veckor vid 4 °C.

Nikotinamid-adenin-dinukleotidlösning (NAD), ca 47 × 10- 3 M: lös 420 mg NAD i 12 ml dubbeldestillerat vatten. Denna lösning är hållbar i minst 4 veckor vid 4 °C.

Suspension av glutamat-oxalacetat-transaminas (GOT), 2 mg/ml. Suspensionen är hållbar i minst 1 år vid 4 °C.

L-malatdehydrogenaslösning (L-MDH), 5 mg/ml. Denna lösning är hållbar i minst 1 år vid 4 °C.

Anmärkning: Samtliga ovannämnda reagenser finns i handeln.

3. APPARATUR

Spektrofotometer för bestämning vid 340 nm, den våglängd där NADH har maximal absorption.

Om sådan apparatur saknas, är det möjligt att använda en spektrofotometer med diskontinuerligt spektrum som tillåter bestämning vid 334 eller 365 nm.

Eftersom absoluta absorbansbestämningar görs (dvs. kalibreringskurvor används inte, utan standardisering görs med hjälp av extinktionskoefficienten för NADH), måste apparatens våglängdsskalor och absorption kontrolleras.

Glaskuvetter med en optisk väglängd av 1 cm eller engångskuvetter.

Mikropipetter för pipettering av prov med en volym mellan 0,01 och 2 ml.

4. BEREDNING AV PROVET

Bestämning av L-malat utförs normalt direkt i vinet utan föregående avfärgning och spädning, under förutsättning att halten av L-äppelsyra är mindre än 350 mg/l (bestämt vid 365 nm). Om så inte är fallet späds vinet med dubbeldestillerat vatten till dess att halten av L-malat ligger mellan 30 och 350 mg/l (dvs. mängden L-malat i analysprovet är mellan 3 och 35 μg).

Om halten av L-malat i vinet är mindre än 30 mg/l kan analysprovets volym ökas till 1 ml. I så fall minskas den vattenvolym som tillsätts på så sätt att den totala volymen i de båda kuvetterna blir densamma.

5. METOD

Spektrofotometern ställs in på våglängden 340 nm och absorbansen bestäms i kuvetter med en optisk väglängd av 1 cm i förhållande till luft (ingen kuvett i strålgången) eller vatten.

Häll i kuvetter med 1 cm optisk väglängd:

Referenskuvett (ml) Provkuvett (ml) Lösning 2.1 1,00 1,00 Lösning 2.2 0,20 0,20 Dubbeldestillerat vatten 1,00 0,90 Suspension 2.3 0,01 0,01 Prov — 0,10

Blanda och läs av absorbansen för lösningarna i referens- och provkuvetterna (A1) efter ca tre minuter.

Tillsätt:

Lösning 2.4 0,01 ml 0,01 ml

Blanda och vänta till dess att reaktionen är avslutad (ca 5-10 minuter) och läs av absorbansen för lösningarna i referens- och provkuvetterna (A2).

Beräkna absorbansdifferensen (A2 - A1) för referens- och provkuvetterna, ΔAP och ΔAR.

Absorbansdifferensen för referenslösningen dras ifrån absorbansdifferensen för provlösningen:

ΔA = ΔAD - ΔAT

Anmärkning: Den tid som krävs för att enzymerna skall verka kan variera mellan serierna och värdet ovan anges endast som vägledning. Värdet bör bestämmas för varje serie.

6. REDOVISNING AV RESULTATEN

Halten av L-äppelsyra i gram per liter med en decimal.

6.1 Beräkningsmetod

Den allmänna formeln nedan används för beräkning av halten i gram per liter:

C = V × PM ε × d × v × 1 000 × Δ A

där

V = provlösningens volym i ml (här 2,22 ml)

v = provvolymen i ml (här 0,1 ml)

PM = molekylvikten för den substans som skall bestämmas (dvs. för L-äppelsyra = 134,09)

d = kuvettens väglängd i cm (här 1 cm)

ε = absorptionskoefficient för NADH (vid 340 nm, ε = 6,3 mmol- 1 × 1 × cm- 1).

För L-malat erhålls:

C = 0,473 × ΔA g/l

Om lösningen har spätts i samband med beredningen multipliceras resultatet med spädningsfaktorn.

Anmärkning:

Bestämning vid 334 nm: C = 482 × ΔA

Bestämning vid 365 nm: C = 876 × ΔA

6.2 Repeterbarhet (r)

r = 0,03 + 0,034xi.

xi = halten av äppelsyra i provet i g/l.

6.3 Reproducerbarhet (R)

R = 0,05 + 0,071xi.

xi = halten av äppelsyra i provet i g/l.

20. BESTÄMNING AV D-ÄPPELSYRA (enzymatisk metod)

1. PRINCIP

I närvaro av D-malat-dehydrogenas (D-MDH) oxideras D-äppelsyra (D-malat) till oxalacetat av nikotinamid-adenin-dinukleotid (NAD). Det bildade oxalacetatet omvandlas till pyruvat och koldioxid:

D-malat + NAD+ pyruvat + CO2 + NADH + H+

Bildningen av NADH mäts genom den ökade absorbansen vid våglängderna 334, 340 eller 365 nm, och den bildade mängden NADH är proportionell mot den ursprungliga mängden D-malat.

2. REAGENS

Reagens som räcker till cirka 30 bestämningar säljs i kit bestående av

a) Flaska 1 som innehåller omkring 30 ml buffertlösning i form av HEPES (N-(2-hydroxietyl)piperazin-N'-2-etansulfonsyra) pH = 9,0 samt stabiliserande ämnen.

b) Flaska 2 som innehåller omkring 210 mg lyofiliserat NAD.

c) Flaska 3 (tre flaskor) som innehåller lyofiliserat D-MDH motsvarande omkring 8 I.E.

Beredning av lösningarna

1) Innehållet i flaska 1 späds ej. Lösningen skall ha en temperatur på 20-25 °C vid användning.

2) Lös innehållet i flaska 2 i 4 ml dubbeldestillerat vatten.

3) Lös innehållet i en av flaskorna 3 i 0,6 ml dubbeldestillerat vatten. Lösningen skall ha en temperatur på 20-25 °C vid användning.

Lösningarnas stabilitet

Innehållet i flaska 1 kan förvaras åtminstone ett år vid + 4 °C. Lösning 2 kan förvaras omkring 3 veckor vid + 4 °C och 2 månader vid - 20 °C. Lösning 3 kan förvaras i femdagar vid + 4 °C.

3. UTRUSTNING

3.1 Spektrofotometer som är anpassad för mätningar vid 340 nm, d.v.s. absorptionsmaximum för NADH. Om en sådan inte finns kan man använda en fotometer med diskontinuerligt spektrum som kan användas för mätningar vid 334 nm och 365 nm. Vid absoluta absorbansmätningar (i stället för en kalibreringsskala används extinktionskoefficienten för NADH) måste utrustningens våglängds- och absorbansskala kontrolleras.

3.2 Glas- eller engångskyvetter med bredden 1 cm.

3.3 Mikropipetter för volymer på 0,01-2 ml.

4. BEREDNING AV PROVET

Bestämningen av D-malat görs i regel direkt, utan att vinet dessförinnan avfärgats.

Mängden D-malat i kyvetten skall vara mellan 2 och 50 μg. Späd därför vinet till en malatkoncentration på 0,02-0,5 g/l eller 0,02-0,3 g/l (beroende på vilken utrustning som används).

Spädningstabell:

Beräknad mängd D-malat/liter Spädning med vatten Utspädningsfaktor (F) Mätt vid: 340 eller 334 nm 365 nm < 0,3 g < 0,5 g — 1 0,3 - 3,0 g 0,5 - 5,0 g 1 + 9 10

5. UTFÖRANDE

Spektrofotometern ställs in på våglängden 340 nm. Absorbansmätningarna utförs i kyvetter med bredden 1 cm. Absorbansvärdet noll kan antingen ställas in för luft (ingen kyvett skall sitta i) eller för vatten.

I kyvetten hälls följande vätskor:

Referenslösning Analyslösning Lösning 1 1,00 ml 1,00 ml Lösning 2 0,10 ml 0,10 ml Dubbeldestillerat vatten 1,80 ml 1,70 ml Prov — 0,10 ml

Rör om. Efter ungefär 6 minuter mäts absorbansen för referens- och analyslösningen (A1).

Tillsätt:

Referenslösning Analyslösning Lösning 3 0,05 ml 0,05 ml

Rör om. Vänta tills reaktionen har ägt rum (omkring 20 minuter) och mät absorbansen för referens- och analyslösningarna (A2).

Bestäm skillnaden i absorbans (A2 - A1) mellan referens- (ΔAT) och analyslösningen (ΔAE). Subtrahera skillnaden i absorbans för referenslösningen från skillnaden i absorbans för analyslösningen:

ΔA = ΔA E - ΔA T.

Observera: Den tid som enzymreaktionen tar kan variera mellan olika kit; det värde som anges här är bara ungefärligt. Tiden bör därför bestämmas för varje enskilt kit.

D-äppelsyra reagerar snabbt. Enzymet har också L-vinsyra som substrat, men denna reaktion är inte alls lika snabb. Effekterna av denna mindre interferens kan korrigeras genom extrapolering (se tillägg A).

6. BERÄKNING AV RESULTAT

Koncentrationen i milligram per liter beräknas med hjälp av formeln

C = V × M ε × d × v × ΔA

V = AnalyslöHosningens volym i ml (2,95 ml)

v = Provets volym i ml (0,1 ml)

M = molekylvikten av det ämne som skall mätas (för D-äppelsyra: 134,09)

d = kyvettens bredd i cm (1 cm)

ε = absorptionskoefficient för NADH:

vid 340 nm = 6,3 (1 mmol-1 cm-1)

vid 365 nm = 3,4 (1 mmol-1 cm-1)

vid 334 nm = 6,18 (1 mmol-1 cm-1).

Om provet har spätts vid beredning skall resultatet multipliceras med utspädningsfaktorn (F).

Koncentrationen D-äppelsyra anges i milligram per liter (mg/l) utan decimaler.

7. NOGGRANNHET

Resultaten från provningsjämförelsen beträffande metodens noggrannhet sammanfattas i tillägg B. Det är möjligt att de värden som erhållits vid provningsjämförelsen inte är relevanta för andra koncentrationer av analyt och matris än de som anges i tillägg B.

7.1 Repeterbarhet

Den absoluta skillnaden mellan resultaten från två bestämningar som utförts med kortast möjliga mellanrum av en och samma person på samma laboratorieprov och med samma utrustning skall inte överstiga värdet r i mer än 5 % av fallen.

r = 11 mg/l.

7.2 Reproducerbarhet

Den absoluta skillnaden mellan resultaten från två bestämningar som utförts på samma laboratorieprov men i skilda laboratorier skall inte överstiga värdet R i mer än 5 % av fallen.

R = 20 mg/l

8. BESTÄMNING AV D-ÄPPELSYRA (D(+)-ÄPPELSYRA), I VIN MED LÅGA HALTER

8.1 Användningsområde

Den beskrivna metoden används för enzymatisk bestämning av D-äppelsyra i vin med halter under 50 mg/l.

8.2 Princip

Principen för metoden beskrivs i punkt 1. Bildningen av NADH mäts genom den ökade absorbansen vid våglängden 340 nm, och den bildade mängden NADH är proportionell mot den ursprungliga mängden D-malat efter det att en mängd D-äppelsyra motsvarande 50 mg/l tillsatts i mätkyvetten.

8.3 Reagens

En lösning av D-äppelsyra med koncentrationen 0,199 g/l och de reagens som anges i punkt 2.

8.4 Utrustning

Utrustningen anges i punkt 3.

8.5 Beredning av provet

Provets beredning beskrivs i punkt 4.

8.6 Utförande

Utförande enligt punkt 5, men i mätkyvetten tillsätts en mängd D-äppelsyra motsvarande 50 mg/l (tillsats av 0,025 ml D-äppelsyralösning med koncentrationen 0,199 g/l, i stället för samma volym vatten); de erhållna värdena minskas med 50 mg/l.

8.7 Intern validering

I följande tabell sammanfattas protokollet för intern validering av metoden för bestämning av D-äppelsyra efter tillsats av 50 mg/l av isomeren.

Mätområde 0–70 mg D-äppelsyra per liter. Inom detta område är metoden linjär, med en korrelationskoefficient mellan 0,990 och 0,994 Kvantifieringsgräns 24,4 mg/l Detektionsgräns 8,3 mg/l Känslighet 0,0015 abs/mg/l Utbyte 87,5 %–115 % för vita viner och 75 %–105 % för röda viner Repeterbarhet = 12,4 mg/l för vita viner (enligt OIV:s metod, = 12,5 mg/l) = 12,6 mg/l för röda viner (enligt OIV:s metod, = 12,7 mg/l) Variationskoefficient 4,2 %–7,6 % (vita viner och röda viner) Variabilitet mellan laboratorier CV = 7,4 % (s = 4,4 mg/l; medelvärde = 59,3 mg/l)

Tillägg A

Beaktande av interferande reaktioner

Interferande reaktioner kan ha flera orsaker. I allmänhet beror de antingen på att det enzym som används katalyserar mer än en reaktion, att det finns andra enzymer i provet, eller på att det förekommer interaktioner mellan ett eller flera ämnen i matrisen och en kofaktor för den enzymatiska reaktionen.

Vid en normal enzymatiskt kontrollerad reaktion når absorbansen ett konstant värde efter en viss tid, vanligen 10-20 min, beroende på hastigheten hos den specifika reaktionen. Om sekundära reaktioner inträffar når dock aldrig absorbansen ett konstant värde, utan ökar konstant med tiden. Det är detta fenomen som brukar kallas interfererande reaktion.

När detta problem uppstår bör lösningens absorbans mätas med jämna mellanrum (2-5 min), efter det att kalibreringslösningen nått sin slutliga absorbans. Om absorbansen stiger konstant görs 5-6 mätningar, och värdena från dessa används vid en extrapolering (grafisk eller numerisk) för att beräkna vad lösningens absorbans skulle ha varit när det sista enzymet tillsattes (T0). Skillnaden i extrapolerad absorbans vid denna tidpunkt (Af - Ai) används vid beräkningen av substratkoncentrationen.

Figur 1: Interfererande reaktion

Tillägg B

Statistiska resultat från provningsjämförelser År då provningsjämförelsen gjordes: 1995 Antal laboratorier: 8 Antal prover: 5 med tillsats av D-äppelsyra Typ av prov: A: rött vin; B: rött vin; C: vitt vin; D: vitt vin; E: vitt vin. Prov A B C D E Antal kvarvarande laboratorier efter att laboratorier som uppvisat avvikande reslutat tagits bort 7 8 7 8 7 Antal laboratorier som uppvisat avvikande resultat 1 — 1 — 1 Antal godkända resultat 35 41 35 41 36 Genomsnittsvärde ( χ —) (mg/l) 161,7 65,9 33,1 106,9 111,0 Standardavvikelse repeterbarhet (sr) (mg/l) 4,53 4,24 1,93 4,36 4,47 Relativ standardavvikelse repeterbarhet (RSDr) (%) 2,8 6,4 5,8 4,1 4,00 Repeterbarhetsgräns (r) (mg/l) 12,7 11,9 5,4 12,2 12,5 Standardavvikelse reproducerbarhet (sR) (mg/l) 9,26 7,24 5,89 6,36 6,08 Relativ standardavvikelse reproducerbarhet (RSDR) (%) 5,7 11 17,8 5,9 5,5 Reproducerbarhetsgräns (R) (mg/l) 25,9 20,3 16,5 17,8 17,0

21. TOTAL HALT AV ÄPPELSYRA

RUTINMETOD

1. PRINCIP

Äppelsyra som separeras med en anjonbytarkolonn bestäms kolorimetriskt i eluatet genom bestämning av den gula färg som bildas med kromotropsyra i närvaro av koncentrerad svavelsyra. Korrektion för orenheter görs genom att dra ifrån den absorbans som erhålls med 86 % svavelsyra och kromotropsyra (äppelsyra reagerar inte vid dessa syrakoncentrationer) från den absorbans som erhålls vid användning av 96-procentiga syror.

2. APPARATUR

Glaskolonn, ca 250 mm lång, 35 mm innerdiameter, med avtappningskran.

Glaskolonn, ca 300 mm lång, 10-11 mm innerdiameter, med avtappningskran.

Termostatreglerat vattenbad, 100 °C.

Spektrofotometer med 10 mm kuvetter för absorbansbestämning vid 420 nm.

3. REAGENSER

Starkt basisk jonbytarharts (t.ex. Merck III).

Natriumhydroxid, 5 % (w/v).

Ättiksyra, 30 % (w/v).

Ättiksyra, 0,5 % (w/v).

Natriumsulfatlösning (Na2SO2),1 0 % (w/v).

Koncentrerad svavelsyra, 95-97 % (w/w).

Svavelsyra, 86 % (w/w).

Kromotropsyra, 5 % (w/v).

Bered en färsk lösning före varje bestämning genom att lösa 500 mg natriumkromotropat (C10H6Na2O8S2, 2H2O) i 10 ml destillerat vatten.

DL-äppelsyralösning, 0,5 g/l.

Lös 250 mg äppelsyra (C4H6O5) i natriumsulfatlösning (10 %). Fyll upp till 500 ml med natriumsulfatlösning (10 %) (3.5).

4. METOD

4.1 Beredning av jonbytarharts

Placera en bomullstuss som är indränkt med destillerat vatten på kolonnens botten (35 × 250 mm) ovanför avtappningskranen. Häll en suspension av jonbytarharts i glaskolonnen. Vätskan bör nå 50 mm över hartsens översta nivå. Skölj med 1000 ml destillerat vatten. Tvätta kolonnen med natriumhydroxidlösning (5 %). Låt rinna av så att nivån är 263 mm ovanför hartsens översta nivå, tvätta ytterligare två gånger med 5 % natriumhydroxid och låt stå i en timme. Tvätta kolonnen med 1000 ml destillerat vatten. Fyll kolonnen igen med ättiksyra (30 %), låt rinna av till 2-3 mm från kolonnens översta del och tvätta ytterligare två gånger med ättiksyra (30 %). Låt stå i minst 24 timmar före användning. Förvara jonbytarhartsen i ättiksyra (30 %) för senare analyser.

4.2 Beredning av jonbytarkolonn

Placera en bomullstuss på kolonnens botten (11 × 300 mm) ovanför kranen. Häll i suspensionen av jonbytarharts (beredd enligt 4.1) till en nivå av 10 cm. Öppna kranen och låt ättiksyralösningen (30 %) rinna ut till en nivå 2-3 mm ovanför hartsens översta nivå. Tvätta med 50 ml ättiksyra (0,5 %).

4.3 Separering av DL-äppelsyra

Häll 10 ml vin eller must i kolonnen (beredd enligt 4.2). Låt en droppe i taget rinna ut (i genomsnitt en droppe per sekund) och hejda flödet när nivån är 2-3 mm från hartsens översta nivå. Tvätta kolonnen med 50 ml ättiksyra (0,5 %), därefter med 50 ml destillerat vatten och låt rinna av med samma hastiget som tidigare. Avsluta när nivån är 2-3 mm från hartsens översta nivå.

Eluera de syror som absorberats på jonbytarhartsen med en 10 % natriumsulfatlösning (3.5). Samla upp eluatet i en 100 ml mätkolv.

Kolonnen kan regenereras med hjälp av den metod som beskrivs i (4.1).

4.4 Bestämning av äppelsyra

Märk två 30 ml rör A och B med bred hals (med proppar av slipat glas). Häll 1,0 ml av eluatet (4.3) och 1 ml kromotropsyra (5 %) i vardera röret. Tillsätt 10 ml svavelsyra (86 %) (referens) i rör A och 10 ml (96 %) svavelsyra i rör B (analysprov). Tillslut och skaka om för att homogenisera. Se till att proppen inte blir våt. Sänk ner rören i kokande vattenbad i exakt 10 minuter. Kyl rören i mörker vid 20 °C i exakt 90 minuter. Bestäm omedelbart absorbansen i förhållande till referensen vid 420 nm i en 10 mm kuvett.

4.5 Utskrift av kalibreringskurva

Pipettera 5,0; 10,0; 15,0 och 20 ml i fyra 50 ml mätkolvar. Fyll upp till märket med natriumsulfatlösning (10 %).

Dessa lösningar motsvarar eluat som erhållits från viner innehållande 0,5; 1,0; 1,5 respektive 2,0 g/l äppelsyra.

Fortsätt som i 4.4.

Kurvan över dessa lösningars absorbanser är en funktion av deras halt av äppelsyra och beskriver en rak linje som skär igenom nollpukten.

Den färgintensitet som erhålls beror i stor utsträckning på koncentrationen av den använda svavelsyran. Det är nödvändigt att kontrollera kalibreringskurvan med åtminstone en punkt per serie bestämningar för att påvisa en eventuell förändring av svavelsyrans koncentration.

5. REDOVISNING AV RESULTATEN

Den absorbans som mäts för eluatet söks på kalibreringskurvan genom extrapolering av de uppmätta värdena, och motsvarande äppelsyrakoncentration i g/l läses av. Resultatet anges med en decimal.

Repeterbarhet:

Halt < 2 g/l: r = 0,1 g/l.

Halt > 2 g/l: r = 0,2 g/l.

Reproducerbarhet:

R = 0,3 g/l.

22. SORBINSYRA

1. PRINCIP FÖR METODERNA

1.1 Bestämning med ultraviolett absorptionsspektrofotometri

Sorbinsyra (trans, trans, 2,4-hexadiensyra) som extraherats genom ångdestillation bestäms i vindestillatet med ultraviolett absorptionsspektrofotometri. Substanser som interfererar med absorptionsbestämningen i den ultravioletta delen av spektrum avlägsnas genom indunstning till torrhet med hjälp av lätt alkalisk kalciumhydroxid. Tunnskiktskromatografi används för identifiering av nivåer (känslighet: 1 mg/l) under 20 mg/l.

1.2 Bestämning med gaskromatografi

Sorbinsyra som extraheras i etyleter bestäms med gaskromatografi med en intern standard.

1.3 Identifiering av spårmängder med tunnskiktskromatografi

Sorbinsyra som extraheras i etyleter separeras med tunnskiktskromatografi och koncentrationen bestäms semikvantitativt.

2. BESTÄMNING MED ULTRAVIOLETT ABSORPTIONSSPEKTROFOTOMETRI

2.1 Reagenser

Kristallinisk vinsyra, C4H6O6.

Kalciumhydroxid, Ca(OH)2, lösning, ca 0,02 M.

Referenslösning av sorbinsyra, 20 mg/l:

Lös 20 mg sorbinsyra, C6H8O2, i ca 2 ml 0,1 M natriumhydroxidlösning. Häll i en 1000 ml mätkolv och fyll upp till märket med vatten. Alternativt löses 26,8 mg kaliumsorbat, C6H7KO2, i vatten och lösningen späds till 1000 ml med vatten.

2.2 Apparatur

Ångdestillationsapparat (se kapitlet ”Halten av flyktiga syror”).

Vattenbad, 100 °C.

Spektrofotometer för absorbansbestämning vid 256 nm med en kuvett av kvarts med 1 cm optisk väglängd.

2.3 Metod

2.3.1 Destillation

Häll 10 ml vin i kolven i en ångdestillationsapparat och tillsätt 1-2 g vinsyra (2.1.1). Samla upp 250 ml av destillatet.

2.3.2 Beredning av kalibreringskurvan

Genom spädning av referenslösningen (2.1.3) bereds fyra spädda referenslösningar med 0,5; 1,0; 2,5 respektive 5 mg sorbinsyra/l. Bestäm deras absorbanser med spektrofotometern vid 256 nm, varvid lösningen med destillerat vatten använts som nollprov. Rita en kurva som visar absorbansvariationen som en funktion av halten. Variationen är linjär.

2.3.3 Bestämning

Häll 5 ml av destillatet i en indunstningsskål med 55 mm diameter och tillsätt 1 ml kalciumhydroxidlösning (2.1.2). Indunsta över vattenbad tills destillatet är torrt.

Lös resten i flera ml destillerat vatten och överför helt till en 20 ml mätkolv. Fyll upp till märket med sköljvatten. Bestäm absorbansen vid 256 nm med en spektrofotometer i förhållande till en referenslösning som erhålls genom spädning av 1 ml kalciumhydroxidlösning (2.1.2) till 20 ml med vatten.

Rita in värdet för den bestämda absorbansen på kalibreringskurvan och sök koncentrationen C av sorbinsyra i lösningen med hjälp av denna.

Anmärkning: Med denna metod kan förlusten till följd av indunstning bortses ifrån. Absorbansbestämningen utförs direkt på destillatet som spätts 1:4 med destillerat vatten.

2.4 Redovisning av resultaten

2.4.1 Beräkning

Halten av sorbinsyra i vinet uttrycks i mg/l och erhålls med 100 × C.

C = halten av sorbinsyra i den spektrofotometriskt analyserade lösningen uttryckt i mg/l.

3. BESTÄMNING MED GASKROMATOGRAFI

3.1 Reagenser

Etyleter (C2H5)2O, destillerad omedelbart före användning.

Intern referenslösning: lösning av undekansyra, C11H22O2, i 95 % etanol med en koncentration av 1 g/l.

Vattenhaltig svavelsyralösning, H2SO4 (ρ20 = 1,84 g/ml),spädd 1:3 (v/v).

3.2 Apparatur

Gaskromatograf med flamjoniseringsdetektor och kolonn av rostfritt stål (4 m × 1/8 tum) som behandlats med dimetyldiklorsilan och packats med en stationär fas bestående av en blandning av dietylenglykolsuccinat (5 %) och fosforsyra (1 %) (DEGS — H3 PO4) eller med en blandning av dietylenglykoladipat (7 %) och fosforsyra (1 %) (DEGA — H3 PO4) bundet till Gaschrome Q 80 — 100 mesh.

Behandling av kolonnen med DMDCS utförs så att en lösning innehållande 2-3 g DMDCS i toluen hälls genom kolonnen. Skölj omedelbart med metanol, följt av kvävgas. Tvätta därefter med hexan och sedan mer kvävgas. Kolonnen är nu färdig att packas.

Analysbetingelser:

Ugnstemperatur: 175 °C.

Injektorns och detektorns temperatur: 230 °C.

Bärargas: kvävgas (flödeshastighet = 200 ml/minut).

Mikrospruta, 10 μl, graderad i 0,1 μl.

Anmärkning: Andra typer av kolonner som ger god separation kan användas, särskilt kapillärkolonner (t.ex. FFAP).

Den metod som beskrivs här anges som exempel.

3.3 Metod

3.3.1 Beredning av analysprovet

Häll 20 ml vin i ett provrör av glas med ca 40 ml volym, med propp av slipat glas. Tillsätt 2 ml av den interna referenslösningen (3.1.2) och 1 ml svavelsyralösning (3.1.3).

Efter att lösningen har blandats genom att röret vänds upp och ner flera gånger tillsätts 10 ml etyleter (3.1.1). Extrahera sorbinsyran i den organiska fasen genom att skaka röret i fem minuter. Låt sedimentera.

3.3.2 Beredning av referenslösningen

Välj ett vin för vilket kromatogrammet för eterextraktet inte visar någon topp som motsvarar eluering av sorbinsyra. Tillsätt sorbinsyra till vinet till en koncentration av 100 mg/l. Behandla 20 ml av det färdiga provet enligt den metod som beskrivs i 3.3.1.

3.3.3 Kromotografi

Använd en mikrospruta för att spruta in följande i kromatografen: först 2 μl av eterextraktfasen som framställts enligt 3.3.2 och därefter 2 μl av eterextraktfasen som framställts enligt 3.3.1

Skriv ut kromatogrammen. Kontrollera identiteten för respektive retentionstider för sorbinsyran och den interna standarden. Bestäm höjden (eller arean) för respektive registrerad topp.

3.4 Redovisning av resultaten

3.4.1 Beräkning

Halten av sorbinsyra i det analyserade vinet uttryckt i mg/l blir:

100 × h H × 1 i

där

H = höjden på sorbinsyratoppen i referenslösningen

h = höjden på sorbinsyratoppen i analysprovet

I = höjden på den interna standardens topp i referenslösningen

i = höjden på den interna standardens topp i analysprovet

Anmärkning: Halten av sorbinsyra kan bestämmas på samma sätt på grundval av bestämningar av ytorna under respektive toppar.

4. SPÅRNING AV SORBINSYRA MED TUNNSKIKTSKROMATOGRAFI

4.1 Reagenser

Etyleter (C2H5)2O.

Vattenhaltig svavelsyralösning, H2SO4 (ρ20 = 1,84 g/ml),spädd 1:3 (v/v).

Referenslösning av sorbinsyra i en blandning av etanol och vatten, ca 10 %, innehållande 20 mg/l.

Mobil fas: hexan-pentan-ättiksyra (20:20:3)

(C6H14 — C5H12 — CH3COOH, ρ20 = 1,05 g/ml).

4.2 Apparatur

Plattor för tunnskiktskromatografi, 20 × 20 cm, täckta med polyamidgel (tjocklek: 0,15 mm), med tillsats av fluorescensindikator.

Kuvett för tunnskiktskromatografi.

Mikropipett eller mikrospruta för insprutning av volymer på 5 μl med ± 0,1 μl noggrannhet.

Ultraviolett lampa (254 nm).

4.3. Metod

4.3.1 Beredning av provet

Häll 10 ml vin i ett provrör av glas, ca 25 ml, med en propp av slipat glas. Tillsätt 1 ml spädd svavelsyra (4.1.2) och 5 ml etyleter (4.1.1). Blanda genom att vända röret flera gånger. Låt sedimentera.

4.3.2 Beredning av spädda referenslösningar

Bered fem spädda referenslösningar från lösningen i 4.1.3 med en sorbinsyrahalt av 2, 4, 6, 8 respektive 10 mg per liter.

4.3.3. Kromatografi

Använd en mikrospruta eller mikropipett för att anbringa 5 μl av eterfasen som framställts enligt 4.3.1 och 5 μl av var och en av de spädda referenslösningarna (4.3.2) 2 cm från plattans nedre kant och med 2 cm avstånd från varandra.

Häll den mobila fasen (4.1.4) i kromatografikärlet i en höjd av ca 0,5 cm och låt atmosfären i kärlet bli mättad med ångor från lösningen. Placera plattan i kärlet. Låt kromatogrammet framkallas över 12-15 cm (framkallningstid ca 30 min.). Torka plattan i en ström av kall luft. Undersök kromatogrammet under en ultraviolett lampa med 254 nm våglängd.

Sorbinsyran framträder som mörkvioletta fläckar mot den gula fluorescerande bakgrunden på plattan.

4.4 Redovisning av resultaten

Genom att jämföra intensiteten hos fläckarna i analysprovet respektive referenslösningarna är det möjligt att göra en semikvantitativ bedömning av halten av sorbinsyra mellan 2 och 10 mg per liter. En halt av 1 mg/l kan bestämmas genom avsättning av 10 μl av den provlösning som skall analyseras.

Halter över 10 mg/l kan bestämmas genom avsättning av mindre än 5 μl av provlösningen (uppmäts med hjälp av mikrospruta).

23. L-ASKORBINSYRA

1. PRINCIP FÖR METODERNA

De här föreslagna metoderna möjliggör bestämning av L-askorbinsyra och dehydroaskorbinsyra i vin eller must.

1.1. Referensmetod (fluorimetri)

L-askorbinsyran oxideras med aktivt kol till dehydroaskorbinsyra. Den senare bildar en fluorescerande förening genom reaktion med ortofenylendiamin (OPDA). Med hjälp av ett referensprov i närvaro av borsyra kan eventuell falsk fluorescens bestämmas (genom att borsyra/dehydroaskorbinsyrakomplex bildas). Den fluorimetriska bestämningen kan göras utifrån föregående bestämning.

1.2 Rutinmetod (kolorimetri)

L-askorbinsyra oxideras med jod till dehydroaskorbinsyra som därefter fälls ut med 2,4-dinitrofenylhydrazin som ger bis-(2,4-dinitrofenylhydrazon). Efter separering med tunnskiktskromatografi och lösning i ättiksyra medium bestäms det rödfärgade derivatet med spektrofotometri vid 500 nm.

2. REFERENSMETOD (fluorimetrisk metod)

2.1. Reagenser

Ortofenylendiamin-dihydrokloridlösning (C6H10Cl2N2), 0,02 g per 100 ml, som bereds omedelbart före användning.

Natriumacetat-tri-hydratlösning (CH3COONa. 3H2O), 500 g/l.

Blandad lösning av borsyra och natriumacetat:

Lös 3 g borsyra, H3BO3, i 100 ml natriumacetatlösning (2.1.2). Denna lösning ska beredas omedelbart före användning.

Lösning av isättika, CH3COOH (ρ20 = 1,05 g/ml), spädd till 56 % (v/v) med pH nära 1,2.

Referenslösning av L-askorbinsyra, 1 g/l:

Omedelbart före användningen löses 50 mg L-askorbinsyra, C6H8O6, efter att ha torkats i en exsickator som är skyddad mot ljus, i 50 ml ättiksyralösning (2.1.4).

Aktivt kol p. a.

Häll 100 g aktivt kol i en 2 l konisk kolv och tillsätt 500 ml 10 % (v/v) saltsyra (HCl) (ρ20 = 1,19 g/ml). Låt koka upp och filtrera genom ett filter av sintrat glas med porositet 3. Samla upp det behandlade kolet i en 2 l konisk kolv, tillsätt 1 liter vatten, skaka om och filtrera genom ett filter av sintrat glas med porositet 3. Upprepa detta förfarande ytterligare två gånger. Placera återstoden i ett torkskåp som ställts in på 115 ± 5 °C i 12 timmar (över natten).

2.2 Apparatur

Fluorimeter. Använd en spektrofluorimeter med en lampa som ger ett kontinuerligt spektrum genom att den används på lägsta effekt. Optimala excitations- och emissionsvåglängder för provet bestäms i förväg och beror på vilken utrustning som används. Som vägledning skall excitationsvåglängden vara ca 350 nm och emissionsvåglängden ca 430 nm.

Kuvetter med 1 cm optisk väglängd.

Filter av sintrat glas, porositet 3.

Provrör (diameter ca 10 mm).

Stavar för omrörning i provrören.

2.3 Metod

2.3.1 Beredning av vin- eller mustprov

Ta något vin eller must och späd till 100 ml i en mätkolv med 56 % ättiksyralösning (2.1.4) för att erhålla en lösning med en halt av L-askorbinsyra mellan 0 och 60 mg/l. Homogenisera innehållet i kolven genom att röra om. Tillsätt 2 g aktivt kol (2.1.6) och låt stå i 15 minuter. Rör om emellanåt. Filtrera genom vanligt filterpapper och kassera de första millilitrarna av filtratet.

Häll 5 ml av filtratet i två 100 ml mätkolvar. I den första kolven hälls 5 ml av den blandade lösningen av borsyra och natriumacetatlösning (2.1.3) (nollprov) och i den andra kolven hälls 5 ml av natriumacetatlösningen (2.1.2) (analysprov). Låt stå i 15 minuter och rör om emellanåt. Fyll upp till 100 ml med destillerat vatten.

Ta 2 ml från innehållet i vardera kolven och tillsätt 5 ml ortofenylendiaminlösning (2.1.1). Rör om och låt reaktionen fortsätta i 30 minuter till dess att lösningen mörknar och utför därefter den spektrofluorimetriska bestämningen.

2.3.2 Beredning av kalibreringskurvan

Häll 2, 4 respektive 6 ml av referenslösningen av L-askorbinsyra (2.1.5) i tre 100 ml mätkolvar. Fyll upp till 100 ml med ättiksyralösning (2.1.4) och homogenisera genom omrörning. De referenslösningar som bereds på detta sätt innehåller 2, 4 respektive 6 mg/100 ml.

Tillsätt 2 g aktivt kol (2.1.6) till vardera av kolvarna och låt stå i 15 minuter. Rör om emellanåt. Filtrera genom vanligt filterpapper och kassera de första millilitrarna. Häll 5 ml av det filtrat som samlats upp i tre 100 ml mätkolvar (serie 1). Upprepa förfarandet med en andra serie om tre mätkolvar. Tillsätt 5 ml av den blandade lösningen av borsyra och natriumacetat (2.1.3) till kolvarna i serie 1 (motsvarande nollprovet) och 5 ml natriumacetatlösning (2.1.2) till kolvarna i serie 2.

Låt stå i 15 minuter och rör om emellanåt. Fyll upp till 100 ml med destillerat vatten. Ta 2 ml av innehållet i vardera kolven och tillsätt 5 ml ortofenylendiaminlösning (2.1.1.). Rör om och låt reaktionen fortsätta i 30 minuter till dess att lösningen mörknar och utför därefter den spektrofluorimetriska bestämningen.

2.3.3 Fluorimetrisk bestämning

Nollställ mätskalan för de olika lösningarna på kalibreringskurvan och för den lösning som skall bestämmas med hjälp av motsvarande nollprov. Bestäm därefter fluorescensens intensitet för respektive lösning från kalibreringskalan för den lösning som skall bestämmas.

Rita kalibreringskurvan, som skall vara en rak linje som skär genom nollpunkten. Sök värdet som svarar mot bestämningen på denna linje och bestäm koncentrationen C av L-askorbinsyra + dehydroaskorbinsyra i analyslösningen med ledning av denna.

2.3.4 Redovisning av resultaten

Halten av L-askorbinsyra och dehydroaskorbinsyra i vinet i mg/l blir:

C × F,

där F är spädningsfaktorn.

3. RUTINMETOD (kolorimetrisk metod)

3.1 Reagenser

Metafosforsyralösning, 30 % (w/v):

Ta 30 g metafosforsyra (HPO3)n, som först krossats i en mortel. Skölj snabbt genom att hälla den i destillerat vatten och röra om. Lös den tvättade syran i destillerat vatten genom att skaka den i en 100 ml mätkolv och fyll upp till referensmärket. Den lösning som erhålls innehåller ca 30 % (w/v) metafosforsyra.

3 % (w/v) metafosforsyralösning som har beretts omedelbart före användning genom spädning 1:10 med destillerat vatten av den lösning som framställts enligt 3.1.1.

1 % (w/v) metafosforsyralösning som har beretts omedelbart före användning genom spädning 1:30 med destillerat vatten av den lösning som framställts enligt 3.1.1.

Polyamidsuspension:

Slamma upp 10 g polyamid för kromatografi i 60 ml destillerat vatten. Låt stå i två timmar. Den beredda kvantiteten räcker till fyra bestämningar.

Tiourinämne (H2NCSNH2).

Jodlösning, I2, 0,05 M.

Lösning av 2,4-dinitrofenylhydrazin, 6 % (w/v). Slamma upp 6 g 2,4-dinitrofenylhydrazin, (C6H6N4O4) i 50 ml isättika (ρ20 = 1,05 g/ml) och tillsätt 50 ml svavelsyra (ρ20 = 1,84 g/ml). 2,4-dinitrofenylhydrazinet löses genom omrörning.

Etylacetat (C4H802) med tillsats av 2 % (v/v) isättika (3.1.12).

Kloroform (CHCl3).

Vattenhaltig stärkelselösning, 0,5 % (w/v).

Mobil fas:

etylacetat … 50 vol. kloroform … 60 vol. isättika … 5 vol.

Låt blandningen stå orörd i 12 timmar före användning.

Isättika, CH3COOH (ρ20 = 1,05 g/ml).

L-askorbinsyralösning, 0,1 g per 100 ml, av 1 % metafosforsyralösning (3.1.3).

3.2 Apparatur

Laboratoriecentrifug med 50 ml centrifugrör med proppar av slipat glas.

Kallt vattenbad som regleras termostatiskt till 5-10 °C.

Termostatiskt reglerat vattenbad med en temperatur av 20 °C.

Plattor för tunnskiktskromatografi, 20 × 20 cm, täckta med silicagel G (tjocklek: 0,25 eller 0,3 mm).

Kromatografikärl.

Mikropipett för volymer på 0,2 ml.

Spektrofotometer för absorbansbestämning vid 500 nm med kuvetter med 1 cm optisk väglängd.

3.3 Metod

3.3.1 Oxidering av L-askorbinsyra till dehydroaskorbinsyra

Häll 50 ml av vinet i en 100 ml mätkolv. Tillsätt 15 ml polyamidsuspension (3.1.4) och fyll upp till märket med 3 % metafosforsyralösning (3.1.2). Låt stå i en timme och skaka om ofta. Filtrera genom ett veckfilter. Samla upp 20 ml av filtratet i ett centrifugrör och tillsätt 1 ml 0,05 M jodlösning (3.1.6). Homogenisera genom att skaka om det tillproppade centrifugröret och reducera överskottet av jod efter en minut genom att tillsätta ca 25 mg tiourinämne.

3.3.2 Bildning och extraktion av bis(2,4-dinitrofenylhydrazon)derivat av diketogulonsyra

Placera röret i ett vattenbad som hålls mellan 5 och 10 °C. Tillsätt 4 ml av 2,4-dinitrofenylhydrazinlösningen (3.1.7). Blanda innehållet försiktigt och undvik att väta glasproppen. Tillslut röret helt och placera i ett vattenbad vid 20 °C i ca 16 timmar (över natten).

Häll 15 ml etylacetat (3.1.8) i centrifugröret. Tillslut röret med proppen av slipat glas och skaka om kraftigt i 30 sekunder. Centrifugera i 5 minuter vid en centrifugalkraft av 350-400 g. Pipettera 10 ml av etylacetatextraktet i en konisk kolv med en propp av slipat glas. Ta ur proppen och tillsätt ytterligare 5 ml etylacetat (3.1.8) till centrifugröret, skaka om igen i 30 sekunder och centrifugera i 5 minuter vid samma hastighet. Pipettera 5 ml av etylacetatextraktet i den koniska kolven som innehåller 10 ml från den första extraktionen. Blanda.

3.3.3 Separation av bis(2,4-dinitrofenylhydrazon) med kromatografi. Utförs inom två timmar efter extraktion (3.3.2).

Anbringa 0,2 ml av etylacetatextraktet längs hela den startlinje som är placerad 2 cm från plattans kant, vilket ger en 2 cm marginal längs plattans sidor. Häll den mobila fasen (3.1.11) i kromotografikärlet till ett djup av 1 cm och låt atmosfären bli mättad av ångor från lösningsmedlet. Sätt i plattan och låt lösningsmedlet vandra till plattans övre kant. Torka plattan i 1 timme under en ventilerad huv. Håll plattan vertikalt över ett ark glanspapper och skrapa av rödfärgningen (karakteristisk för 2,4-dinitrofenylhydrazon) med en spatel (vinkelrätt mot vandringsriktningen). Överför det pulver som erhålls utan att något går förlorat till en konisk kolv med en propp av slipat glas och tillsätt 4 ml ättiksyra (3.1.12). Låt stå i 30 minuter och rör om ofta. Filtrera genom ett veckfilter direkt i en spektrofotometerkuvett (3.2.7). Det erhållna filtratet måste vara helt klart. Bestäm absorbansen för denna lösning vid 500 nm med ättiksyra (3.1.12) i referenskuvetten för att erhålla ett nollvärde för bestämningarna.

3.3.4 Beredning av kalibreringskurva

Häll 5, 10 respektive 15 ml av L-askorbinsyralösningen (3.1.13) i tre 100 ml mätkolvar och fyll upp till märket med den 1-procentiga metafosforsyralösningen (3.1.3). De lösningar som erhålls har askorbinsyrahalter av 50, 100 respektive 150 mg/l.

Behandla lösningarna enligt den metod som beskrivs i 3.3.1, 3.3.2 och 3.3.3. Rita kalibreringskurvan, som bör vara en rak linje som skär genom nollpunkten.

3.3.5 Redovisning av resultaten

Halten av L-askorbinsyra + dehydroaskorbinsyra i vinet uttrycks i milligram per liter.

Beräkning

Sök värdet för absorbansen som bestämts i 3.3.3 på den raka kalibreringskurvan och bestäm därigenom halten av L-askorbinsyra + dehydroaskorbinsyra i den lösning som skall analyseras.

Anmärkning:

Om halten av L-askorbinsyra + dehydroaskorbinsyra är större än 150 mg/l minskas analysprovets volym till 25, 20 respektive 10 ml vin och det erhållna resultatet multipliceras med spädningsfaktorn F.

24. pH

1. PRINCIP

Potentialskillnaden mellan två elektroder som är nedsänkta i provvätskan bestäms. En av dessa två elektroder har en potential som är en funktion av vätskans pH, medan den andra har en fast och känd potential och utgör referenselektroden.

2. APPARATUR

pH-mätare med en skala i pH-enheter som tillåter bestämning med en noggrannhet av minst ± 0,05 pH-enheter.

Elektroder:

Glaselektrod som förvaras i destillerat vatten.

Kalomelmättad referenselektrod med kaliumklorid, som förvaras i en mättad lösning av kaliumklorid.

Alternativt används en kombinerad elektrod som förvaras i destillerat vatten.

3. REAGENSER

Buffertlösningar:

Mättad lösning av kaliumvätetartrat, innehållande minst 5,7 g kaliumvätetartrat/l (C4H5KO6) vid 20 °C. (Denna lösning kan förvaras i minst 2 månader genom tillsats av 0,1 g tymol/200 ml.)

pH 3,57 vid 20 °C 3,56 vid 25 °C 3,55 vid 30 °C

Lösning av kaliumväteftalat, 0,05 M, innehållande 10,211 g kaliumväteftalat (C8H5KO4) per liter vid 20 °C. (Hållbar i högst 2 månader).

pH 3,999 vid 15 °C 4,003 vid 20 °C 4,008 vid 25 °C 4,015 vid 30 °C

Lösning innehållande:

Monokaliumfosfat, KH2PO4 … 3,402 g Dikaliumfosfat, K2HPO4 … 4,354 g Vatten till … 1000 ml

(Hållbar i högst 2 månader)

pH 6,90 vid 15 °C 6,88 vid 20 °C 6,86 vid 25 °C 6,85 vid 30 °C

Anmärkning: Referensbuffertlösningar som finns i handeln kan också användas.

4. METOD

4.1 Beredning av analysprov

4.1.1. För must och vin

Använd musten eller vinet direkt.

För renad koncentrerad must

Späd den renade koncentrerade musten med vatten till en koncentration av 25 ± 0,5 % (w/w) av den totala sockerhalten (25 oBrix).

Om P är halten i procent (w/w) av totala sockermängden i den renade koncentrerade musten, väg en massa av

2500 P

och fyll upp till 100 g med vatten. Vattnet skall ha en konduktivitet under 2 mikrosiemens/cm.

4.2 Nollställning av apparaturen

Apparaturen nollställs innan några bestämningar görs enligt de anvisningar som medföljer.

4.3 Kalibrering av pH-mätare

Kalibrera pH-mätaren vid 20 °C med hjälp av buffertlösningar med pH 6,88 och 3,57 vid 20 °C.

Använd buffertlösningen med pH 4,00 vid 20 °C för att kontrollera kalibreringen av skalan.

4.4 Bestämning

Doppa ner elektroden i det prov som skall analyseras, vilket skall ha en temperatur mellan 20 och 25 °C och ligga så nära 20 °C som möjligt. Läs av pH-värdet direkt på skalan.

Utför minst två bestämningar på samma prov.

Slutresultatet erhålls genom att man tar det aritmetiska medelvärdet av två bestämningar.

5. REDOVISNING AV RESULTATEN

pH-värdet för musten, vinet eller den 25-procentiga (w/w) (25 oBrix) lösningen av renad koncentrerad must anges med två decimaler.

25. SVAVELDIOXID

1. DEFINITIONER

Fri svaveldioxid definieras som den svaveldioxid som finns i must eller vin i följande former: H2SO3 och HSO3-. Jämvikten mellan dessa båda former är en funktion av pH och temperaturen:

H2SO3 H+ + HSO3-

H2SO3 betecknar svaveldioxid i molekylär form.

Den totala svaveldioxiden definieras som totalhalten av samtliga former av svaveldioxid i vinet, antingen i fri form eller i förening med andra beståndsdelar.

2. FRI SVAVELDIOXID OCH TOTAL SVAVELDIOXID

2.1 Princip

2.1.1 Referensmetod

Vin och must

Svaveldioxiden överförs med en luft- eller kvävgasström. Den binds och oxideras genom att bubblas genom en spädd och neutral väteperoxidlösning. Den svavelsyra som bildas bestäms genom titrering med en standardlösning av natriumhydroxid. Fri svaveldioxid avlägsnas från vinet vid låg temperatur (10 °C).

Den totala svaveldioxiden avlägsnas från vinet vid hög temperatur (ca 100 °C).

Renad koncentrerad must

Den totala svaveldioxiden extraheras från den i förväg spädda renade koncentrerade musten vid hög temperatur (ca 100 °C).

2.1.2 Snabb bestämningsmetod (för vin och must)

Fri svaveldioxid bestäms genom direkt jodometrisk titrering.

Bunden svaveldioxid bestäms därefter genom jodometrisk titrering efter alkalisk hydrolys. När den bundna svaveldioxiden tillsätts den fria svaveldioxiden erhålls den totala svaveldioxidhalten.

2.2 Referensmetod

2.2.1 Apparatur

Den apparatur som används skall överensstämma med figuren nedan, i synnerhet vad gäller kylaren.

Figur 1 Måtten anges i mm. De fyra glasrör som utgör kylaren har en innerdiameter av 45, 34, 27 resp. 10 mm.

Röret för gastillförsel till bubbelflaskan B avslutas med en liten kula med diametern 1 cm som på sin största horisontella omkrets har 20 hål med diametern 0,2 mm. Alternativt kan röret avslutas med en platta av sintrat glas som ger ett stort antal mycket små bubblor vilket ger god kontakt mellan vätske- och gasfaserna.

Gasflödet genom apparaturen bör vara ca 40 l/h. Med flaskan till höger i figuren minskas det undertryck som vattenpumpen åstadkommer till 20-30 cm vatten. För att reglera detta undertryck så att ett korrekt värde erhålls installeras en flödesmätare med semikapillärt rör mellan bubbelflaskan och flaskan.

Mikrobyrett.

2.2.2 Reagenser

Fosforsyra, 85 % (H3PO4)(ρ20 = 1,71 g/ml).

Väteperoxidlösning, 9,1 g H2O2/l (3 volymer).

Indikatorreagens:

metylrött … 100 mg metylenblått … 50 mg alkohol, 50 % vol. … 100 ml

Natriumhydroxidlösning, NaOH, 0,01 M.

2.2.3 Metod

Bestämning av fri svaveldioxid

Vinet skall förvaras i en fylld och tillsluten flaska vid 20 °C i 2 dagar före bestämning.

Häll 2-3 ml väteperoxidlösning (2.2.2.2) och 2 droppar indikatorreagens i bubbelflaskan B och neutralisera väteperoxidlösningen med 0,01 M natriumhydroxidlösning (2.2.2.4). Anslut bubbelflaskan till apparaturen.

Häll i 50 ml av provet och 15 ml fosforsyra (2.2.2.1) i kolven A (som rymmer 250 ml) i apparaten. Kolven sätts på plats i apparaten. Bubbla luft (eller kvävgas) genom bubbelflaskan i 15 minuter. Den fria svaveldioxid som överförs oxideras till svavelsyra. Avlägsna bubbelflaskan från apparaten och titrera den syra som har bildats med 0,01 M natriumhydroxidlösning (2.2.2.4). Den använda volymen betecknas n ml.

Redovisning av resultaten

Den fria svaveldioxiden uttrycks i mg/l till närmaste heltal.

Beräkning

Den fria svaveldioxiden i mg/l är 6,4 n.

Bestämning av den totala svaveldioxidhalten

För renad koncentrerad must används den lösning som erhålls genom spädning av analysprovet till 40 % (w/v), såsom anges i kapitlet ”Total syrahalt”, punkt 5.1.2. Häll 50 ml av denna lösning och 5 ml fosforsyra (2.2.2.1) i kolv A (250 ml) i apparaten. Montera kolven i apparaten.

Vin och must

Om det beräknade innehållet i provet inte överstiger totalt 50 mg svaveldioxid per liter, hälls 50 ml av provet och 15 ml fosforsyra (2.2.2.1) i kolven A (250 ml) i apparaten. Sätt kolven på plats i apparaten.

T. o. m. den 31 augusti 1996 skall dock 5 ml av en 25 % lösning (w/v) av fosforsyra (2.2.2.1) användas för analys av svaveldioxidhalten i druvsaft.

Om det beräknade innehållet i provet överstiger totalt 50 mg SO2/l hälls 20 ml av provet och 5 ml fosforsyra (2.2.2.1) i kolven A (100 ml) i apparaten. Sätt kolven på plats i apparaten.

Häll 2-3 ml väteperoxidlösning (2.2.2.2) i bubbelflaskan B, som neutraliserats på samma sätt som tidigare, och låt vinet i kolv A koka upp över en liten låga (ca 4-5 cm hög) som når upp till kolvens botten. Ställ inte kolven på en metallplatta, utan på en skiva med ett hål med ca 30 mm diameter för att undvika överhettning av substanser som extraheras från vinet och som avsätts på kolvens väggar.

Låt koka medan en luft- eller kvävgasström förs igenom. Inom 15 minuter har den totala svaveldioxidhalten överförts och oxiderats. Bestäm den svavelsyra som har bildats genom titrering med 0,01 M natriumhydroxidlösning (2.2.2.4).

Den använda volymen betecknas n ml.

Redovisning av resultaten

Must och vin: den totala svaveldioxidhalten anges i mg/l. Renad koncentrerad must: den totala svaveldioxidhalten anges i mg/kg av totala sockermängden.

Beräkning

Vin och must Den totala svaveldioxidhalten i mg/l.

prov med låg svaveldioxidhalt (50 ml analysprov): 6,4 × n

andra prov (20 ml analysprov): 16 × n

Renad koncentrerad must Den totala svaveldioxidhalten i mg/kg av den totala sockermängden (50 ml berett analysprov) (2.2.3.3.1): 1600 × n P

P = den totala sockerhalten (w/w) i procent

Repeterbarhet (r)

50 ml analysprov < 50 mg/l: r = 1 mg/l.

20 ml analysprov > 50 mg/l: r = 6 mg/l.

Reproducerbarhet (r)

50 ml analysprov < 50 mg/l: R = 9 mg/l.

20 ml analysprov > 50 mg/l: R = 15 mg/l.

2.3 Snabbmetod för bestämning

2.3.1 Reagenser

EDTA (Complexone III:) dinatriumsalt av etendiamin-tetraättiksyra (C10H14N2O8NA2, 2H2O).

Natriumhydroxidlösning, NaOH, 4 M (160 g/l).

Svavelsyra, H2SO4 (ρ20 = 1,84 g/ml) (1:10 v/v).

Stärkelselösning, 5 g/l:

Blanda 5 g stärkelse med ca 500 ml vatten. Låt koka upp under omrörning och koka i 10 minuter. Tillsätt 200 g natriumklorid (NaCl). Fyll upp till 1 l efter kylning.

0,025 M jodlösning, I2.

2.3.2 Apparatur

500 ml koniska kolvar.

Byrett.

1, 2, 5 resp. 50 ml pipetter.

2.3.3 Metod

Fri svaveldioxid

Häll i en 500 ml konisk kolv:

50 ml vin,

5 ml stärkelselösning (2.3.1.4),

30 mg EDTA (2.3.1.1),

3 ml H2SO4, 1:10 (v/v) (2.3.1.3).

Titrera omedelbart med 0,025 M jod (2.3.1.5) till dess att en klar blåfärgning uppträder under 10-15 sekunder. Den använda volymen jod betecknas n ml.

Svaveldioxid

Tillsätt 8 ml 4 M natriumhydroxidlösning (2.3.1.2), skaka blandningen en gång och låt stå i 5 minuter. Tillsätt under kraftig omrörning hela innehållet i en liten bägare med 10 ml svavelsyra, 1:10 v/v (2.3.1.3). Titrera omedelbart med 0,025 M jod (2.3.1.5). Den använda volymen betecknas n” ml.

Tillsätt 20 ml 4 M natriumhydroxidlösning (2.3.1.2). Skaka om en gång och låt stå i 5 minuter. Späd med 200 ml iskallt vatten.

Tillsätt under kraftig omrörning hela innehållet i ett provrör innehållande 30 ml svavelsyra, 1:10 (v/v) (2.3.1.3). Titrera den fria svaveldioxiden omedelbart med 0,025 M jod (2.3.1.5). Den använda volymen betecknas n' ml.

2.3.4 Redovisning av resultaten

Beräkning:

Fri svaveldioxid i mg/l: 32 n.

Den totala svaveldioxidhalten i mg/l: 32 (n + n′ + n″).

Anmärkning:

1.För rödvin med en låg halt av SO2 bör jod som är mer utspätt än 0,025 M (t. ex. 0,01 M) användas. Byt då ut koefficienten 32 mot 12,8 i formlerna ovan.

2.Rödvin bör belysas underifrån med en stråle av gult ljus från en vanlig elektrisk glödlampa som får lysa genom en lösning av kaliumkromat, eller från en natriumlampa. Bestämningen skall utföras i ett mörkt rum och vinets transparens noteras. Vinet blir ogenomskinligt när slutpunkten nås.

3.Om mängden svaveldioxid ligger nära eller överskrider det tillåtna gränsvärdet, skall den totala svaveldioxidhalten bestämmas med referensmetoden.

4.Om en särskild bestämning av fri svaveldioxid krävs, utförs analysen på ett prov som före analys förvaras under anaeroba förhållanden i 2 dagar vid 20 °C. Utför bestämningen vid 20 °C.

5.

Eftersom vissa substanser oxideras av jod i ett surt medium skall den mängd jod som används på detta sätt fastställas för mer exakta bestämningar. Den fria svaveldioxiden kombineras då med överskottet av etanal eller propanal innan jodtitreringen utförs. Tillsätt 5 ml 7 g/l etanollösning (C2H4O) eller 5 ml av en 10 g/l propanallösning (C3H6O) till 50 ml vin i en 300 ml konisk kolv.

Sätt en propp i kolven och låt stå i minst 30 minuter. Tillsätt 3 ml svavelsyra, 1:10 v/v (2.3.1.3), och tillräckligt med 0,025 M jod (2.3.1.5) för att stärkelsen skall ändra färg. Den använda volymen jod betecknas n”'. Denna skall dras ifrån n (fri svaveldioxid) och n + n′ + n″ (den totala svaveldioxidhalten).

n‴ är oftast ett lågt värde, mellan 0,2 och 0,3 ml 0,025 M jod. Om askorbinsyra har tillsatts vinet, blir n‴ mycket högre och det är möjligt att åtminstone ungefärligt bestämma mängden av denna substans utifrån värdet för n‴, eftersom 1 ml 0,025 M jod oxiderar 4,4 mg askorbinsyra. Bestämning av n”' gör det ganska lätt att upptäcka förekomsten av restaskorbinsyra i större mängder än 20 mg/l i vin till vilka sådan syra har tillsatts.

3. MOLEKYLÄR SVAVELDIOXID

3.1 Princip

Mängden molekylär svaveldioxid, H2SO3, i procent i fri svaveldioxid beräknas som en funktion av pH, alkoholhalten och temperaturen.

För en given temperatur och alkoholhalt:

H2SO3 H+ + HSO3-(1)

H 2SO 3 = L 10 pH × pkM + 1

med

pKM = pK T - A 2I 1 + B 2I

L = [H2SO3] + [HCO3-]

där

I = jonstyrkan,

A och B = koefficienter som varierar med temperaturen och alkoholhalten,

KT = den termodynamiska dissociationskonstanten. Värden för pKT anges i tabell 1 för olika alkoholhalter och temperaturer,

KM = den blandade dissociationskonstanten.

Vid ett medelvärde av 0,038 för jonstyrkan I ger tabell 2 värden för pKM vid olika temperaturer och alkoholhalter.

Halten av molekylär svaveldioxid, beräknat med hjälp av formel (1), anges i tabell 3 vid olika värden för pH, temperatur och alkoholhalt.

3.2 Beräkning

När vinets pH-värde och alkoholhalt är kända kan halten i procent av molekylär svaveldioxid sökas i tabell 3 för en temperatur t °C. Detta värde betecknas X%.

Halten av molekylär svaveldioxid i mg/l är:

X × C

där C = halt av fri svaveldioxid i mg/l.

TABELL 1 Värden för den termodynamiska dissociationskonstanten pKT Alkoholhalt (% vol.) Temperatur(°C) 20 25 30 35 40 0 1,798 2,000 2,219 2,334 2,493 5 1,897 2,098 2,299 2,397 2,527 10 1,997 2,198 2,394 2,488 2,606 15 2,099 2,301 2,503 2,607 2,728 20 2,203 2,406 2,628 2,754 2,895

TABELL 2 Värden för den blandade dissociationskonstanten pKM (I= 0,038) Alkoholhalt (% vol.) Temperatur(°C) 20 25 30 35 40 0 1,723 1,925 2,143 2,257 2,416 5 1,819 2,020 2,220 2,317 2,446 10 1,916 2,116 2,311 2,405 2,522 15 2,014 2,216 2,417 2,520 2,640 20 2,114 2,317 2,538 2,663 2,803

TABELL 3 Molekylär svaveldioxid i procent av fri svaveldioxid pH T = 20 °C Alkoholhalt (% vol.) 0 5 10 15 20 2,8 7,73 9,46 11,55 14,07 17,09 2,9 6,24 7,66 9,40 11,51 14,07 3,0 5,02 6,18 7,61 9,36 11,51 3,1 4,03 4,98 6,14 7,58 9,36 3,2 3,22 3,99 4,94 6,12 7,58 3,3 2,58 3,20 3,98 4,92 6,12 3,4 2,06 2,56 3,18 3,95 4,92 3,5 1,64 2,04 2,54 3,16 3,95 3,6 1,31 1,63 2,03 2,53 3,16 3,7 1,04 1,30 1,62 2,02 2,53 3,8 0,83 1,03 1,29 1,61 2,02 T = 25 °C 2,8 11,47 14,23 17,15 20,67 24,75 2,9 9,58 11,65 14,12 17,15 22,71 3,0 7,76 9,48 11,55 14,12 17,18 3,1 6,27 7,68 9,40 11,55 14,15 3,2 5,04 6,20 7,61 9,40 11,58 3,3 4,05 4,99 6,14 7,61 9,42 3,4 3,24 4,00 4,94 6,14 7,63 3,5 2,60 3,20 3,97 4,94 6,16 3,6 2,07 2,56 3,18 3,97 4,55 3,7 1,65 2,05 2,54 3,18 3,98 3,8 1,32 1,63 2,03 2,54 3,18 T = 30 °C 2,8 18,05 20,83 24,49 29,28 35,36 2,9 14,89 17,28 20,48 24,75 30,29 3,0 12,20 14,23 16,98 20,71 25,66 3,1 9,94 11,65 13,98 17,18 21,52 3,2 8,06 9,48 11,44 14,15 17,88 3,3 6,51 7,68 9,30 11,58 14,75 3,4 5,24 6,20 7,53 9,42 12,08 3,5 4,21 4,99 6,08 7,63 9,84 3,6 3,37 4,00 4,89 6,16 7,98 3,7 2,69 3,21 3,92 4,95 6,44 3,8 2,16 2,56 3,14 3,98 5,19 T = 35 °C 2,8 22,27 24,75 28,71 34,42 42,18 2,9 18,53 20,71 24,24 29,42 36,69 3,0 15,31 17,18 20,26 24,88 31,52 3,1 12,55 14,15 16,79 20,83 26,77 3,2 10,24 11,58 13,82 17,28 22,51 3,3 8,31 9,42 11,30 14,23 18,74 3,4 6,71 7,63 9,19 11,65 15,49 3,5 5,44 6,16 7,44 9,48 12,71 3,6 4,34 4,95 6,00 7,68 10,36 3,7 3,48 3,98 4,88 6,20 8,41 3,8 2,78 3,18 3,87 4,99 6,80 T = 40 °C 2,8 29,23 30,68 34,52 40,89 50,14 2,9 24,70 26,01 29,52 35,47 44,74 3,0 20,67 21,83 24,96 30,39 38,85 3,1 17,15 18,16 20,90 25,75 33,54 3,2 14,12 14,98 17,35 21,60 28,62 3,3 11,55 12,28 14,29 17,96 24,15 3,4 9,40 10,00 11,70 14,81 20,19 3,5 7,61 8,11 9,52 12,13 16,73 3,6 6,14 6,56 7,71 9,88 13,77 3,7 4,94 5,28 6,22 8,01 11,25 3,8 3,97 4,24 5,01 6,47 9,15

26. NATRIUM

1. PRINCIPER FÖR METODERNA

1.1 Referensmetod: atomabsorptionsspektrofotometri

Natrium bestäms direkt i vinet genom atomabsorptionsspektrofotometri efter tillsats av en joniseringsdämpande reagens (cesiumklorid) som förhindrar jonisering av natrium.

1.2 Rutinmetod: flamfotometri

Natrium bestäms direkt i utspätt vin (minst 1:10) med flamfotometri.

2. REFERENSMETOD

2.1 Reagenser

2.1.1 Lösning innehållande 1 g natrium/l

Använd en standardlösning som finns i handeln med en halt av 1 g natrium/l. Denna lösning kan beredas genom att 2,542 g vattenfri natriumklorid, NaCl, löses i destillerat vatten och späds till en volym av 1 l.

Förvara denna lösning i en flaska av polyeten.

2.1.2 Modellösning

Citronsyra, C6H8O7, H2O … 3,5 g Sackaros, C12H22O11 … 1,5 g Glycerol, C3H8O3 … 5,0 g Vattenfri kalciumklorid, CaCl2 … 50 mg Vattenfri magnesiumklorid, MgCl2 … 50 mg Absolut alkohol, C2H5OH … 50 ml Avjoniserat vatten till … 500 ml

2.1.3 Cesiumkloridlösning innehållande 5 % cesium

Lös 6,330 g cesiumklorid, CsCl, i 100 ml destillerat vatten.

2.2 Apparatur

Atomabsorptionsspektrofotometer med luftacetylenbrännare.

Natriumhålkatodlampa.

2.3 Metod

2.3.1 Beredning av provet

Sug upp 2,5 ml vin med pipett i en 50 ml mätkolv. Tillsätt 1 ml cesiumkloridlösning (2.1.3) och fyll upp till märket med destillerat vatten.

2.3.2 Kalibrering

Häll 5,0 ml av modellösningen i var och en av en serie 100 ml mätkolvar och tillsätt 0; 2,5; 5,0; 7,5 resp. 10 ml av 1 g/l natriumlösning (2.1.1) som har spätts i förväg till 1:100. Tillsätt 2 ml cesiumkloridlösning (2.1.3) till respektive kolv och fyll upp till 100 ml med destillerat vatten.

De standardlösningar som bereds på detta sätt innehåller 0; 0,25; 0,50; 0,75 resp. 1,0 mg natrium/l och var och en innehåller ett gram cesium per liter. Förvara lösningarna i flaskor av polyeten.

2.3.3 Bestämning

Ställ in våglängden på 589,0 nm. Nollställ absorbansskalan med den modellösning som innehåller 1 g cesium per liter (2.3.2). Sug upp det utspädda vinet direkt i spektrofotometerns brännare och därefter de olika standardlösningarna (2.3.2). Läs av absorbansvärdena. Upprepa varje bestämning.

2.4 Redovisning av resultaten

2.4.1 Beräkningsmetod

Rita en kurva som visar absorbansen som en funktion av natriumhalten i standardlösningarna.

Notera den absorbans som erhålls med det utspädda vinet och bestäm dess natriumhalt C i mg/l.

Natriumhalten i mg/l i vinet blir då 20 × C, utan decimaler.

2.4.2 Repeterbarhet (r)

r = 1 + 0,024xi mg/l.

xi = natriumhalten i provet i mg/l.

2.4.3 Reproducerbarhet (R)

R = 2,5 + 0,05xi mg/l.

xi = natriumhalten i provet i mg/l.

Rutinmetod

3.1 Reagenser

3.1.1 Referenslösning innehållande 20 mg natrium per liter

Absolut alkohol (C2H5OH) … 10 ml Citronsyra (C6H8O7, H2O) … 700 mg Sackaros (C12H22O11) … 300 mg Glycerol (C3H8O3) … 1000 mg Kaliumvätetartrat (C4H5KO6) … 481,3 mg Vattenfri kalciumklorid, (CaCl2) … 10 mg Vattenfri magnesiumklorid (MgCl2) … 10 mg Torr natriumklorid (NaCl) … 50,84 mg Vatten till … 1 l

3.1.2 Lösning för spädning

Absolut alkohol (C2H5OH) … 10 ml Citronsyra (C6H8O7, H2O) … 700 mg Sackaros (C12H22O11) … 300 mg Glycerol (C3H8O3) … 1000 mg Kaliumvätetartrat (C4H5KO6) … 481,3 mg Vattenfri kalciumklorid, (CaCl2) … 10 mg Vattenfri magnesiumklorid (MgCl2) … 10 mg Vatten till … 1 l

Lösningarna 3.1.1 och 3.1.2 bereds genom att kaliumvätetartrat löses i ca 500 ml mycket hett destillerat vatten och blandas med 400 ml destillerat vatten, i vilket övriga kemikalier redan har lösts. Fyll upp till 1 liter.

Förvara lösningarna i flaskor av polyeten med en tillsats av 2 droppar allylisotiocyanat.

3.2 Apparatur

Flamfotometer som tillförs en blandning av luft och butan.

3.3 Metod

3.3.1 Kalibrering

Häll 5, 10, 15, 20 resp. 25 ml av referenslösningen (3.1.1) i 100 ml mätkolvar och fyll upp till 100 ml med lösningen för spädning (3.1.2). På detta sätt erhålls lösningar med 1, 2, 3, 4 resp. 5 mg natrium per liter.

3.3.2 Bestämning

Utför bestämningen vid 589,0 nm. Justera till 100 % transmission med destillerat vatten. Sug upp standardlösningarna successivt (3.3.1) direkt i fotometerns brännare och därefter vin som är spätt 1:10 med destillerat vatten och läs av transmissionen i procent. Vid behov kan det redan spädda vinet 1:10 spädas ytterligare med lösningen för spädning (3.1.2).

3.4 Redovisning av resultaten

3.4.1 Beräkningsmetod

Rita en kurva som visar transmissionens variation i procent med halten av natrium i standardlösningarna. Anteckna den transmission som kurvan visar för provet med utspätt vin och läs av den motsvarande natriumkoncentration C.

Natriumkoncentration i mg/l blir då F × C,

där F är spädningsfaktorn.

3.4.2 Repeterbarhet (r)

r = 1,4 mg/l (med undantag av starkvin)

r = 2,0 mg/l för starkvin.

3.4.3 Reproducerbarhet (R)

R = 4,7 + 0,08xi mg/l.

xi = natriumkoncentration i provet i mg/l.

27. KALIUM

1. PRINCIPER FÖR METODERNA

1.1 Referensmetod

Kalium bestäms direkt i det utspädda vinet med atomabsorptionsspektrofotometri efter tillsats av en joniseringsdämpande substans (cesiumklorid) för att förhindra jonisering av kalium.

1.2 Rutinmetod

Kalium bestäms direkt i det utspädda vinet med flamfotometri.

2. REFERENSMETOD

2.1 Reagenser

2.1.1 Lösning innehållande 1 g kalium per liter

Använd en standardlösning som finns i handeln med 1 g kalium per liter. Denna lösning kan beredas genom att 4,813 g kaliumvätetartrat (C4H5KO6) löses i destillerat vatten och späds till en volym av 1 l.

2.1.2 Modellösning

Citronsyra, C6H8O7, H2O … 3,5 g Sackaros, C12H22O11 … 1,5 g Glycerol, C3H8O3 … 5,0 g Vattenfri kalciumklorid, CaCl2 … 50 mg Vattenfri magnesiumklorid, MgCl2 … 50 mg Absolut alkohol, C2H5OH … 50 ml Vatten till … 500 ml

2.1.3 Cesiumkloridlösning innehållande 5 % cesium

Lös 6,330 g cesiumklorid, CsCl, i 100 ml destillerat vatten.

2.2 Apparatur

Atomabsorptionsspektrofotometer med luftacetylenbrännare.

Kaliumhålkatodlampa.

2.3. Metod

2.3.1 Beredning av provet

Pipettera 2,5 ml vin (i förväg spätt 1:10) i en 50 ml mätkolv. Tillsätt 1 ml cesiumkloridlösning (2.1.3) och fyll upp till märket med destillerat vatten.

2.3.2 Kalibrering

Häll 5,0 ml av modellösningen (2.1.2) i var och en av en serie 100 ml mätkolvar och tillsätt 0; 2,0; 4,0; 6,0 resp. 8,0 ml av 1 g/l kaliumlösning (2.1.1) som har spätts i förväg till 1:10. Tillsätt 2 ml cesiumkloridlösning (2.1.3) till respektive kolv och fyll upp till 100 ml med destillerat vatten.

De standardlösningar som bereds på detta sätt innehåller 0, 2, 4, 6 resp. 8 mg kalium per liter och var och en innehåller ett gram cesium per liter. Förvara lösningarna i flaskor av polyeten.

2.3.3 Bestämning

Ställ in våglängden på 769,9 nm. Nollställ absorbansskalan med den modellösning som innehåller 1 g cesium per liter (2.3.1). Sug upp det utspädda vinet direkt i spektrofotometerns brännare och därefter de olika standardlösningarna (2.3.2). Läs av absorbansvärdena. Upprepa varje bestämning.

2.4 Redovisning av resultaten

2.4.1 Beräkningsmetod

Rita en kurva över absorbansvariationen som en funktion av kaliumhalten i standardlösningarna.

Notera medelvärdet för absorbansen som erhålls med det spädda vinprovet på denna kurva och bestäm kaliumhalten C i mg/l.

Kaliumhalten uttryckt i mg/l i vinet utan decimaler blir då F × C,

där F är spädningsfaktorn (här 200).

2.4.2 Repeterbarhet (r)

r = 35 mg/l.

2.4.3 Reproducerbarhet (R)

R = 66 mg/l.

2.4.4 Andra sätt att redovisa resultatet

I mval/l: 0,0256 × F × C

I mg kaliumvätetartrat/l: 4,813 × F × C

3. RUTINMETOD: FLAMFOTOMETRI

3.1 Reagenser

3.1.1 Referenslösning innehållande 100 mg kalium/l

Absolut alkohol (C2H5OH) … 10 ml Citronsyra (C6H8O7, H2O) … 700 mg Sackaros (C12H22O11) … 300 mg Glycerol (C3H8O3) … 1000 mg Natriumklorid (NaCl) … 50,8 mg Vattenfri kalciumklorid (CaCl2) … 10 mg Vattenfri magnesiumklorid (MgCl2) … 10 mg Torrt kaliumvätetartrat (C4H5KO6) … 481,3 mg Vatten till … 1000 ml

Lös kaliumvätetartrat i 500 ml mycket hett destillerat vatten, blanda lösningen med 400 ml destillerat vatten i vilket övriga kemikalier redan har lösts och späd till 1 liter.

3.1.2 Lösning för spädning

Absolut alkohol (C2H5OH) … 10 ml Citronsyra (C6H8O7, H2O) … 700 mg Sackaros (C12H22O11) … 300 mg Glycerol (C3H8O3) … 1000 mg Natriumklorid (NaCl) … 50,8 mg Vattenfri kalciumklorid (CaCl2) … 10 mg Vattenfri magnesiumklorid (MgCl2) … 10 mg Vinsyra (C4H6O6) … 383 mg Vatten till … 1000 ml

Förvara lösningarna i flaskor av polyeten med tillsats av två droppar allylisotiocyanat.

3.2 Apparatur

Flamfotometer som tillförs en blandning av luft och butan.

3.3 Metod

3.3.1 Kalibrering

Häll 25, 50, 75 resp. 100 ml av referenslösningen (3.1.1) i en serie 100 ml mätkolvar och fyll upp till 100 ml med lösningen för spädning (3.1.2). På detta sätt erhålls lösningar med 25, 50, 75 resp. 100 mg natrium per liter.

3.3.2 Bestämning

Utför bestämningen vid 766 nm. Justera till 100 % transmission med destillerat vatten. Sug upp standardlösningarna successivt (3.3.1) direkt i fotometerns brännare och därefter vin spätt 1:10 med destillerat vatten och läs av transmissionen i procent. Vid behov kan det redan spädda vinet 1:10 spädas ytterligare med lösningen för spädning (3.1.2).

3.4 Redovisning av resultaten

3.4.1 Beräkningsmetod

Rita en kurva som visar transmissionens variation i procent med halten av kalium i standardlösningarna. Anteckna den transmission som kurvan visar för provet med utspätt vin och läs av den motsvarande kaliumkoncentrationen C.

Kaliumkoncentrationen i mg/l, beräknad till närmaste heltal, blir då

F × C

där F är spädningsfaktorn.

3.4.2 Repeterbarhet (r)

r = 17 mg/l.

3.4.3 Reproducerbarhet (R)

R = 66 mg/l.

3.4.4 Andra sätt att redovisa resultatet:

i mval/l: 0,0256 × F × C

i mg kaliumvätetartrat per liter: 4,813 × F × C.

28. MAGNESIUM

1. PRINCIP FÖR METODEN

Magnesium bestäms direkt i vinet, som har spätts på lämpligt sätt, med atomabsorptionsspektrofotometri.

2. REAGENSER

2.1 Koncentrerad standardlösning innehållande 1 g/l magnesium

Använd en standardlösning av magnesium (1 g/l) som finns i handeln. Denna lösning kan beredas genom att 8,3646 g magnesiumklorid (MgCl2, 6H2O) löses i destillerat vatten och späds till 1 liter.

2.2 Spädd standardlösning innehållande 5 mg/l magnesium.

Anmärkning: Förvara standardmagnesiumlösningen i flaskor av polyeten.

3. APPARATUR

Atomabsorptionsspektrofotometer med luftacetylenbrännare.

Magnesiumhålkatodlampa.

4. METOD

4.1 Beredning av provet

Späd vinet 1:100 med destillerat vatten.

4.2 Kalibrering

Häll 5, 10, 15 resp. 20 ml av den spädda standardmagnesiumlösningen (2.2) i var och en av en serie 100 ml mätkolvar och fyll upp till 100 ml med destillerat vatten. Standardlösningar som bereds på detta sätt innehåller 0,25; 0,50; 0,75 resp. 1,0 mg magnesium per liter. Lösningarna skall förvaras i flaskor av polyeten.

4.3 Bestämning

Ställ in våglängden på 285 nm. Nollställ absorbansskalan med destillerat vatten. Sug upp det spädda vinet direkt i spektrofotometerns brännare och därefter de olika standardlösningarna (4.2).

Läs av absorbansvärderna. Upprepa bestämningen en gång.

5. REDOVISNING AV RESULTATEN

5.1 Beräkningsmetod

Rita en kurva över absorbansvariationen som en funktion av magnesiumhalten i standardlösningarna.

Anteckna medelvärdet för den absorbans som kurvan visar för det utspädda vinprovet och läs av den motsvarande magnesiumkoncentrationen C.

Magnesiumhalten i mg/l i vinet utan decimaler blir

100 × C.

5.2 Repeterbarhet (r)

r = 3 mg/l.

5.3 Reproducerbarhet (R)

R = 8 mg/l.

29. KALCIUM

1. PRINCIP FÖR METODEN

Kalcium bestäms direkt i vinet, som har spätts på lämpligt sätt, med atomabsorptionsspektrofotometri efter tillsats av en joniseringsdämpande substans.

2. REAGENSER

2.1 Standardlösning innehållande 1 g/l kalcium

Använd en standardlösning av kalcium 1 g/l som finns i handeln. Denna lösning kan beredas genom att 2,5 g kalciumkarbonat, CaCO3, löses i en mängd HCl, spädd 1:10 (v/v), som är tillräcklig för att kalciumkarbonatet skall lösas fullständigt. Fyll upp till 1 liter med destillerat vatten.

2.2 Spädd standardlösning innehållande 50 mg/l kalcium

Anmärkning: Förvara standardlösningar av kalcium i flaskor av polyeten.

2.3 Lantankloridlösning innehållande 50 g/l lantan

Lös 13,369 g lantanklorid, LaCl3, 7H2O, i destillerat vatten. Tillsätt 1 ml HCl, spädd 1:10 (v/v), och fyll upp till 100 ml.

3. APPARATUR

Atomabsorptionsspektrofotometer med luftacetylenbrännare.

Kalciumhålkatodlampa.

4. METOD

4.1 Beredning av provet

Häll 1 ml av vinet och 2 ml lantankloridlösning (2.3) i en 20 ml mätkolv och fyll upp till märket med destillerat vatten. Vinet, spätt 1:20, innehåller 5 g lantan/l.

Anmärkning: För söta viner är en lantankoncentration på 5 g/l tillräcklig, under förutsättning att spädningen inte innebär att sockerhalten sjunker under 2,5 g/l. För viner med högre sockerhalt bör lantankoncentrationen ökas till 10 g/l.

4.2 Kalibrering

Häll 0, 5, 10, 15 och 20 ml av den spädda standardlösningen av kalcium (2.2) i en serie 100 ml mätkolvar. Tillsätt till vardera kolven 10 ml av lantankloridlösningen (2.3) och fyll upp till 100 ml med destillerat vatten. Lösningar som bereds på detta sätt innehåller 0; 2,5; 5,0; 7,5 resp. 10 mg kalcium per liter och 5 gram lantan per liter. Lösningarna skall förvaras i flaskor av polyeten.

4.3 Bestämning

Ställ in våglängden på 422,7 nm. Nollställ absorbansskalan med den lösning som innehåller 5 gram lantan per liter (4.2). Sug upp det spädda vinet direkt i spektrofotometerbrännaren och därefter i följd de fem standardlösningarna (4.2). Läs av absorbansvärdena och upprepa varje bestämning en gång.

5. REDOVISNING AV RESULTATEN

5.1 Beräkningsmetod

Rita en kurva över absorbansvariationen som en funktion av kalciumkoncentrationen i standardlösningarna.

Anteckna medelvärdet för den absorbans som kurvan visar för det utspädda vinprovet och bestäm motsvarande kalciumkoncentration C för vin. Kalciumkoncentrationen i mg/l vin utan decimaler blir

20 × C.

5.2 Repeterbarhet (r)

Halt < 60 mg/l: r = 2,7 mg/l.

Halt > 60 mg/l: r = 4 mg/l.

5.3 Reproducerbarhet (R)

R = 0,114 xi - 0,5.

xi = halten i provet i mg/l.

30. JÄRN

1. PRINCIPER FÖR METODERNA

1.1 Referensmetod

Efter det att vinet har spätts på lämpligt sätt och alkoholen avlägsnats bestäms järnet direkt med atomabsorptionsspektrofotometri.

Rutinmetod

Efter uppslutning i 30 % väteperoxidlösning reduceras den totala halten av järn, som nu är i form av Fe(III), till Fe(II) och bestäms på grundval av den röda färg som erhålls med ortofenantrolin.

2. REFERENSMETOD

2.1 Reagenser

Koncentrerad standardjärnlösning innehållande 1 gram Fe(III) per liter.

Använd en standardlösning (1 g/l) som finns i handeln. Denna lösning kan beredas genom att 8,6341 g järn(III)ammoniumsulfat (FeNH4(SO4)2 · 12H2O löses i destillerat vatten som har gjorts svagt surt med 1 M saltsyra och späds till 1 liter.

Spädd standardjärnlösning innehållande 100 mg järn/l.

2.2 Apparatur

Roterande indunstningapparat med ett termostatiskt reglerat vattenbad.

Atomabsorptionsspektrofotometer med luftacetylenbrännare.

Järnhålkatodlampa.

2.3 Metod

2.3.1 Beredning av provet

Avlägsna alkoholen från vinet genom att reducera provvolymen till hälften i en roterande indunstningsapparat (50 - 60 °C). Späd till den ursprungliga volymen med destillerat vatten.

Vid behov görs spädningen före bestämningen.

2.3.2 Kalibrering

Häll 1, 2, 3, 4 resp. 5 ml av lösningen med 100 mg järn/l (2.1.2) i en serie 100 ml mätkolvar och fyll upp till 100 ml med destillerat vatten. Lösningar som bereds på detta sätt innehåller 1, 2, 3, 4 resp. 5 mg järn per liter.

Lösningarna skall förvaras i flaskor av polyeten.

2.3.3 Bestämning

Ställ in våglängden på 248,3 nm. Nollställ absorbansskalan med destillerat vatten. Sug upp det spädda provet direkt i spektrofotometerns brännare och därefter de fem standardlösningarna (2.3.2). Läs av absorbansvärdena. Upprepa varje bestämning en gång.

2.4 Redovisning av resultaten

2.4.1 Beräkningsmetod

Rita en kurva över absorbansvariationen som en funktion av järnkoncentrationen i standardlösningarna. Anteckna medelvärdet för den absorbans som kurvan visar för det spädda vinprovet och bestäm dess järnkoncentration C.

Järnkoncentrationen i mg/l i vinet med en decimal blir:

F × C

där F är spädningsfaktorn.

3. RUTINMETOD

3.1 Reagenser

Väteperoxidlösning, H2O2, 30 % (w/v), järnfri.

1 M saltsyra, järnfri.

Ammoniumhydroxid (ρ20 = 0,92 g/ml).

Korn av pimpsten som behandlats med kokande saltsyra i spädning 1:2 och tvättats med destillerat vatten.

2,5 % hydrokinonlösning (C6H6O2) som surgjorts med 1 ml koncentrerad svavelsyra (ρ20 = 1,84 mg/l) per 100 ml lösning. Lösningen skall förvaras i en gul flaska i kylskåp och kasseras vid minsta tecken på att den mörknar.

20 % natriumsulfitlösning (Na2SO3) beredd av neutral vattenfri natriumsulfit.

0,5 % ortofenantrolinlösning (C12O8N2, H2O) i 96 % vol. alkohol.

20 % (w/v) ammoniumacetatlösning (CH3COONH4).

Fe(III)-lösning med 1 g järn/l. Använd en lösning som finns i handeln. Eventuellt kan en Fe(III)-lösning,1000 mg/l, beredas genom att 8,6341 g järn(III)ammoniumsulfat (FeNH4(SO4)2, 12 H2O) löses i 100 ml 1 M saltsyra (3.1.2) och späds till en volym av 1 liter med 1 M saltsyra (3.1.2).

Spädd standardjärnlösning innehållande 100 mg järn/l.

3.2 Apparatur

Kjeldahlkolv, 100 ml.

Spektrofotometer för bestämning vid en våglängd av 508 nm.

3.3 Metod

3.3.1 Uppslutning

Vin med en sockerhalt som ligger under 50 g/l:

Häll 25 ml av vinet, 10 ml av väteperoxidlösningen (3.1.1) och några korn pimpsten (3.1.4) i en 100 ml Kjeldahlkolv. Koncentrera blandningen till en volym på 2-3 ml.

Låt svalna. Se till att kolvens väggar inte blir våta och tillsätt tillräckligt med ammoniumhydroxid (3.1.3) till resten för att göra vätskan alkalisk så att eventuella hydroxider fälls ut.

Efter kylning tillsätts 1 M saltsyra (3.1.2) till den alkaliska vätskan i en mängd som är tillräcklig för att lösa de utfällda hydroxiderna. Överför den lösning som erhålls till en 100 ml mätkolv. Skölj Kjeldahlkolven med 1 M saltsyra (3.1.2) och tillsätt sköljvätskan till mätkolven så att volymen blir 100 ml.

Must och vin med en sockerhalt som ligger över 50 g/l

Om sockerhalten är mellan 50 och 200 g/l behandlas vinprovet på 25 ml med 20 ml väteperoxidlösning (3.1.1).

Fortsätt som i 3.3.1.1.

Om sockerhalten ligger över 200 g/l bör vinprovet eller musten spädas 1:2 eller möjligen 1:4 före behandling enligt 3.3.1.2.1.

3.3.2 Nollprov

Utför ett nollprov med destillerat vatten med samma volym väteperoxidlösning (3.1.1.) som den som använts för uppslutning och följ samma metod som i 3.3.1.1.

3.3.3 Bestämning

Häll 20 ml av den saltsyralösning som erhålls genom uppslutning (3.3.1.1) och 20 ml av saltsyralösningen från ”nollprovet” (3.3.2) i två separata 50 ml mätkolvar. Tillsätt 2 ml hydrokinonlösning (3.1.5), 2 ml sulfitlösning (3.1.6) och 1 ml ortofenantrolinlösning (3.1.7) till respektive kolv. Låt stå i 15 min. så att Fe(III) reduceras till Fe(II). Tillsätt 10 ml ammoniumacetatlösning (3.1.8) och fyll upp till 50 ml med destillerat vatten. Skaka om de båda mätkolvarna. Använd lösningen från ”nollprovet” för att nollställa absorbansskalan vid 508 nm och mät analyslösningens absorbans vid samma våglängd.

3.3.4 Kalibrering

Häll 0,5; 1; 1,5 resp. 2 ml av lösningen med 100 mg järn/l (3.1.10) i en serie 50 ml mätkolvar och tillsätt 20 ml destillerat vatten till vardera kolven. Följ det förfarande som beskrivs i 3.3.3 för att bestämma absorbansen för de olika standardlösningarna med en järnhalt av 50, 100, 150 resp. 200 μg.

3.4 Redovisning av resultaten

3.4.1 Beräkningsmetod

Rita en kurva över absorbansvariationen som en funktion av järnkoncentrationen i standardlösningarna. Notera den absorbans som erhålls med provlösningen och beräkna järnkoncentrationen C i det saltsyraprov på 20 ml som erhålls genom uppslutning, dvs. i 5 ml av det vinprov som skall analyseras.

Järnkoncentrationen i mg/l i vinet med en decimal blir

200 × C.

Om vinet (eller musten) har spätts blir järnkoncentrationen i mg/l med en decimal:

200 × F × C

där F är spädningsfaktorn.

31. KOPPAR

1. PRINCIP FÖR METODEN

Metoden baseras på atomabsorptionsspektrofotometri.

2. APPARATUR

Skål av platina.

Atomabsorptionsspektrofotometer.

Kopparhålkatodlampa.

Gasförsörjning: luft/acetylen eller dikväveoxid/acetylen.

3. REAGENSER

Metallisk koppar.

Koncentrerad 65 % salpetersyra (HNO3, ρ20 = 1,38 g/ml).

Spädd salpetersyra, 1:2 (v/v).

3.4. Kopparlösning, 1g/l.

Använd en standardkopparlösning som finns i handeln. Denna lösning kan beredas genom att 1,000 g metallisk koppar vägs och överförs utan att någon koppar går förlorad till en 1000 ml mätkolv. Tillsätt spädd salpetersyra, 1:2 (v/v) (3.3), i en mängd som är tillräcklig för att lösa metallen. Tillsätt 10 ml koncentrerad salpetersyra (3.2) och fyll upp till märket med dubbeldestillerat vatten.

3.5. Kopparlösning, 100 mg/l.

Häll 10 ml av den lösning som beretts enligt 3.4 i en 100 ml mätkolv och fyll upp till märket med dubbeldestillerat vatten.

4. METOD

4.1 Beredning av provet och bestämning av koppar

Vid behov bereds en lämpligt spädd lösning med dubbeldestillerat vatten.

4.2 Kalibrering

Sug med pipett upp 0,5, 1 resp. 2 ml av lösning 3.5 (100 mg koppar/l) i 100 ml mätkolvar och fyll upp till 100 ml med dubbeldestillerat vatten. De lösningar som erhålls innehåller 0,5; 1 resp. 2 mg koppar per liter.

4.3. Bestämning

Mät absorbansen vid 324,8 nm. Nollställ med dubbeldestillerat vatten. Bestäm absorbansen direkt för standardlösningar som beretts enligt 4.2. Utför bestämningarna två gånger.

5. REDOVISNING AV RESULTATEN

5.1 Beräkningsmetod

Rita en kurva som visar absorbansvariationen som en funktion av kopparkoncentrationen i standardlösningarna.

Läs av koncentrationen C i mg/l från kalibreringskurvan med hjälp av den absorbans som har bestämts för proverna.

Om F är spädningsfaktorn anges kopparkoncentrationen i mg/l av F × C. Halten anges med två decimaler.

Anmärkning:

a) Lösningarna för kalibreringskurvan och spädningarna av proven skall väljas så att de motsvarar den använda apparaturens känslighet och kopparkoncentrationen i provet.

b) Fortsätt enligt följande när mycket låga kopparkoncentrationer förväntas i analysprovet. Häll 100 ml av provet i en platinaskål och indunsta över vattenbad vid 100 °C tills vätskan blir sirapsliknande. Tillsätt 2,5 ml koncentrerad salpetersyra (3.2) droppvis, så att det blir en bottenskyla i skålen. Glödga försiktigt resten på en elektrisk värmeplatta eller över en låga. Placera därefter skålen i en muffelugn inställd på 500 ± 25 °C och låt stå i ca 1 timme. Efter kylning fuktas askan med 1 ml koncentrerad salpetersyra (3.2) samtidigt som den krossas med en glasstav. Låt blandningen indunsta och låt den inaskas igen på samma sätt som i föregående steg. Ställ in skålen i muffelugnen igen i 15 minuter. Upprepa behandlingen med salpetersyra minst tre gånger. Lös askan genom att tillsätta 1 ml koncentrerad salpetersyra (3.2) och 2 ml dubbeldestillerat vatten till skålen och överför till en 10 ml kolv. Tvätta skålen 3 gånger med 2 ml dubbeldestillerat vatten varje gång. Slutligen fylls kolven upp till märket med dubbeldestillerat vatten.

32. KADMIUM

1. PRINCIP

Kadmium bestäms direkt i vinet med flamlös atomabsorptionsspektrofotometri.

2. APPARATUR

All glasapparatur skall tvättas före användning i koncentrerad salpetersyra som upphettas till 70-80 °C och därefter sköljas i dubbeldestillerat vatten.

Atomabsorptionsspektrofotometer med grafitugn, bakgrundskorrektion och multipotentiometer.

Kadmiumhålkatodlampa.

5 μl mikropipetter med specialmunstycken för atomabsorptionsbestämning.

3. REAGENSER

Det vatten som används i apparatur av borosilikatglas skall vara dubbeldestillerat eller av likvärdig renhetsgrad. Alla reagenser skall vara av analytisk kvalitet och skall i synnerhet vara fria från kadmium.

85 % fosforsyra (ρ20 = 1,71 g/ml).

Fosforsyralösning som erhålls genom att 8 ml fosforsyra späds med vatten till 100 ml.

0,02 M lösning av dinatriumsalt av etylendiamin-tetraättiksyra (EDTA).

Buffertlösning, pH 9: lös 5,4 g ammoniumklorid i några ml vatten i en 100 ml mätkolv. Tillsätt 35 ml ammoniumhydroxidlösning (ρ20 = 0,92 g/ml), spädd till 25 % (v/v), och fyll upp till 100 ml med vatten.

Eriokromsvart T: 1 % (w/w), fast lösning i natriumklorid.

3.6. Kadmiumsulfat (CdSO4, 8 H2O).

Kadmiumsulfatet verifieras med följande metod:

Väg upp exakt 102,6 mg av kadmiumsulfatprovet i ett cylindriskt kärl med lite vatten och skaka till dess att substansen är löst. Tillsätt 5 ml av buffertlösningen med pH 9 och ca 20 mg eriokromsvart T. Titrera med EDTA-lösningen till dess att indikatorn slår om till blått.

Den EDTA-volym som tillsätts skall vara 20 ml. Om volymen avviker något skall den vägda mängden kadmiumsulfat som används vid beredning av referenslösningen korrigeras på motsvarande sätt.

3.7. Kadmiumreferenslösning, 1 g/l.

Använd en standardlösning som finns i handeln. Denna lösning kan beredas genom att 2,2820 g kadmiumsulfat löses i vatten och späds till 1 l. Förvara lösningen i en flaska av borsilikatglas med en propp av slipat glas.

4. METOD

4.1 Beredning av provet

Späd vinet 1:2 (v/v) med fosforsyralösningen.

4.2 Beredning av kalibreringslösningar

Bered spädningar med en halt av 2,5; 5; 10 resp. 15 μg kadmium/l från kadmiumreferenslösningen.

4.3 Bestämning

4.3.1 Programmering av ugn (endast som vägledning):

Torkning vid 100 °C i 30 sekunder.

Mineralisering vid 900 °C i 20 sekunder.

Atomisering vid 2250 °C i 2-3 sekunder.

Kvävgasgenomströmning: 6 l/minut.

Anmärkning:

Öka temperaturen till 2700 °C i slutet för att rengöra ugnen.

4.3.2 Atomabsorptionsbestämning

Välj våglängden 228,8 nm. Nollställ absorbansskalan med dubbeldestillerat vatten. Använd en mikropipett för att spruta in tre volymer på 5 μl av kalibreringslösningarna och av provlösningen i ugnen. Notera de uppmätta absorbanserna. Beräkna medelvärdet för absorbansen utifrån resultatet för de tre insprutningarna.

5. REDOVISNING AV RESULTATEN

5.1 Beräkningsmetod

Rita kurvan över absorbansvariationen som en funktion av kadmiumkoncentrationen i kalibreringslösningarna. Variationen är linjär. Rita in medelabsorbansen för provlösningen på kalibreringskurvan och härled koncentrationen av kadmium C från denna. Kadmiumkoncentrationen i μg/l vin är lika med:

2 C

33. SILVER

1. PRINCIP FÖR METODEN

Metoden baseras på atomabsorptionsspektrofotometri efter mineralisering av provet.

2. APPARATUR

Skål av platina.

Vattenbad, termostatiskt reglerat till 100 °C.

Ugn inställd på 500 - 525 °C.

Atomabsorptionsspektrofotometer.

Silverhålkatodlampa.

Gastillförsel: luft, acetylen.

3. REAGENSER

Silvernitrat (AgNO3).

Koncentrerad salpetersyra (HNO3) 65 % (ρ20 = 1,38 g/ml).

Spädd salpetersyra, 1:10 (v/v).

3.4. Silverlösning, 1 g/l

Använd en standardsilverlösning som finns i handeln.

Lösningen kan beredas genom att 1,575 g silvernitrat löses i spädd salpetersyra och späds till en volym på 1000 ml med spädd salpetersyra (3.3).

3.5. Silverlösning, 10 mg/l.

10 ml av lösningen enligt 3.4 späds i 1000 ml med spädd salpetersyra.

4. METOD

4.1 Beredning av provet

Häll 20 ml av provet i en platinaskål och indunsta fullständigt över kokande vattenbad. Mineralisera i ugnen vid 500-525 °C. Fukta den vita askan med 1 ml koncentrerad salpetersyra (3.2.. Indunsta över kokande vattenbad och tillsätt än en gång 1 ml salpetersyra (3.2) och indunsta en andra gång. Tillsätt 5 ml spädd salpetersyra (3.3) och värm försiktigt till dess att allt är löst.

4.2 Kalibrering

Pipettera 2; 4; 6; 8; 10 resp. 20 ml av lösning 3.5 (10 mg silver/l) i en serie 100 ml mätkolvar och fyll upp till märket med spädd salpetersyra (3.3). Dessa lösningar innehåller 0,20; 0,40; 0,60; 0,80; 1,0 resp. 2,0 mg silver/l.

4.3. Bestämning

Ställ in våglängden 328,1 nm. Nollställ med spädd salpetersyra (3.3). Bestäm absorbansen genom att suga upp provet enligt 4.1 i spektrofotometerns brännare och därefter de beredda standardlösningarna. Läs av absorbansvärdena. Utför bestämningen två gånger.

5. REDOVISNING AV RESULTATEN

5.1 Beräkningsmetod

Rita en kurva över absorbansvariationerna som en funktion av silverkoncentrationen i standardlösningarna.

Använd den uppmätta absorbansen för provet och läs av koncentrationen C i mg/l från kalibreringskurvan.

Halten av silver i vinet i mg/l är:

0,25 C. Halten anges med två decimaler.

Anmärkning: Innehållet i lösningarna för framställning av kalibreringskurvan, de uttagna provernas volym och vätskans slutgiltiga volym väljs så att de är lämpliga för känsligheten hos den apparatur som används.

34. ZINK

1. PRINCIP FÖR METODEN

Efter det att alkoholen har avlägsnats bestäms zink direkt i vinet med atomabsorptionsspektrofotometri.

2. REAGENSER

Vatten som används i apparatur av borosilikatglas skall vara dubbeldestillerat eller av likvärdig renhetsgrad.

Zinkstandardlösning, 1 g/l:

Använd en zinkstandardlösning som finns i handeln. Lösningen kan beredas genom att 4,3975 g zinksulfat (ZnSO4, 7 H2O) löses i vatten och späds till en volym av 1 liter.

Spädd zinkstandardlösning, 100 mg/l.

3. APPARATUR

Rotationsindunstare med ett termostatiskt kontrollerat vattenbad.

Atomabsorptionsspektrofotometer med luftacetylenbrännare.

Zinkhålkatodlampa.

4. METOD

4.1 Beredning av provet

Vinets alkoholhalt avlägsnas genom att en 100 ml provvolym reduceras till hälften i en rotationsindunstare (50-60 °C). Späd till den ursprungliga volymen på 100 ml med dubbeldestillerat vatten.

4.2 Kalibrering

Häll 0,5; 1; 1,5 resp. 2 ml av zinklösningen, 100 mg/l (2.2), i var och en av en serie 100 ml mätkolvar och fyll upp till märket med dubbeldestillerat vatten. Lösningar som har beretts på detta sätt innehåller 0,5; 1; 1,5 resp. 2 mg zink/l.

4.3 Bestämning

Ställ in våglängden på 213,9 nm. Nollställ absorbansskalan med dubbeldestillerat vatten. Sug upp vinet direkt i spektrofotometerns brännare och därefter de fyra standardlösningarna. Läs av absorbanserna. Upprepa bestämningarna.

5. REDOVISNING AV RESULTATEN

5.1 Beräkningsmetod

Rita en kurva över absorbansvariationen som en funktion av zinkkoncentrationen i standardlösningarna. Anteckna medelvärdet för den absorbans som kurvan visar för det spädda vinprovet och bestäm zinkkoncentrationen med en decimal.

35. BLY

1. PRINCIP

Bly bestäms direkt i vinet med flamlös atomabsorptionsspektrofotometri.

2. APPARATUR

All glasapparatur skall tvättas före användning i koncentrerad salpetersyra, upphettad till 70-80 °C, och sköljas i dubbeldestillerat vatten.

Atomabsorptionsspektrofotometer med grafitugn, icke-specifik absorptionskorrektion och multipotentiometer.

Blyhålkatodlampa.

5 μl mikropipetter med speciella munstycken för atomabsorptionsbestämningar.

3. REAGENSER

Alla reagenser skall vara av analytisk kvalitet och skall i synnerhet vara blyfria. Vatten som används i apparatur av borosilikatglas skall vara dubbeldestillerat eller av likvärdig renhetsgrad.

85 % fosforsyra (ρ20 = 1,71 g/ml).

Fosforsyralösning, som erhålls genom att 8 ml fosforsyra späds med vatten till 100 ml.

Salpetersyra (ρ20 = 1,38 g/ml).

Blylösning, 1 g/l.

Använd en standardlösning som finns i handeln. Lösningen kan erhållas genom att 1,600 g bly(II)nitrat, Pb(NO3)2, löses i 1 % salpetersyra (v/v) och späds till 1 liter. Förvara lösningen i en flaska av borosilikatglas med en propp av slipat glas.

4. METOD

4.1 Beredning av provet

Späd vinet till 1:2 eller 1:3 med fosforsyralösningen, beroende på den förmodade blykoncentrationen.

4.2 Beredning av kalibreringslösningar

Bered lösningar från blyreferenslösningen med 2,5; 5; 10 resp. 15 μg bly per liter genom att späda med dubbeldestillerat vatten.

4.3 Bestämning

4.3.1 Programmering av ugn (endast som vägledning):

Torkning vid 100 °C i 30 sekunder.

Mineralisering vid 900 °C i 20 sekunder.

Atomisering vid 2250 °C i 2-3 sekunder.

Kvävgasgenomströmning: 6 l/minut.

Anmärkning: Öka temperaturen till 2700 °C i slutet för att rengöra ugnen.

4.3.2 Bestämning

Välj våglängden 217 nm. Nollställ absorbansskalan med dubbeldestillerat vatten. Spruta in 3 volymer om 5 μl av var och en av kalibreringslösningarna och av provlösningen med hjälp av en mikropipett i den programmerade ugnen. Läs av den uppmätta absorbansen. Beräkna medelvärdet för absorbansen från resultaten för de tre insprutningarna.

5. REDOVISNING AV RESULTATEN

5.1 Beräkningsmetod

Rita kurvan över absorbansvariationen som en funktion av blykoncentrationen i kalibreringslösningarna. Variationen är linjär. För över medelvärdet på absorbansen för provlösningen till kalibreringskurvan och härled blykoncentrationen C från denna. Blykoncentrationen i μg/l vin är lika med:

C × F

där F = spädningsfaktorn.

36. FLUORIDER

1. PRINCIP FÖR METODEN

Fluoridhalten i vinet, som har tillsatts en buffertlösning, bestäms med hjälp av en selektiv elektrod med fast membran. Den uppmätta potentialen är proportionell mot logaritmen för aktiviteten av fluoridjoner i det medium som analyseras, i enlighet med följande ekvation:

E = Eo ± S log aF

där

E = den jonselektiva elektrodens potential bestämd i förhållande till referenselektroden i det medium som analyseras.

Eo = sensorns standardpotential.

S = den jonselektiva elektrodens spänningsfält (Nernstfaktor). Vid 25 °C är det teoretiska spänningsfältet 59,2 mV.

aF = fluoridjonernas aktivitet i den lösning som skall analyseras.

2. APPARATUR

Fluoridjonselektiv kristallmembranelektrod.

Referenselektrod (kalomel eller Ag/AgCl).

Millivoltmeter (pH-mätare med skala i millivolt) med 0,1 mV noggrannhet.

Magnetomrörare med isoleringsplatta för att skydda provlösningen mot värme från motorn. Kärl för omrörning som är täckt med plast (polyeten eller likvärdigt material).

Plastbägare, 30 eller 50 ml, och plastflaskor (polyeten eller liknande material).

Precisionspipetter (pipetter med skalindelning i μl eller andra likvärdiga pipetter).

3. REAGENSER

Stamfluoridlösning, 1 g/l.

Använd en standardlösning på 1 g/l som finns i handeln. Denna lösning kan beredas genom att 2,210 g natriumfluorid (torkad i 3-4 timmar i 105 °C) löses i destillerat vatten. Fyll upp till 1 l med destillerat vatten. Lösningen förvaras i en plastflaska.

En standardfluoridlösning med lämplig koncentration bereds genom att stamlösningen späds med destillerat vatten och förvaras i plastflaskor. Lösningar med en fluoridkoncentration i storleksordningen mg/l får inte beredas i förväg.

Buffertlösning, pH 5,5.

10 g cyklohexan-diaminsyra-1,2-tetraättiksyra (CDTA) tillsätts ca 50 ml vatten. Tillsätt en lösning innehållande 58 g natriumklorid och 29,4 g trinatriumcitrat i 700 ml destillerat vatten. CDTA löses genom att ca 6 ml 32 % (w/v) natriumhydroxidlösning tillsätts.

Slutligen tillsätts 57 ml ättiksyra (ρ20 = 1,05 g/ml) och pH justeras till 5,5 med 32 % natriumhydroxidlösning(ca 45 ml). Låt svalna och späd till 1 liter med destillerat vatten.

4. METOD

Inledande anmärkning:

Se till att alla lösningar hålls vid en temperatur av 25 °C (± 1 °C) under bestämningen. (Avvikelser på mer än 1 Co ger en ändring om ca 0,2 mV.)

4.1 Direkt metod

Häll en definierad volym vin i en plastbägare med en lika stor volym buffertlösning.

Lösningen rörs om med en jämn och måttlig rörelse. Läs av potentialvärdet i mV när apparatens visare är stabil (stabilitet har uppnåtts när potentialen inte varierar mer än 0,2-0,3 mV/3 min.).

4.2 Metod med kända tillsatser

Tillsätt under kontinuerlig omrörning en känd volym standardfluoridlösning till analysprovet med hjälp av en precisionspipett. Läs av potentialvärdet i mV när visaren är stabil.

Koncentrationen i den standardlösning som skall tillsättas väljs enligt följande:

a) Fluoridkoncentrationen i analysmediet fördubblas två eller tre gånger.

b) Analysmediets volym skall hållas i stort sett konstant (volymökning om 1 % eller mindre). Alternativ b underlättar beräkningarna (se 5.)

Analysmediets ungefärliga koncentration läses av på en kalibreringslinje som ritas på en semilogaritmisk skala med standardfluoridlösningar med en koncentration av 0,1; 0,2; 0,5; 1,0 resp 2,0 mg/l.

Anmärkning:Om analysmediets ungefärliga koncentration ligger utanför standardlösningarnas koncentration skall provet spädas.

Exempel:

Om analysmediets ungefärliga fluoridkoncentration (volym 20 ml) är 0,25 mg/l F- skall koncentrationen ökas med 0,25 mg/l. För att åstadkomma detta används en lämplig pipett för att tillsätta 0,20 ml = 1 %) av en standardlösning innehållande 25 mg/l F- eller 0,050 ml av en standardlösning med 100 mg/l F-.

5. BERÄKNINGAR

Fluoridhalten i analysmediet i mg/l erhålls med följande formel:

C F = V a × C a V o × 1 antilog ΔE/S - 1

CF = Koncentrationen av fluorid i analysmediet i mg/l

Ca = Koncentrationen av fluorid (mg/l) som har tillsatts analysmediet (Va)

Vo = Analysmediets initialvolym före tillsats (ml)

Va = Lösningens volym i ml efter tillsats

Δ E = Differensen mellan potentialerna E1 och E2 som erhållits i 4.1 och 4.2 (mV)

S = Spänningsfältet över elektroden i provlösningen

Om Va ligger mycket nära Vo (se 4.2) används följande förenklade formel: C F = C a × 1 antilog ΔE/S - 1

Värdet skall multipliceras med den spädningsfaktor som erhålls genom tillsats av buffertlösningen.

37. KOLDIOXID

1. PRINCIPER FÖR METODEN

1.1 Referensmetod

1.1.1 Icke mousserande viner (övertryck av CO2 ≤ 0,5 × 105 Pa)

Den mängd vin som tas från provet kyls till ca 0 °C och blandas med tillräcklig mängd natriumhydroxid för att pH skall bli 10-11. Titrering utförs med en sur lösning i närvaro av kolsyreanhydras. Halten av koldioxid beräknas utifrån den mängd sur lösning som krävs för att ändra pH från 8,6 (bikarbonatform) till 4,0 (kolsyra). Nolltitrering utförs under samma betingelser på dekarboniserat vin för att korrigera för den volym natriumhydroxidlösning som förbrukas av vinsyrorna.

1.1.2 Mousserande och pärlande viner

Analysprovet kyls till nära fryspunkten. Efter uttagning av en mängd som skall användas som nollprov efter dekarbonisering görs resten av innehållet i flaskan alkaliskt för att binda all koldioxid som Na2CO3. Titrering utförs med en sur lösning i närvaro av kolsyreanhydras. Koldioxidhalten beräknas från den mängd sur lösning som krävs för att ändra pH från 8,6 (bikarbonatform) till 4,0 (kolsyra). Nolltitrering utförs under samma betingelser på dekarboniserat vin för att korrigera för den mängd natriumhydroxid som förbrukas av vinsyrorna.

1.2 Rutinmetod: mousserande och pärlande viner

Manometrisk metod: mätning av övertryck av koldioxid utförs direkt i flaskan med afrometer.

2. REFERENSMETOD

Icke mousserande viner (övertryck av CO2 ≤ 0,5 × 105 Pa)

2.1.1 Apparatur

Magnetomrörare.

pH-mätare.

2.1.2 Reagenser

Natriumhydroxidlösning (NaOH), 0,1 M.

Svavelsyralösning (H2SO4), 0,05 M.

Kolsyreanhydraslösning, 1 g/l.

2.1.3 Metod

Kyl vinprovet till ca 0 °C tillsammans med den 10 ml pipett som används för provtagning.

Häll 25 ml av natriumhydroxidlösningen (2.1.2.1) i en 100 ml bägare. Tillsätt 2 droppar vattenhaltig kolsyreanhydraslösning (2.1.2.3). Häll i 10 ml av vinet med hjälp av pipetten som kylts till 0 °C.

Placera bägaren på magnetomröraren, anbringa pH-elektroden och rör om försiktigt.

När vätskan har rumstemperatur tillsätts långsamt svavelsyralösningen (2.1.2.2) till dess att pH är 8,6. Notera värdet på byretten.

Tillsätt mer svavelsyra (2.1.2.2) till dess att pH är 4,0. Den använda mängden mellan pH 8,6 och 4,0 betecknas n ml.

Avlägsna CO2 från ca 50 ml av vinprovet genom omrörning under vakuum i 3 minuter medan kolven värms i ett vattenbad till ca 25 °C.

Utför förfarandet ovan på 10 ml dekarboniserat vin. Den använda mängden betecknas n′ ml.

2.1.4 Redovisning av resultaten

1 ml av den titrerade 0,1 M natriumhydroxidlösningen motsvarar 4,4 mg CO2.

Mängden CO2 i g/l vin erhålls med formeln:

0,44 (n - n′)

Resultatet anges med två decimaler.

Anmärkning: För viner med låg koldioxidhalt (CO2< 1 g/l) behöver kolsyreanhydras inte tillsättas för att katalysera hydratiseringen av CO2.

2.2 Mousserande och pärlande viner

2.2.1 Apparatur

Magnetomrörare.

pH-mätare.

2.2.2 Reagenser

Natriumhydroxidlösning (NaOH), 50 % (w/w).

Svavelsyralösning (H2SO4), 0,05 M.

Kolsyreanhydraslösning, 1 g/l.

2.2.3 Metod

Markera vinnivån i flaskan och kyl till fryspunkten.

Låt flaskan värmas upp något under omskakning till dess att iskristallerna försvinner.

Avlägsna proppen snabbt och häll 45-50 ml av vinet i en mätkolv för nolltitrering. Den exakta volym som avlägsnas, v ml, bestäms genom avläsning på kolven när den återigen får rumstemperatur.

Omedelbart efter det att nollprovet har avlägsnats tillsätts 20 ml natriumhydroxidlösning (2.2.2.1) till en flaska med volymen 750 ml.

Vänta till dess att vinet har rumstemperatur.

Häll 30 ml kokt destillerat vatten och 2 droppar kolsyreanhydraslösning (2.2.2.3) i en 100 ml bägare. Tillsätt 10 ml av vinet som har gjorts alkaliskt.

Placera bägaren på magnetomröraren, anbringa elektroden och magnetstaven och rör om försiktigt.

Titrera med svavelsyralösningen (2.2.2.2) långsamt, till dess att pH är 8,6. Notera värdet på byretten.

Tillsätt långsamt mer svavelsyra (2.2.2.2), till dess att pH är 4,0. Den mängd som används för att minska pH från 8,6 till 4,0 betecknas n ml.

Avlägsna CO2 från de v ml av vinet som tagits undan för nolltitrering genom omskakning under vakuum i 3 minuter, medan kolven värms över vattenbad till ca 25 °C. Ta undan 10 ml dekarboniserat vin och tillsätt 30 ml kokt destillerat vatten. Tillsätt 2-3 droppar natriumhydroxidlösning (2.2.2.1) så att pH-värdet blir 10-11. Följ därefter förfarandet ovan. Den tillsatta mängden 0,05 M svavelsyra betecknas n′ ml.

2.2.4 Redovisning av resultaten

1 ml 0,05 M svavelsyra motsvarar 4,4 mg CO2.

Töm den flaska med vin som gjorts alkaliskt och bestäm den ursprungliga mängden vin med 1 ml noggrannhet genom att fylla upp till märket med vatten. Mängden betecknas V ml.

Mängden CO2 i g/l vin erhålls med följande formel:

0,44 n - n′ × V - v + 20 V - v

Resultatet anges med 2 decimaler.

2.3 Beräkning av det teoretiska övertrycket

Övertrycket vid 20 °C (Paph20) i pascal erhålls med formeln:

Paph 20 = Q 1,951 × 10 -5 0,86 - 0,01 A 1 - 0,00144 S - Patm

där

Q = CO2-halten i gram/l vin,

A = vinets alkoholhalt vid 20 °C,

S = vinets sockerhalt i gram/l,

Patm = det atmosfäriska trycket i pascal.

3. RUTINMETOD: MOUSSERANDE OCH PÄRLANDE VINER

3.1 Apparatur

3.1.1 Afrometer

Den apparat som möjliggör mätning av övertrycket i flaskor med mousserande eller pärlande vin kallas en afrometer. Den kan ha olika utformning beroende på hur flaskan är försluten (metallkapsel, kapsyl, kork eller plastpropp, se fig. 1 och 2).

Apparaten är skalindelad i pascal (Pa). Det är dock mest praktiskt att använda 105 Pa eller kilopascal (kPa) som enhet.

Apparaterna är indelade i olika klasser. Manometerns klass anger avläsningens precision i förhållande till hela skalan uttryckt i procent (t. ex. en 1000 kPa manometer av klass 1 innebär att maximala trycket 1000 kPa kan läsas av med en noggrannhet av ± 10 kPa). Apparater av klass 1 rekommenderas för exakta bestämningar.

Afrometrar skall kontrolleras regelbundet (minst 1 gång om året).

3.2 Metod

Bestämningar skall utföras på flaskor vars temperatur har stabiliserats under minst 24 timmar.

När kapsylen, korken eller proppen har genomborrats skall flaskan skakas om kraftigt till dess att trycket är konstant för att avläsningen skall kunna utföras.

Figur 1: Afrometer för kapsyler Figur 2: Afrometer för korkar och proppar

3.3 Redovisning av resultaten

Övertrycket vid 20 °C (Paph20) anges i pascal (Pa) eller kilopascal (kPa).

Resultatet skall anges på ett sätt som överensstämmer med manometerns exakthet (t.ex. 6,3 × 105 Pa eller 630 kPa, men inte 6,33 × 105 Pa eller 633 kPa, med en 1000 kPa fullskalemanometer av klass 1).

Om bestämningstemperaturen avviker från 20 °C bör korrektion göras genom att det uppmätta trycket multipliceras med koefficienten.

Paph 20 Paph t

som anges i tabell 1. Koefficienten ger värdet vid 20 °C.

4. FÖRHÅLLANDE MELLAN TRYCK OCH KOLDIOXIDHALT I ETT PÄRLANDE VIN

Det absoluta trycket vid 20 °C (Pabs20) beräknas utifrån övertrycket vid 20 °C (Paph20) med formeln:

Pabs20 = Patm + Paph20

där Patm är det atmosfäriska trycket i bar.

Vinets koldioxidhalt erhålls med följande formler:

i liter CO2/l vin: 0,987 × 10-5 Pabs20(0,86 - 0,01A)(1 - 0,00144S)

i gram CO2/l vin: 1,951 × 10-5 Pabs20(0,86 - 0,01A)(1 - 0,00144S) där

A är vinets alkoholhalt vid 20 °C,

S är vinets sockerhalt i gram/l.

TABELL 1 Förhållandet mellan övertrycket Paph20 i mousserande eller pärlande vin vid 20 °C och övertrycket Papht vid temperaturen t 0 1,85 13 1,24 1 1,80 14 1,20 2 1,74 15 1,16 3 1,68 16 1,13 4 1,64 17 1,09 5 1,59 18 1,06 6 1,54 19 1,03 7 1,50 20 1,00 8 1,45 21 0,97 9 1,40 22 0,95 10 1,36 23 0,93 11 1,32 24 0,91 12 1,28 25 0,88

37a. MÄTNING AV ÖVERTRYCKET I MOUSSERANDE OCH PÄRLANDE VINER

1. PRINCIP

Efter temperaturstabilisering och omskakning av flaskan bestäms övertrycket med hjälp av en afrometer (tryckmätare). Övertrycket uttrycks i pascal (Pa) (metod av typ I). Metoden är också tillämplig på mousserande viner med tillsatt koldioxid och pärlande viner med tillsatt koldioxid.

2. APPARATUR

Övertrycket i flaskor med mousserande eller pärlande vin mäts med en apparat som kallas afrometer. Den kan ha olika utformning beroende på flaskans förslutning (metallkapsel, kapsyl, kork eller plastpropp).

2.1 Flaskor med metallkapsel eller kapsyl

Apparaten består av tre delar (figur 1):

Överdelen (snäckskruv med nål) består av en manometer, en ring för manuell iskruvning, en snäckskruv som skruvas in i den mellersta delen och en nål som sticks igenom metallkapseln respektive kapsylen. I sidan på nålen finns ett hål som leder trycket till manometern. En packning ser till att apparaten håller tätt mot metallkapseln respektive kapsylen.

Mellandelen (mutter) används för att centrera överdelen. Mellandelen skruvas fast i nederdelen så att hela apparaten sitter stadigt på flaskan.

Nederdelen (bygel) är försedd med en tapp som skjuts in under en ring på flaskan och som håller kvar apparaten. Det finns en särskild ring för varje typ av flaska.

2.2 Flaskor med kork eller plastpropp

Apparaten består av två delar (figur 2):

Överdelen är samma som i föregående apparat. Nålen är dock längre och utformad som ett långt, ihåligt rör med en vass spets som lätt kan stickas igenom korken respektive plastproppen. Spetsen sitter löst och ramlar ned i vinet när den har stuckits in i flaskan.

Nederdelen består av en mutter och en sockel som sätts på korken respektive plastproppen. Sockeln är försedd med fyra fästskruvar som håller apparaten på plats. Fig. 2: Afrometer för korkar och proppar Fig. 1: Afrometer för kapsyler

Anmärkningar om apparaternas manometrar:

Manometern kan antingen vara en mekanisk Bourdon-manometer eller en digital piezoelektrisk manometer. I det första fallet måste Bourdon-röret vara tillverkat av rostfritt stål.

Manometern skall vara skalindelad i pascal (Pa). För mousserande viner är det mest praktiskt att använda 105 Pa eller kilopascal (kPa) som enhet.

Manometrar är indelade i olika klasser. Manometerns klass anger avläsningens noggrannhet i förhållande till hela mätområdet uttryckt i procent (t.ex. en 1000 kPa manometer av klass 1 innebär att det maximala trycket är 1000 kPa och att maxavvikelsen är ± 10 kPa). För en exakt mätning rekommenderas klass 1.

3. METOD

Mätning skall utföras på flaskor vars temperatur har stabiliserats under minst ett dygn. När metallkapseln, kapsylen, korken eller proppen har genomborrats, skall flaskan skakas om kraftigt till dess att trycket är konstant. Först därefter avläses trycket.

3.1 Flaskor med metallkapsel eller kapsyl

För in bygelns tapp under flaskans ring. Skruva i muttern så att de båda delarna sitter fast på flaskan. Skruva på överdelen. För att undvika att gas läcker ut måste nålen stickas in och packningen fås att ligga an mot kapseln så fort som möjligt. Läs av trycket efter att ha skakat om flaskan kraftigt till dess att trycket är konstant.

3.2 Flaskor med kork eller plastpropp

Sätt en spets i änden av nålen. Sätt hela apparaturen på korken respektive plastproppen. Dra åt de fyra skruvarna runt korken/plastproppen. Skruva på överdelen så att nålen sticker igenom korken/plastproppen. Spetsen ramlar ner i flaskan och trycket når manometern. Läs av trycket efter att ha skakat om flaskan kraftigt till dess att trycket är konstant. Ta ut spetsen ur flaskan efter mätningen.

4. REDOVISNING AV RESULTATEN

Övertrycket vid 20 °C (Paph20) anges i pascal (Pa) eller kilopascal (kPa). Resultatet skall anges på ett sätt som överensstämmer med manometerns exakthet (t.ex. 6,3 × 105 Pa eller 630 kPa, men inte 6,33 × 105 Pa eller 633 kPa, med en 1000 kPa fullskalemanometer av klass 1).

Om temperaturen vid mätningen avviker från 20 °C, skall värdet korrigeras genom att det uppmätta trycket multipliceras med tillämplig koefficient (se tabell 1).

5. KONTROLL AV RESULTATEN

Metod för direktbestämning av de fysiska parametrarna (metod av typ I)

Afrometerkontroll

Afrometrar skall kontrolleras regelbundet (minst en gång om året).

Kontrollera manometern med hjälp av en kalibreringsbänk. I kalibreringsbänken jämförs den manometer som skall kontrolleras med en parallellmonterad referensmanometer som är av högre klass och som är kalibrerad mot nationella standarder. Avläs värdena på de båda apparaterna först för ökat sedan för minskat tryck och jämför dem. Om de båda apparaternas värden skiljer sig åt, använd justeringsskruven för att korrigera.

Alla auktoriserade laboratorier och institutioner är utrustade med kalibreringsbänkar. Även manometertillverkarna har sådana bänkar.

38. CYANIDDERIVAT

(Observera:Iaktta säkerhetsföreskrifterna vid hantering av kemiska produkter som kloramin T, pyridin, kaliumcyanid, saltsyra och fosforsyra. Hantera de använda produkterna enligt gällande miljöföreskrifter. Iaktta försiktighet när cyanväte frigörs vid destillation av det surgjorda vinet).

1. PRINCIP

Den totala mängden cyanväte i vinet frigörs genom sur hydrolys och separeras genom destillation. Efter reaktion med kloramin T och pyridin bestäms koncentrationen av den bildade glutakon-dialdehyden kolorimetriskt genom den blåfärgning som ämnet ger tillsammans med 1,3-dimetylbarbitursyra.

2. UTRUSTNING

2.1 Destillationsapparat.

Använd samma apparat som används vid bestämning av alkoholhalt (uttryckt i volymprocent) i vin.

Rundkolv, 500 ml, normalslipad

Termostatreglerat vattenbad med temperaturen 20 °C

Spektrofotometer som är anpassad för absorptionsmätningar vid 590 nm

Glas- eller engångskyvetter med bredden 20 mm

3. REAGENS

Fosforsyra (H3PO4) 25 % (m/V)

Lösning av kloramin T (C7H7ClNNaO2S, 3H2O) 3 % (m/V)

Lösning av 1,3-dimetylbarbitursyra: lös 3,658 g 1,3-dimetylbarbitursyra (C6H8N2O3) i 15 ml pyridin och 3 ml saltsyra (ρ vid 20 °C = 1,19 g/ml) och fyll till 50 ml med destillerat vatten

Kaliumcyanid (KCN)

Lösning av kaliumjodid (KI), 10 % (m/V)

Lösning av silvernitrat (AgNO3), 0,1 M

4. UTFÖRANDE

4.1 Destillering:

Häll 25 ml vin, 50 ml destillerat vatten, 1 ml fosforsyra (3.1) och några kokstenar i rundkolven (2.2). Sätt omedelbart in kolven i destilleringsapparaten. För över 30-35 ml destillat genom det avsmalnande röret efter kylaren till en 50 ml mätkolv med 10 ml vatten (den totala mängden vätska i mätkolven blir följaktligen cirka 45 ml). Mätkolven skall stå i nollgradigt vatten.

Tvätta det avsmalnande röret med några milliliter destillerat vatten, värm destillatet till 20 °C och fyll på med destillerat vatten till märket.

4.2 Mätning

För över 25 ml av destillatet till en 50 ml E-kolv med slipad propp. Tillsätt 1 ml kloramin T-lösning (3.2) och tillslut hermetiskt. Efter exakt 60 sekunder tillsätts 3 ml 1,3-dimetylbarbitursyra (3.3). Tillslut hermetiskt och låt stå i 10 minuter. Mät sedan absorbansen mot ett referensprov (25 ml destillerat vatten i stället för 25 ml destillat) vid våglängden 590 nm i kyvetter med bredden 20 mm.

5. KALIBRERINGSKURVA

5.1 Titrering av kaliumcyanid med silvernitrat

Lös omkring 0,2 g noga uppvägt KCN (3.4) i 100 ml destillerat vatten i en 300 ml mätkolv. Tillsätt 0,2 ml kaliumjodidlösning (3.5) och titrera med 0,1 M silvernitratlösning (3.6) tills en stabil gulaktig färg erhålls.

1 ml silvernitratlösning med koncentrationen 0,1 M motsvarar 13,2 mg KCN. Beräkna utifrån detta KCN-pulvrets halt.

5.2 Kalibreringskurva

5.2.1 Beredning av standardlösningar

Efter att KCN-halten fastställts enligt 5.1 bereds en standardlösning som innehåller 30 mg cyanväte per liter (30 mg HCN ≅ 72,3 mg KCN). Späd lösningen 1:10.

Överför 1,0 ml, 2,0 ml, 3,0 ml, 4,0 och 5,0 ml av den utspädda standardlösningen till 100 ml mätkolvar och späd med destillerat vatten till märket. De färdiga lösningarna innehåller 30, 60, 90, 120 respektive 150 μg cyanväte per liter.

5.2.2 Mätning

Ta 25 ml av de erhållna lösningarna och fortsätt enligt anvisningarna i 4.1 och 4.2.

Då man i ett diagram avsätter standardlösningarnas absorbans mot cyanvätekoncentrationen erhålls en rät linje som går genom origo.

6. BERÄKNING AV RESULTAT

Cyanvätekoncentrationen uttrycks i mikrogram per liter (μg/l) utan decimal.

6.1 Beräkning

Läs av cyanvätekoncentrationen med hjälp av kalibreringskurvan. Om provet har spätts vid beredning skall resultatet multipliceras med utspädningsfaktorn.

Repeterbarhet (r) och reproducerbarhet (R)

Vitt vin:

= r = 3,1 μg/l dvs. ungefär 6 %· xi

R = 12 μg/l dvs. ungefär 25 %· xi

Rött vin:

= r = 6,4 μg/l dvs. ungefär 8 %· xi

R = 23 μg/l dvs. ungefär 29 %· xi

xi = Vinets genomsnittliga HCN-halt

xi = 48,4 μg/l för vitt vin

xi = 80,5 μg/l för rött vin.

39. ALLYLISOTIOCYANAT

1. PRINCIP FÖR METODEN

Allylisotiocyanat i vinet samlas upp genom destillation och identifieras med gaskromatografi.

2. REAGENSER

Absolut etanol.

Standardlösning: lösning av allylisotiocyanat i absolut alkohol med 15 mg allylisotiocyanat per liter.

Frysblanding bestående av etanol och torris (-60 °C).

3. APPARATUR

Destillationsapparat enligt figuren på nästa sida. Apparaten genomströmmas kontinuerligt med kvävgas.

Termostatiskt reglerad värmemantel.

Flödesmätare.

Gaskromatograf med flamspektrofotometerdetektor med selektivt filter för svavelföreningar (våglängd = 394 nm) eller annan lämplig detektor.

Kromatografkolonn av rostfritt stål, innerdiameter 3 mm, längd 3 meter, fylld med 10 % Carbowax 20 M på Chromosorb WHP, mesh 80-100.

Mikrospruta, 10 μl.

4. METOD

Häll 2 l vin i destillationskolven och tillsätt några ml etanol (2.1) i två uppsamlingsrör så att gasdispersionsstavarnas porösa delar är helt nedsänkta i vätskan. Kyl de båda rören utifrån med frysblandningen. Anslut kolven till uppsamlingsröret och låt kvävgas strömma igenom apparaten med en hastighet av 3 liter per timme. Värm vinet till 80 °C med värmemanteln, destillera och samla upp 45-50 ml av destillatet.

Stabilisera kromatografen. Följande betingelser rekommenderas:

injektortemperatur: 200 °C

kolonntemperatur: 130 °C

flödeshastighet för bärargasen (helium): 20 ml/min.

Med hjälp av mikrosprutan sprutas en sådan mängd standardlösning in i kromatografen att den topp som motsvarar allylisotiocyanat lätt kan identifieras på gaskromatogrammet.

På samma sätt sprutas en delmängd av destillatet in i kromatografen. Kontrollera att retentionstiden för den topp som erhålls motsvarar allylisotiocyanatets topp.

Under de betingelser som beskrivs ovan kommer föreningar som förekommer naturligt i vinet inte att ge upphov till några interfererande toppar på kromatogrammet för provlösningen.

Apparat för destillation med strömmande kvävgas

40. FÄRGEGENSKAPER

1. VIN OCH MUST

1.1 Definitioner

Vinets färgegenskaper är dess luminositet och dess kromaticitet.

Luminositeten svarar mot transmittansen och varierar omvänt proportionellt mot vinets färgintensitet.

Kromaticiteten svarar mot den dominerande våglängden (som karakteriserar nyansen) och färgens renhet.

Traditionellt och av bekvämlighetsskäl anges röda viners och roséviners färgegenskaper som färgintensiteten och nyansen enligt ett förfarande som har antagits som rutinmetod.

1.2 Principer för metoderna

1.2.1 Referensmetod

Detta är en spektrofotometrisk metod som möjliggör bestämning av de tristimulusvärden och de tre kromaticitetskoordinater som krävs för specifikation av färgen enligt internationella belysningskommissionen (CIE).

1.2.2 Rutinmetod (för rödvin och rosévin)

Spektrofotometrisk metod, enligt vilken färgegenskaperna traditionellt uttrycks på följande sätt:

Färgintensiteten anges som summan av absorbanserna vid våglängderna 420, 520 och 620 nm för den strålning som genomkorsar 1 cm optisk våglängd i provet.

Nyansen uttrycks som förhållandet mellan absorbansen vid 420 nm och vid 520 nm.

1.3 Referensmetod

1.3.1 Apparatur

Spektrofotometer för bestämning mellan 300 och 700 nm.

Parvisa glaskuvetter med optisk väglängd b = 0,1 - 0,2 - 0,5 - 1 - 2 och 4 cm.

1.3.2 Metod

Beredning av provet

Grumligt vin skall klaras med centrifugering.

Större delen av koldioxiden i unga och mousserande viner måste avlägsnas genom omskakning under vakuum.

Bestämning

Den optiska väglängden b i glaskuvetten skall väljas så att den uppmätta absorbansen ligger mellan 0,3 och 0,7.

Följande riktlinjer anges för att underlätta valet av lämplig optisk väglängd: använd kuvetter med 2 (eller 4) cm optisk väglängd för vitvin, 1 cm för rosévin och 0,1 cm (eller 0,2 cm) för rödvin.

De spektrofotometriska bestämningarna skall utföras med destillerat vatten i en kuvett med samma optiska våglängd b som referensvätskan för att nollställa absorbansskalan vid våglängderna 445, 495, 550 och 625 nm.

De fyra motsvarande absorbanserna för vinet bestäms därefter med tre decimaler för den optiska väglängden b. Beteckna dessa A445, A495, A550 och A625.

1.3.3 Beräkning

Med ledning av dessa värden avläses vid en optisk väglängd = b cm motsvarande transmittansvärden (T%) i tabell 1. Beteckna dessa T445, T495, T550 och T625.

Beräkna tristimulusvärdena X, Y och Z, uttryckta som decimalbråk, med hjälp av följande formler: X = 0,42 × T625 + 0,35 × T550 + 0,21 × T445 Y = 0,20 × T625 + 0,63 × T550 + 0,17 × T495 Z = 0,24 × T495 + 0,94 × T445

Beräkna kromaticitetskoordinaterna x och y med x = X X + Y + Z y = Y X + Y + Z

1.3.4 Redovisning av resultaten

Den relativa luminositeten erhålls med värdet för Y uttryckt i procent. (För svart är Y = 0 %, för färglösa vätskor är Y = 100 %.)

Kromaticiteten uttrycks av den dominerande våglängden och renheten.

Bestämning av dessa båda storheter görs utifrån kromaticitetsdiagrammet, begränsat av ”spectrum locus”, se figur 1. Punkten O som är inritad i diagrammet representerar den vita ljuskälla som används och har tilldelats koordinaterna för en standardljuskälla, C, xo = 0,3101 och yo = 0,3163, dvs. dagsljus med normal ljusstyrka.

Dominerande våglängd Rita in punkten C med koordinaterna x och y på kromaticitetsdiagrammet. Om C ligger utanför triangeln AOB ritas en rak linje som förbinder O med C och dras ut så att den skär igenom ”spectrum locus” vid punkten S, som motsvarar den dominerande våglängden. Om C ligger innanför triangeln AOB ritas en rak linje från C till O och dras ut så att den skär igenom ”spectum locus” vid en punkt som motsvarar våglängden för vinets komplementfärg. Denna våglängd anges med sitt värde åtföljt av bokstaven C.

Renhet. Om punkten C ligger utanför triangeln AOB anges renheten i procent med förhållandet: 100 × avståndet från C till O avståndet från O till S Om punkten C ligger innanför triangeln AOB anges renheten i procent med förhållandet: 100 × avståndet från C:till O:hon avståndet från O:till P där P är den punkt där den raka linjen OC skär igenom linjen för purpur (linje AB). Renheten anges också direkt med hjälp av kromaticitetsdiagram utifrån de kända värdena för x och y (fig. 2, 3, 4, 5 och 6).

Resultat

Vinets färg definieras helt av dess luminositet, dess kromaticitet (den dominerade våglängden) och dess renhet.

Dessa skall anges i analysrapporten tillsammans med den optiska våglängd som användes för bestämningen.

1.4. RUTINMETOD

1.4.1 Apparatur

Spektrofotometer för bestämning mellan 300 och 700 nm.

Parvisa glaskuvetter med optiska väglängder b motsvarande 0,1; 0,2; 0,5 och 1 cm.

1.4.2 Förbehandling av provet

Grumligt vin skall klaras med centrifugering.

Större delen av koldioxiden i unga och mousserande viner skall avlägsnas genom omskakning under vakuum.

1.4.3 Metod

Den optiska väglängden b i glaskuvetten skall väljas så att den uppmätta absorbansen A ligger mellan 0,3 och 0,7.

De spektrofotometriska bestämningarna skall göras med destillerat vatten i en kuvett med samma optiska våglängd b som referensvätskan för att nollställa absorbansskalan vid våglängderna 420, 520 och 620 nm.

1.4.4 Redovisning av resultaten

Beräkning

Beräkna absorbanserna vid de tre våglängderna för en optisk väglängd av 1 cm genom att dividera de uppmätta absorbanserna med b i centimeter. Beteckna dessa A420, A520 och A620.

Färgintensiteten I anges traditionellt med följande formel:

I = A420 + A520 + A620

Intensiteten anges med 3 decimaler.

Nyansen N anges traditionellt med följande formel:

N = A 420 A 520

Nyansen anges med 3 decimaler.

TABELL 1 Omvandling av absorbans till transmittans (T%)

Användningsmetod

Sök absorbansens första decimal i den första lodräta kolumnen och kalla denna rad R. Sök absorbansens andra decimal i den övre horisontella raden och kalla denna kolumn C.

Läs av siffran i rutan där rad R och kolumn C möts. För beräkning av transmittansen divideras denna siffra med 10 om absorbansen är mindre än 1, med 100 om den ligger mellan 1 och 2 och med 1000 om den ligger mellan 2 och 3.

Anmärkning:

Siffran i övre högra hörnet i varje ruta gör det möjligt att beakta absorbansens tredje decimal genom interpolering.

0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 23 22 22 21 21 20 20 19 19 19 0 1000 977 955 933 912 891 871 851 832 813 18 18 17 17 16 16 16 15 15 15 1 794 776 759 741 724 708 692 676 661 646 14 14 14 14 13 13 13 12 12 12 2 631 617 603 589 575 562 549 537 525 513 11 11 11 11 10 9 9 10 10 9 3 501 490 479 468 457 447 436 427 417 407 9 9 9 8 8 8 8 8 7 8 4 398 389 380 371 363 355 347 339 331 324 7 7 7 7 6 7 6 6 6 6 5 316 309 302 295 288 282 275 269 263 257 6 5 6 5 5 5 5 5 5 5 6 251 245 240 234 229 224 219 214 209 204 4 5 4 4 4 4 4 4 4 4 7 199 195 190 186 182 178 174 170 166 162 3 4 3 4 4 3 3 3 3 3 8 158 155 151 148 144 141 138 135 132 129 3 3 3 2 3 2 3 2 3 2 9 126 123 120 117 115 112 110 107 105 102

Exempel:

Absorbans 0,47 1,47 2,47 3,47 T % 33,9 % 3,4 % 0,3 % 0 %

Transmittansen T% skall anges med 0,1 % noggrannhet.

FIGUR 1 Kromaticitetsdiagram som visar samtliga färger i spektrum

FIGUR 2 Kromaticitetsdiagram för äkta (klarröda) rödviner och rödbruna (tegelröda) viner

FIGUR 3 Kromaticitetsdiagram för äkta (klarröda) rödviner och rödbruna (tegelröda) viner

FIGUR 4 Kromaticitetsdiagram för äkta (klarröda) rödviner och purpurfärgade rödviner

FIGUR 5 Kromaticitetsdiagram för äkta (klarröda) rödviner och purpurfärgade viner

FIGUR 6 Kromaticitetsdiagram för rödbruna (tegelröda) viner och purpurfärgade viner

2. RENAD KONCENTRERAD MUST

2.1 Princip

Bestämning av absorbansen, vid 425 nm genom 1 cm tjocklek, för renad koncentrerad must efter spädning för att erhålla en sockerhalt av 25 % (W/W) (25 oBrix).

2.2 Apparatur

Spektrofotometer för bestämning mellan 300 och 700 nm.

Glaskuvetter med en optisk väglängd av 1 cm.

Membranfilter med pordiameter 0,45 μm.

2.3 Metod

2.3.1 Beredning av provet

Använd en lösning med 25 % sockerhalt (w/w) (25 oBrix) som har beretts enligt anvisningarna i kapitlet ”pH”, punkt 4.1.2. Filtrering görs genom ett membranfilter med pordiameter 0,45 μm.

2.3.2 Absorbansbestämning

Nollställ absorbansskalan på våglängden 425 nm med en kuvett med 1 cm optisk väglängd innehållande destillerat vatten.

Bestäm absorbansen A vid samma våglängd som lösningen med 25 % socker (25 oBrix) som har beretts enligt 2.3.1 och hällts i en kuvett med 1 cm optisk väglängd.

2.4 Redovisning av resultaten

Den renade koncentrerade mustens absorbans vid 425 nm i en lösning med 25 % socker (25 oBrix) anges med två decimaler.

41. FOLIN-CIOCALTEU-INDEX

1. DEFINITION

Folin-Ciocalteu-index erhålls med den metod som beskrivs nedan.

2. PRINCIPER FÖR METODEN

Samtliga fenolföreningar i vinet oxideras av Folin-Ciocalteu-reagensen, som består av en blandning av fosforvolframsyra (H3PW12O40) och fosformolybdensyra (H3PMo12O40), som efter oxidering av fenolerna reduceras till en blandning av blå volframoxider (W8O23) och molybdenoxider (Mo8O23).

Den blåfärgning som erhålls har maximal absorption omkring 750 nm och är proportionell mot den totala halten av fenolföreningar som ursprungligen fanns i vinet.

3. REAGENSER

Dessa skall vara av analytisk kvalitet och det vatten som används skall vara destillerat eller av likvärdig renhetsgrad.

3.1 Folin-Ciocalteu-reagens

Detta reagens finns i handeln i en form som är färdig att använda. Den kan beredas på följande sätt: Lös 100 g natriumvolframat (NA2WO4 × 2H2O) och 25 g natriummolybdat (Na2MoO4, 2H2O) i 700 ml destillerat vatten. Tillsätt 50 ml 85-procentig fosforsyra (ρ20 = 1,71 g/ml) och 100 ml koncentrerad saltsyra (ρ20 = 1,19 g/ml). Låt koka upp och koka i 10 timmar under återflöde. Tillsätt därefter 150 g litiumsulfat (Li2SO4 × H2O) och några droppar brom. Koka därefter igen i 15 minuter. Låt svalna och späd till 1 liter med destillerat vatten.

Vattenfritt natriumkarbonat, NA2CO3, som späds till en 20 % lösning (w/v).

4. APPARATUR

Vanlig laboratorieutrustning, i första hand:

100 ml mätkolvar.

Spektrofotometer som kan användas vid 750 nm.

5. METOD

5.1 Rödvin

Häll följande i en 100 ml mätkolv (4.1) i den ordningsföljd som anges här:

1 ml av vinet som har spätts i förväg 1:5, 50 ml destillerat vatten, 5 ml Folin-Ciocalteu-reagens (3.1), 20 ml natriumkarbonatlösning (3.2).

Späd till 100 ml med destillerat vatten.

Rör om för att homogenisera. Vänta i 30 minuter så att reaktionen stabiliseras. Bestäm absorbansen vid 750 nm genom en väglängd av 1 cm i förhållande till ett nollprov som har beretts med destillerat vatten istället för vin.

Om absorbansen inte ligger omkring 0,3 skall lösningen spädas på lämpligt sätt.

5.2 Vitvin

Använd samma metod med 1 ml outspätt vin.

5.3 Renad koncentrerad must

5.3.1 Beredning av provet

Använd lösningen med en sockerhalt på 25 % (w/w) (25 oBrix) som har beretts enligt anvisningarna i kapitlet ”pH”, avsnitt 4.1.2.

5.3.2 Bestämning

Förfar enligt anvisningarna för rödvin (5.1) och använd ett 5 ml prov som har beretts enligt anvisningarna i 5.3.1. Bestäm absorbansen i förhållande till ett referensprov som har beretts med 5 ml av en 25 % (w/w) invertsockerlösning.

6. REDOVISING AV RESULTATEN

6.1 Beräkningsmetod

Resultatet redovisas i form av ett index som erhålls genom att absorbansen multipliceras med 100 för röda viner spädda 1:5 (eller med motsvarande faktor för andra spädningar) och med 20 för vita viner. För renad koncentrerad must multipliceras med 16.

6.2. Repeterbarhet

Differensen mellan resultaten från två bestämningar som utförts samtidigt eller omedelbart efter varandra av samma person får inte vara större än 1.

God repeterbarhet uppnås om väl rengjord apparatur används (mätkolvar och spektrofotometerkuvetter).

42. SPECIELLA ANALYSMETODER FÖR RENAD DRUVMUST

a) TOTALHALT AV KATJONER

1. PRINCIPER FÖR METODEN

Analysprovet behandlas med en kraftigt sur katjonbytare. Katjonerna byts mot H+. Den totala katjonhalten uttrycks som skillnaden mellan eluatets totala syrahalt och analysprovets syrahalt.

2. APPARATUR

Glaskolonn med en innerdiameter av 10-11 mm, ca 300 mm lång, med en avtappningskran.

pH-mätare indelad i minst 0,1 pH-enheter.

Elektroder:

glaselektrod som förvaras i destillerat vatten,

referenselektrod med kalomelmättad kaliumklorid som förvaras i en mättad lösning av kaliumklorid,

eller en kombinerad elektrod som förvaras i destillerat vatten.

3. REAGENSER

Kraftigt sur katjonbytarharts i H+-form som har fått svälla i vatten över natten.

Natriumhydroxidlösning, 0,1 M.

pH-indikatorpapper.

4. METOD

4.1 Beredning av provet

Använd en lösning som framställs genom att renad koncentrerad must späds till 40 % (w/v) enligt anvisningarna i kapitlet ”Total syrahalt”, avsnitt 5.1.2.

4.2 Beredning av jonbytarkolonn

Placera ca 10 ml i förväg svälld jonbytare i H+-form i kolonnen. Skölj kolonnen med destillerat vatten till dess att all syra har avlägsnats och kontrollera detta med indikatorpapper.

4.3 Jonbyte

Häll 100 ml av lösningen av renad koncentrerad must som har beretts enligt 4.1. genom kolonnen med en hastighet av 1 droppe/sekund. Samla upp eluatet i bägaren. Skölj kolonnen med 50 ml destillerat vatten. Titrera syran i eluatet (ta med sköljvattnet) med 0,1 M natriumhydroxidlösning till dess att pH-värdet är 7 vid 20 °C. Den alkaliska lösningen skall tillsättas långsamt under omskakning av lösningen. Den använda mängden 0,1 M natriumhydroxidlösning betecknas n ml.

5. REDOVISNING AV RESULTATEN

Den totala katjonhalten anges i mval/kg av den totala sockerhalten med en decimal.

5.1 Beräkning

Eluatets syrahalt i mval/kg renad koncentrerad must: E = 2,5 × n

Den totala syrahalten i den renade koncentrerade musten i mval/kg (se ”Total syrahalt”, avsnitt 6.1.2): a

Den totala katjonhalten i mval/kg av totala sockerhalten: 2,5 n - a P × 100

där P = halten i procent (w/w) av den totala sockerhalten.

b) KONDUKTIVITET

1. PRINCIP FÖR METODEN

Den elektriska konduktiviteten i en vätskekolonn som avgränsas av två parallella platinaelektroder bestäms genom att kolonnen placeras i ena grenen av en Wheatstone-mätbrygga.

Konduktiviteten varierar med temperaturen och anges därför vid 20 °C.

2. APPARATUR

Konduktivitetsmätare för bestämning av konduktiviteten mellan 1 och 1000 mikrosiemens/cm (μS cm).

Vattenbad för att ställa in analysprovernas temperatur till ca 20 °C (20 ± 2 °C).

3. REAGENSER

Demineraliserat vatten med specifik konduktivitet under 2 μS cm-1 vid 20 °C.

Referenslösning av kaliumklorid.

Lös 0,581 g kaliumklorid, KCl, som i förväg torkats till en konstant vikt vid en temperatur av 105 °C, i demineraliserat vatten (3.1). Späd till 1 l med demineraliserat vatten (3.1). Denna lösning har en konduktivitet på 1000 μS cm-1 vid 20 °C och bör inte sparas i mer än tre månader.

4. METOD

4.1 Beredning av analysprov

Använd en lösning med en total sockerhalt av 25 % (w/w) (25 oBrix), enligt beskrivning i kapitlet ”pH”, avsnitt 4.2.1.

4.2 Bestämning av konduktivitet

Värm analysprovet till 20 °C genom att sänka ned det i ett vattenbad. Håll temperaturen vid 20o ± 0,1 °C.

Skölj konduktivitetscellen två gånger med den lösning som skall analyseras.

Bestäm konduktiviteten och ange resultatet i μS cm-1.

5. REDOVISNING AV RESULTATEN

Resultatet anges i mikrosiemens/cm (Scm-1) vid 20 °C till närmaste heltal för en 25 % (w/w) (25 oBrix) lösning av renad koncentrerad must.

5.1 Beräkning

Om apparaten inte har någon anordning för temperaturreglering korrigeras den uppmätta konduktiviteten med hjälp av tabell 1. Om temperaturen är under 20 °C läggs korrektionen till, om temperaturen är över 20 °C dras korrektionen ifrån.

TABELL 1 Korrektion av konduktiviteten vid temperaturer som avviker från 20 °C (μS cm-1) Konduktivitet Temperatur (°C) 20,2 19,8 20,4 19,6 20,6 19,4 20,8 19,2 21,0 19,0 21,2 18,8 21,4 18,6 21,6 18,4 21,8 18,2 22,0 18,0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 50 0 0 1 1 1 1 1 2 2 2 100 0 1 1 2 2 3 3 3 4 4 150 1 1 2 3 3 4 5 5 6 7 200 1 2 3 3 4 5 6 7 8 9 250 1 2 3 4 6 7 8 9 10 11 300 1 3 4 5 7 8 9 11 12 13 350 1 3 5 6 8 9 11 12 14 15 400 2 3 5 7 9 11 12 14 16 18 450 2 3 6 8 10 12 14 16 18 20 500 2 4 7 9 11 13 15 18 20 22 550 2 5 7 10 12 14 17 19 22 24 600 3 5 8 11 13 16 18 21 24 26

c) HYDROXIMETYLFURFURAL

1. PRINCIPER FÖR METODERNA

1.1 Kolorimetrisk metod

Aldehydderivat av furan, av vilka den viktigaste är hydroximetylfurfural, reagerar med barbitursyra och paratoluidin och ger upphov till en röd förening som bestäms kolorimetriskt vid 550 nm.

1.2 HPLC (vätskekromatografi)

Separering på kolonn med omvänd fas och bestämning vid 280 nm.

2. KOLORIMETRISK METOD

2.1 Apparatur

Spektrofotometer för bestämning mellan 300 och 700 nm.

Glaskuvetter med 1 cm optisk våglängd.

2.2 Reagenser

2.2.1 Barbitursyra, 0,5 % lösning (w/v).

Lös 500 mg barbitursyra, C4O3N2H4, i destillerat vatten och värm lätt över vattenbad vid 100 °C. Späd till 100 ml med destillerat vatten. Lösningen är hållbar i ca en vecka.

2.2.2 Paratoluidinlösning, 10 % (w/v).

Häll 10 g paratoluidin, C6H4(CH3)NH2, i en 100 ml mätkolv. Tillsätt 50 ml isopropanol, CH3CH(OH)CH3, och 10 ml isättika, CH3COOH (ρ20 = 1,05 g/ml). Späd till 100 ml med isopropanol. Lösningen är hållbar endast en dag.

2.2.3 Etanal (acetaldehyd), CH3CHO, 1 % (w/v) vattenhaltig lösning.

Bered omedelbart före användning.

2.2.4 Vattenhaltig lösning av hydroximetylfurfural, C6O3H6, 1 g/l.

Bered lösningar innehållande 5, 10, 20, 30 resp. 40 mg/l. Lösningarna om 1 g/l och de spädda lösningarna skall beredas omedelbart före användning.

2.3 Metod

2.3.1 Beredning av provet

Använd den lösning som erhålls genom spädning av renad koncentrerad must till 40 % (m/v), enligt anvisningarna i kapitlet ”Total syrahalt”, avsnitt 5.1.2. Utför bestämningen på 2 ml av denna lösning.

2.3.2 Kolorimetrisk bestämning

Häll 2 ml av provet, som beretts enligt 2.3.1, i två 25 ml kolvar, a resp b, med proppar av slipat glas. Häll 5 ml paratoluidinlösning (2.2.2) i vardera flaskan. Blanda och tillsätt 1 ml destillerat vatten till kolv b (referens) och 1 ml barbitursyra (2.2.1) till kolv a. Skaka om för att homogenisera. Överför innehållet i kolvarna till spektrofotometerkuvetter med 1 cm optisk väglängd. Nollställ absorbansskalan med hjälp av innehållet i kolv b för en våglängd om 550 nm. Följ absorbansvariationen för innehållet i kolv a. Notera maximala värdet A som uppnås efter 2-5 min.

Prov som innehåller mer hydroximetylfurfural än 30 mg/l skall spädas före analys.

2.3.3 Beredning av kalibreringskurvan

Häll 2 ml av hydroximetylfurfurallösningarna med 5, 10, 20, 30 resp. 40 mg/l (2.2.4.) i två serier 25 ml kolvar, benämnda a och b, och behandla dem enligt anvisningarna i 2.3.2.

Kurvan över variationen av absorbansen med halten av hydroximetylfurfural i mg/l är en rak linje som skär igenom nollpunkten.

2.4 Redovisning av resultaten

Halten av hydroximetylfurfural i renad koncentrerad must anges i mg/kg av den totala sockerhalten.

2.4.1 Beräkningsmetod

Halten C av hydroximetylfurfural i mg/l i analysprovet är lika med den koncentration på kalibreringskurvan som motsvarar den för provet bestämda absorbansen A.

Halten av hydroximetylfurfural i mg/kg av den totala sockerhalten blir:

250 × C P

P = den totala sockerhalten i procent (w/w) i den renade koncentrerade musten.

3. HPLC (VÄTSKEKROMATOGRAFI)

3.1 Apparatur

3.1.1 HPLC-apparat med

injektor, 5 eller 10 μl,

spektrofotometerdetektor för bestämning vid 280 nm,

kolonn av oktadecylbunden silica (tex Bondapak C18 — Corasil, Waters Ass.),

skrivare, eventuellt integrator.

Den mobila fasens flödeshastighet skall vara 1,5 ml/min.

3.1.2 Membranfiltreringsapparat med pordiameter 0,45 μm.

3.2 Reagenser

Dubbeldestillerat vatten.

Metanol, CH3OH, destillerat eller av HPLC-kvalitet.

Ättiksyra, CO3COOH (ρ20 = 1,05 g/ml).

Mobil fas: vattenmetanol (3.2.2), ättiksyra (3.2.3) som i förväg filtrerats genom ett membranfilter (0,45 μm), (40 — 9 — 1 v/v).

Den mobila fasen skall beredas dagligen och avgasas före användning.

Referenslösning av hydroximetylfurfural, 25 mg/l (v/v).

Häll 25 mg noggrant vägd hydroximetylfurfural, C6H3O6, i en 100 ml mätkolv och fyll upp till märket med metanol (3.2.2). Späd denna lösning 1:10 med metanol (3.2.2) och filtrera genom membranfilter (0,45 μm).

Om lösningen förvaras i en brun flaska i kylskåp är den hållbar i 2—3 månader.

3.3 Metod

3.3.1 Beredning av provet

Använd den lösning som erhålls genom spädning av den renade koncentrerade musten till 40 % (w/v) enligt anvisningarna i kapitlet ”Total syrahalt”, punkt 5.1.2., och filtrera den genom ett membranfilter med 0,45 μm pordiameter.

3.3.2 Kromatografisk bestämning

Spruta in 5 (eller 10) μl av provet som beretts enligt 3.3.1 och 5 (eller 10) μl av referenslösningen av hydroximetylfurfural (3.2.5) i kromatografen. Skriv ut kromatogrammet.

Retentionstiden för hydroximetylfurfural är ca 6-7 min.

3.4 Redovisning av resultaten

Halten av hydroximetylfurfural i renad koncentrerad must anges i mg/kg av den totala sockerhalten.

3.4.1 Beräkningsmetod

Halten av hydroximetylfurfural i den 40 % (m/v) lösningen av renad koncentrerad must betecknas C mg/l.

Halten av hydroximetylfurfural i mg/kg av den totala sockerhalten blir:

250 × C P

där P är den totala sockerhalten i procent (w/w) i den renade koncentrerade musten.

d) TUNGMETALLER

1. PRINCIPER FÖR METODERNA

I. Snabbmetod för bestämning av tungmetaller

Tungmetaller kan upptäckas i den på lämpligt sätt spädda renade koncentrerade musten genom den färgning som uppträder när sulfider bildas. De bestäms genom jämförelse med en standardblylösning som motsvarar den högsta tillåtna halten.

II. Bestämning av blyhalten med hjälp av atomabsorptionsspektrofotometri

Det kelat som bly bildar tillsammans med ammonium-pyrrolidin-ditiokarbamat extraheras med metylisobutylketon och absorbansen bestäms vid 283,3 nm. Blyhalten bestäms genom att kända tillsatta mängder bly används i en serie referenslösningar.

2. SNABBMETOD FÖR BESTÄMNING AV TUNGMETALLER

2.1 Reagenser

2.1.1 Spädd saltsyra, 70 % (w/v).

Ta 70 g saltsyra, HCl (ρ20 = 1,16 - 1,19 g/ml) och späd till 100 ml med vatten.

2.1.2 Spädd saltsyra, 20 % (w/v).

Ta 20 g saltsyra, HCl (ρ20 = 1,16 - 1,19 g/ml) och späd till 100 ml med vatten.

Spädd ammoniak.

Ta 14 g ammoniak, NH3 (ρ20 = 0,931 - 0,934 g/ml) och späd till 100 ml med vatten.

2.1.4 Buffertlösning, ph 3,5.

Lös 25 g ammoniumacetat, CH3COONH4, i 25 ml vatten och tillsätt 38 ml spädd saltsyra (2.1.1). Vid behov justeras pH-värdet med den spädda saltsyran (2.1.2) eller spädd ammoniak (2.1.3). Späd till 100 ml med vatten.

2.1.5 Tioacetamidlösning, C2H5SN, 4 % (w/v)

2.1.6 Glycerollösning, C3H8O3, 85 % (w/v)

(n D 20 °C = 1,449 - 1,455).

2.1.7 Tioacetamidreagens

Tillsätt 1 ml av en blandning av 5 ml vatten, 15 ml 1 M natriumhydroxidlösning och 20 ml glycerol (2.1.6) till 0,2 ml tioacetamidlösning (2.1.5). Värm över vattenbad vid 100 °C i 20 sekunder. Bered omedelbart före användning.

2.1.8 Blylösning, 0,002 g/l

Bered en blylösning, 1 g/l, genom att lösa 0,400 g blynitrat, Pb(NO3)2, i vatten och fyll upp till 250 ml med vatten. När lösningen skall användas späds den till 2 promille (v/v) så att en 0,002 g/l lösning erhålls.

2.2 Metod

Lös ett analysprov om 10 g av den renade koncentrerade musten i 10 ml vatten. Tillsätt 2 ml av buffertlösningen med pH 3,5 (2.1.4). Blanda. Tillsätt 1,2 ml av tioacetamidreagensen (2.1.7). Blanda omedelbart. Bered referenslösningen under samma betingelser genom att använda 10 ml av 0,002 g/l blylösningen (2.1.8).

Efter 2 minuter skall eventuell brunfärgning i lösningen av renad koncentrerad must inte vara intensivare än brunfärgningen i referensprovet.

2.3 Beräkning

Under de betingelser som beskrivs ovan motsvarar referensprovet en högsta tillåten halt av tungmetaller, uttryckt som bly, av 2 mg/kg renad koncentrerad must.

3. BESTÄMNING AV BLYINNEHÅLL MED ATOMABSORPTIONSSPEKTROFOTOMETRI

3.1 Apparatur

Atomabsorptionsspektrofotometer med luftacetylenbrännare.

Blyhålkatodlampa.

3.2 Reagenser

Spädd ättiksyra.

Ta 12 g isättika (ρ20 = 1,05 g/ml) och fyll upp till 100 ml med vatten.

Lösning av ammoniumpyrrolidin-ditiokarbamat, C5H12N2S2, 1 % (w/v).

Metylisobetylketon (CH3)2CHCH2COCH3.

Blylösning, 0,010 g/l.

Späd blylösningen, 1 g/l, (2.1.8) till 1 % (v/v).

3.3 Metod

3.3.1 Beredning av provlösning

Lös 10 g renad koncentrerad must i en blandning av lika stora volymer spädd ättiksyra (3.2.1) och vatten och fyll upp till 100 ml med denna blandning.

Tillsätt 2 ml ammoniumpyrrolidin-ditiokarbamatlösning (3.2.2) och 10 ml metylisobutylketon (3.2.3). Skaka om i 30 sekunder och skydda från direkt ljus. Låt de båda skikten separera. Använd metylisobutylketonskiktet.

3.3.2 Beredning av referenslösningar

Bered tre referenslösningar som förutom 10 g renad koncentrerad must innehåller 1, 2 resp. 3 ml av en blylösning, 0,010 g/l (3.2.4). Behandla dessa på samma sätt som provlösningen.

3.3.3 Referensprov

Bered ett referensprov enligt samma metod som i 3.3.1, men utan tillsats av renad koncentrerad must.

3.3.4 Bestämning

Ställ in våglängden på 283,3 nm.

Atomisera metylisobutylketonet från referensprovet i flamman och nollställ absorbansskalan.

Bestäm absorbanserna för respektive extrakt som motsvarar provlösningen och referenslösningarna.

3.4 Redovisning av resultaten

Ange blyhalten i mg/kg renad koncentrerat must med en decimal.

Beräkning

Rita kurvan över absorbansvariationen som en funktion av den blykoncentration som tillsats referenslösningarna. Nollkoncentrationen motsvarar provlösningen.

Extrapolera den räta linjen som sammanbinder punkterna tills den når den negativa delen av koncentrationsaxeln. Avståndet från denna punkt till nollpunkten anger blyhalten i provlösningen.

e) KEMISK BESTÄMNING AV ETANOL

Denna metod används för bestämning av alkoholhalten i vätskor med låg alkoholhalt, som must, koncentrerad must och renad koncentrerad must.

1. PRINCIP FÖR METODEN

Enkel destillation av vätskan. Oxidation av etanolen i destillatet med kaliumdikromat. Filtrering av överskottsdikromat med järn(II)lösning.

2. APPARATUR

Använd den destillationsapparat som beskrivs i kapitlet ”Alkoholhalt i volymprocent”, avsnitt 3.2.

3. REAGENSER

3.1 Kaliumdikromatlösning

Lös 33,600 g kaliumdikromat, K2Cr2O7, i tillräckligt med vatten för att ge 1 liter lösning vid 20 °C.

1 ml av denna lösning oxiderar 7,8924 mg alkohol.

3.2 Järn (II) ammoniumsulfatlösning

Lös 135 g järn (II) ammoniumsulfat, FeSO4, (NH4)2SO4, 6H2O, i tillräckligt med vatten för att ge 1 liter lösning och tillsätt 20 ml koncentrerad svavelsyra (H2SO4) (ρ20 = 1,84 g/ml). Denna lösning motsvarar ungefär halva volymen diktromatlösning när den just beretts och oxideras därefter långsamt.

3.3 Kaliumpermanganatlösning.

Lös 1,088 g kaliumpermanganat, KMnO4, i tillräcklig mängd vatten för att ge 1 liter lösning.

3.4 Spädd svavelsyra, 1:2 (v/v)

Tillsätt gradvis under omrörning 500 ml svavelsyra, H2SO4 (ρ20 = 1,84 g/ml) till 500 ml vatten.

3.5 Ferro-ortofenantrolinreagens

Lös 0,695 g järnsulfat, FeSO4, 7 H2O, i 100 ml vatten och tillsätt 1,485 g ortofenantrolinmonohydrat, C12H8N2, H2O. Värm för att påskynda lösningen. Denna klart röda lösning har god hållbarhet.

4. METOD

4.1 Destillation

Häll 100 g renad koncentrerad must och 100 ml vatten i en destillationskolv. Samla upp destillatet i en 100 ml mätkolv och fyll upp till märket med vatten.

4.2 Oxidation

Använd en kolv (300 ml) med en propp av slipat glas och bred hals, vilket gör att halsen kan sköljas utan att något av innehållet går förlorat. Häll 20 ml av titreringsmedlet kaliumdikromatlösning (3.1) och 20 ml av den spädda svavelsyran, 1:2 (v/v) (3.4) i kolven och skaka om. Tillsätt 20 ml av destillatet. Tillslut kolven, skaka om och vänta i minst 30 minuter. Skaka emellanåt. (Detta är ”bestämningskolven”.)

Titrera järn (II) ammoniumsulfatlösningen (3.2) i förhållande till kaliumdikromatlösningen genom att i en identisk kolv hälla samma mängder reagens, men ersätt de 20 millilitrarna destillat med 20 ml destillerat vatten. (Detta är ”referenskolven”).

4.3 Titrering

Tillsätt fyra droppar ortofenantrolinreagens (3.5) till innehållet i ”bestämningskolven”. Titrera överskottsdikromat genom att tillsätta järn(II)ammoniumsulfatlösningen (3.2). Avbryt tillsatsen av järn(II)lösningen när blandningen ändrar färg från grönblått till brunt.

För att kunna bestämma slutpunkten mer exakt ändras blandningens färg tillbaka från brunt till grönblått med kaliumpermanganatlösningen (3.3). Dra ifrån 1/10 av den använda volymen av denna lösning från den tillsatta volymen järn(II)lösning. Skillnaden betecknas n ml.

Gör på samma sätt med ”referenskolven”. Skillnaden betecknas n′ ml.

5. REDOVISNING AV RESULTATEN

Etanolen anges i g/kg socker med 1 decimal.

5.1 Beräkningsmetod

n′ ml järn (II) lösning reducerar 20 ml dikromatlösning, som oxiderar 157,85 mg ren etanol.

1 ml järn (II) lösning har samma reducerande förmåga som

157,85 n′ mg etanol

n - n′ ml järn (II) lösning har samma reducerande förmåga som

157,85 × n′ - n n′ mg etanol

Etanolhalten i g/kg renad koncentrerad must blir:

7,892 × n′ - n n′

Etanolhalten i g/kg av den totala sockerhalten blir:

789,2 × n′ - n n′ × P

där P är halten i procent (w/w) av den totala sockerhalten.

f) MESO-INOSITOL, SCYLLO-INOSITOL OCH SACKAROS

1. PRINCIP

Gaskromatografi av silylerade derivat.

2. REAGENSER

Intern standard: xylitol (vattenhaltig lösning om ca 10 g/l till vilken en knivsudd natriumasid har tillsatts).

Bis(trimetylsilyl)trifluoracetamid — BSTFA — (C8H18F3NOSi2).

Trimetylklorsilan (C3H9ClSi).

Pyridin p. A. (C5H5N).

Meso-inositol (C6H12O6).

3. APPARATUR

Gaskromatograf med:

Kapillärkolonn (t. ex. av kvartsglas, belagt med OV 1 med 15 μm tjocklek, längd 25 m och innerdiameter 0,3 mm).

Driftsbetingelser:

bärargas: väte eller helium

bärargasens flödeshastighet: ca 2 ml/minut

injektor- och detektortemperatur: 300 °C

temperaturprogrammering: 1 minut vid 160 °C, 4 °C per minut till 260 °C, konstant temperatur på 260 °C i 15 minuter.

splitförhållande: ca 1:20.

Integrator.

Mikrospruta, 10 μl.

Mikropipetter, 50, 100 resp. 200 μl.

2 ml kolv med en teflonpropp.

Ugn.

4. ARBETSMETOD

Ett noggrant vägt prov på ca 5 g renad koncentrerad must hälls i en 50 ml kolv. En μl av en standardlösning av xylitol (2.1) tillsätts och kolven fylls upp med vatten. Efter blandning tas 100 μl av lösningen ut och hälls i en kolv (3.6), där den torkas under en svag luftström. 100 μl absolut etylalkohol kan tillsättas vid behov för att underlätta indunstningen.

Resten löses försiktigt i 100 μl pyridin (2.4) och 100 μl bis(trimetylsilyl)trifluoracetamid (2.2) s vid 60 °C i en timme.

Ta ut 0,5 μl klar vätska och spruta in med hjälp av en ihålig upphettad nål i enlighet med det angivna splitförhållandet.

5. BERÄKNING AV RESULTATEN

Bered en lösning som innehåller:

60 g/l glukos, 60 g/l fruktos, 1 g/l meso-inositol och 1g/l sackaros.

5 g av lösningen vägs och metoden i punkt 4 följs. Resultaten för meso-inositol och sackaros beräknas i förhållande till xylitol från kromatogrammet.

För scyllo-inositol, som inte finns i handeln och som har en retentionstid som ligger mellan den sista toppen för den anomera formen av glukos och toppen för meso-inositol (se diagram på nästa sida), används samma resultat som det som beräknats för meso-inositol.

6. REDOVISNING AV RESULTATEN

Meso-inositol och scyllo-inositol anges i mg/kg socker. Sackaros anges i g/kg must.

Figur: Gaskromatogram för meso-inositol, scyllo-inositol och sackaros.

43. BESTÄMNING AV ISOTOPFÖRHÅLLANDET 18O/16O I VATTEN I VIN

I. BESKRIVNING AV METODEN

1. Syftet med metoden

Denna metod syftar till att mäta isotopförhållandet 18O/16O i vatten av olika ursprung. Isotopförhållandet 18O/16O kan uttryckas som en avvikelse på δ ‰ i förhållande till värdet av isotopförhållandet enligt den internationella referensen V.SMOW:

δ i ‰ = R i R SMOW - 1 × 1000

2. Princip

Isotopförhållandet 18O/16O bestäms genom masspektrometri av isotopförhållandena (IRMS) i jonströmmar med m/z 46 (12C16O18O) och m/z 44 (12C16O2) från koldioxid som bildas efter utbyte med vattnet i vinet enligt reaktionen:

C16O2 + H218O ↔ C16O18O + H216O

Koldioxid från gasfasen används för analysen.

3. Reagenser

Koldioxid för analysen

SMOW (Standard Mean Ocean Water)

GISP (Greenland Ice Sheet Precipitation)

SLAP (Standard Light Arctic Precipitation)

Laboratoriets eget referensvatten, omsorgsfullt kalibrerat i förhållande till referensprover från Internationella Atomenergiorganet (IAEA) i Wien.

4. Laboratorieutrustning

Masspektrometer för isotopförhållanden med en intern repeterbarhet på 0,05 ‰.

Tredubbel kollektor för samtidig detektion av joner med m/z på 44, 45 och 46 eller dubbel kollektor för mätning av joner med m/z på 44 och 46.

Termostatstyrt system (± 0,5 °C) för att uppnå jämvikt mellan CO2 och vattnet i vinet.

Vakuumpump, som kan nå ett inre tryck på 0,13 Pa.

Kolvar med en volym på 15 ml och tillhörande kapillärrör med en inre diameter av c:a 0,015 mm.

Eppendorf-pipett med engångsspets av plast.

5. Experimentell bestämning

5.1 Manuell metod

Tillvägagångssätt för jämviktsmetoden

Införing av provet.

Tag en Eppendorf-pipett med en fast volym på 1,5 ml, sätt på en spets, avpipettera provet som skall analyseras i en rundkolv. Kolvens hals smörjs in med silikonfett, och kolven ansluts till ventilen, som skall vara stängd.

Samma procedur upprepas för alla kolvar på arbetsstativet. En av kolvarna skall innehålla laboratoriets referensvatten.

Avgasning av kolvarna

Båda stativen kyls ned med flytande kväve, och ventilerna öppnas så att systemet töms till ett tryck på 0,1 mm Hg.

Därefter stängs ventilerna, och man låter allt värmas upp. Avgasningsproceduren upprepas tills det inte längre finns några tryckvariationer.

Jämviktsinställning mellan vatten och CO2

Arbetsstativet kyls ner till - 70 °C med en blandning av flytande kväve och alkohol så att vattnet fryser och allt sätts under vakuum. När vakuumet har stabiliserats stängs ventilen så att stativet isoleras och systemet för CO2-tillförsel töms. Gasformig CO2 leds in i kolvarna och efter att ha isolerat resten av systemet placeras arbetsstativet i termostatstyrt vattenbad vid 25 °C (± 0,5 °C) i 12 timmar (över natten). För att optimera den tid som erfordras för att uppnå jämvikt är det lämpligt att bereda proverna mot slutet av dagen och låta jämviken inställa sig under natten.

Överföring av utväxlad CO2 till mätcellerna

På vakuumledningen vid sidan av arbetsstativet monteras en provhållare med lika många mätceller som det finns kolvar med utväxlad CO2. De tomma mätcellerna töms omsorgsfullt på luft och gaserna i kolvarna överförs en efter en till mätcellerna som kylts ner med flytande kväve. Man låter därefter mätcellerna värmas upp till rumstemperatur.

5.2 Metod med automatisk utväxlingsapparatur

För jämviktsinställningen fylls provkolvarna med antingen 2 ml vin eller 2 ml vatten (laboratoriets arbetsreferens) och kyls ned till - 18 °C. Provhållarna med de frysta produkterna ansluts till jämviktssystemet och efter att systemet satts under vakuum leds koldioxiden in vid ett tryck på 800 hPa.

Jämvikt inställer sig vid en temperatur på 22±0,5 °C efter minst 5 timmar och under försiktig omskakning. Den optimala tiden måste på förhand bestämmas för det system man använder eftersom den beror på kolvarnas form.

Koldioxiden i kolvarna överförs till masspektrometerns införselkammare via ett kapillärrör och mätningen utförs på det sätt som föreskrivs för varje typ av apparatur.

6. Beräkning och redovisning av resultat

Den relativa skillnaden δ′ i förhållandet mellan intensiteten för joner med m/z på 46 och 44 (I46/I44) mellan provet och referensen uttrycks i ‰ genom följande uttryck:

δ′ prov = I 46/I 44 prov I 46/I 44 referens - 1 × 1000

Provets 18O-innehåll i förhållande till referensen VSMOW på skalan VSMOW-SLAP anges i följande uttryck:

δ′ 18O = δ′ prov - δ′ SMOW δ′ SMOW - δ′ SLAP × 55,5

Det accepterade värdet för vattnet i SLAP är - 55,5 ‰ i förhållande till VSMOW. Referensens isotopförhållande bestäms efter var tionde mätning på okända prover.

7. Tillförlitlighet

Repeterbarheten (r) är 0,24 ‰.

Reproducerbarheten (R) är 0,50 ‰.

44. BESTÄMNING AV ETYLKARBAMAT I VIN - SELEKTIV DETEKTION GENOM GASKROMATOGRAFI/MASSPEKTROMETRI (För bestämning av etylkarbamat i koncentrationer mellan 10 och 200 μg/l.)

(Observera: Iaktta säkerhetsföreskrifterna vid hantering av kemiska produkter som etanol och aceton samt carcinogena ämnen som etylkarbamat och diklormetan. Hantera använda lösningsmedel enligt gällande miljöföreskrifter.)

A. Princip

Propylkarbamat tillsätts provet som en inre standard, lösningen späds med vatten och överförs till en 50 ml SPE-kolonn (solid phase extraction column). Etylkarbamat och propylkarbamat elueras med diklormetan.

Eluatet koncentreras i en vakuumrotationsindunstare. Koncentratet separeras med hjälp av gaskromatografi (GC), och detektionen utförs med hjälp av en masspektrometer i SIM mode (selected ions monitoring).

B. Utrustning och kromatografiska förhållanden (exempel)

a) Gaskromatograf/masspektrometer (GC/MS) och eventuellt en provväxlare och ett databehandlingssystem eller motsvarande. Kapillärkolonn packad med silica. Längd: 30m, inre diameter: 0,25 mm, vätskefilm: 0,25 μm av typen Carbowax 20M. Inställningar: Injektor 180 °C. Helium som bärgas, 1 ml/minut vid 25 °C. Injektion enligt metoden splitless/split. Temperaturschema: 40 °C under 45 sekunder, därefter höjning med 10 °C per minut upp till 60 °C, sedan med 3 °C per minut till 150 °C. Gå sedan upp till 220 °C och håll denna temperatur i 4 minuter och 15 sekunder. Den specifika retentionstiden är 23-27 minuter för etylkarbamat och 27-31 minuter för propylkarbamat. Förbindelsen gaskromatograf-spektrometer (GC/MS): överföring vid 220 °C. Parametrarna för masspektrometern ställs in manuellt med perfluortributylamin och optimeras för lägsta möjliga masskänslighet, SIM mode, den mobila fasens retentionstid samt tiden för påbörjandet av datainsamlingen: 22 min, mättid/jon: 100 ms.

b) Vakuumrotationsindunstare eller koncentrationssystem av typen Kuderna Danish. (Observera: Utbytet för etylkarbamat i testlösningen (C.g) skall vara 90-110 % under processens gång).

c) Päronformad kolv, 300 ml, med slipad hals.

d) Koncentrationsrör - 4 ml, graderat, med teflonbehandlad fog och en propp.

C. Reagens

a) Aceton - LC-kvalitet. Observera: Före GC/MS skall varje parti aceton analyseras; joner med m/z-värden på 62, 74 och 89 skall då inte ge något utslag.

b) Diklormetan Observera: Före GC/MS skall varje parti diklormetan analyseras efter att ha koncentrerats 200 ggr; joner med m/z-värden på 62, 74 och 89 skall då inte ge något utslag.

c) Etanol - vattenfri

d) Standardlösningar av etylkarbamat

1) Stamlösning - 1,00 mg/ml. Väg upp 100 mg etylkarbamat (renhetsgrad ≥ 99 %) i en 100 ml mätkolv och späd med aceton till märket.

2) Spädd lösning - 10,0 μg/ml. För över 1 ml etylkarbamat-stamlösning till en 100 ml mätkolv och späd med aceton till märket.

e) Standardlösningar av propylkarbamat

1) Stamlösning - 1,00 mg/ml. Väg upp 100 mg propylkarbamat (reagenskvalitet) i en 100 ml mätkolv och späd med aceton till märket.

2) Spädd lösning - 10,0 μg/ml. För över 1 ml av propylkarbamat-stamlösningen till en 100 ml mätkolv och späd med aceton till märket.

3) Inre standard-lösning av propylkarbamat - 400 ng/ml. För över 4 ml av den spädda lösningen av propylkarbamat till en 100 ml mätkolv och späd med vatten till märket.

f) Kalibrerade standardlösningar av etylkarbamat och propylkarbamat Späd de spädda lösningarna av etylkarbamat (d.2) och propylkarbamat (e.2) med diklormetan så att följande koncentrationer erhålls:

1) (100 ng etylkarbamat och 400 ng propylkarbamat) / ml.

2) (200 ng etylkarbamat och 400 ng propylkarbamat) / ml.

3) (400 ng etylkarbamat och 400 ng propylkarbamat) / ml.

4) (800 ng etylkarbamat och 400 ng propylkarbamat) / ml.

5) (1600 ng etylkarbamat och 400 ng propylkarbamat) / ml.

g) Testlösning - 100 ng etylkarbamat / ml i 40 % etanol. För över 1 ml av den spädda lösningen av etylkarbamat (d.2) till en 100 ml mätkolv och späd med 40 % etanol till märket.

h) Solid phase-extraktionskolonn - 50 ml, av engångstyp, packad med kiselgur. Observera: Före analysen kontrolleras varje uppsättning extraktionskolonner beträffande utbytet av etylkarbamat och propylkarbamat och frånvaron av utslag för joner med m/z-värdena 62, 74 och 89. Bered testlösningen (g) med koncentrationen 100 ng etylkarbamat/ml. Analysera 5,00 ml av testlösningen enligt D.a, E och F. Det är godtagbart om utbytet av etylkarbamat är 90-110 ng/ml. Absorbtionsmedel med oregelbunden partikeldiameter kan göra att flödet går mycket långsamt, vilket påverkar utbytet av etylkarbamat och propylkarbamat. Om man efter åtskilliga försök inte erhåller 90-110 % av värdet från testlösningen skall man ändra kolonnen eller använda en korrigerad kalibreringskurva för att bestämma mängden etylkarbamat. För den korrigerade kalibreringskurvan bereds standardlösningarna på det sätt som beskrivs i f men med användning av 40 % etanol i stället för diklormetan. Analysera 1 ml av standardlösningen för kalibrering enligt beskrivningarna i D, E och F. Gör en ny kalibreringskurva genom att använda kvoten etylkarbamat/propylkarbamat från de extraherade standardlösningarna.

D. Beredning av analysprov

Överför vinet till 2 separata 100 ml bägare. Följande mängder skall användas:

a) För viner som innehåller mer än 14 volymprocent alkohol: 5,00 ± 0,01 ml.

b) För viner som innehåller maximalt 14 volymprocent alkohol: 20,00 ± 0,01 ml.

I varje bägare hälls 1 ml inre standard-lösning med propylkarbamat (C.e.3) samt vatten, så att den totala volymen blir 40 ml (eller vikten 40 g).

E. Extraktion

Utför extraktionen i dragskåp med god ventilation.

För över den beredning som gjordes i D till extraktionskolonnen.

Skölj bägaren med 10 ml vatten och för över sköljvattnet till kolonnen.

Låt vätskan absorberas i kolonnen under 4 minuter. Eluera med 2 × 80 ml diklormetan. Samla upp eluatet i en 300 ml E-kolv.

Låt vätskan i eluatet evaporera i en vakuumrotationsindunstare med 30 °C vattenbad tills 2-3 ml återstår ( OBS!- Evaporatet får inte evaporeras torrt).

För över det koncentrerade evaporatet till ett 4 ml graderat rör med hjälp av en pasteurpipett.

Skölj E-kolven med 1 ml diklormetan och för över sköljvätskan till röret. Koncentrera provet till 1 ml i en svag kvävgasström.

För eventuellt över koncentratet till en annan kolv inför GC/MS-analysen.

F. GC/MS-analys

a) Kalibreringskurva Injicera 1 μ1 av var och en av standardlösningarna (C.f) i GC/MS-instrumentet. Upprätta en kurva genom att på y-axeln avsätta kvoten mellan areorna för jonen med m/z-värdet 62, och på x-axeln mängden etylkarbamat i ng/ml (dvs. 100, 200, 400, 800 och 1600 ng/ml).

b) Bestämning av etylkarbamat Injicera 1 μ1 av det koncentrerade extraktet från E i GC/MS-systemet och beräkna kvoten mellan areorna för etylkarbamat och propylkarbamat för jonen med m/z-värdet 62. Fastställ koncentrationen av etylkarbamat (ng/ml) i extraktet genom att använda kalibreringskurvan för den inre standarden. Beräkna koncentrationen av etylkarbamat i analysprovet (ng/ml) genom att dividera mängden etylkarbamat i extraktet (ng) med volymen av testlösningen (ml).

c) Bekräftelse av renhetsgraden för etylkarbamat Fastställ om utslagen för jonerna med m/z-värdena 62, 74 och 89 sammanfaller med retentionstiden för etylkarbamat. Dessa utslag är karaktäristiska för huvudfragmenten (M-C2H2)+ och (M-CH3)+ respektive molekyljonen (M). Förekomsten av etylkarbamat bekräftas om de relativa proportionerna av dessa joner inte avviker mer än 20 % från proportionerna i etylkarbamat-standarden. Extraktet kan behöva koncentreras på nytt för att man skall få ett tillräckligt utslag för jonen med m/z-värdet 89.

G. Kollaborativ analys

Tabell 1 visar de enskilda resultaten för det praktiska övningsprovet och de två vintyperna.

Som ett resultat av Cochrans test togs ett resultat bort för de viner vars alkoholhalt översteg 14 volymprocent, och ett för de viner vars alkoholhalt var lägre eller lika med 14 volymprocent. Båda dessa kom från olika laboratorier.

Den relativa reproducerbarheten tenderar att minska med ökad koncentration etylkarbamat.

45. BESTÄMNING AV ISOTOPKVOTEN 13C/12C GENOM ISOTOPKVOTSMASSPEKTROMETRI AV VINETANOL ELLER ETANOL SOM ERHÅLLITS GENOM JÄSNING AV MUST, KONCENTRERAD MUST ELLER REKTIFIERAD, KONCENTRERAD MUST

1. ANVÄNDNINGSOMRÅDE

Metoden möjliggör mätning av isotopkvoten 13C/12C i vinetanol och i etanol som erhållits efter jäsning av produkter från vindruvor (must, koncentrerad must, rektifierad koncentrerad must).

2. STANDARDER

ISO: 5725:1994 ”Noggrannhet i mätmetoder och resultat: Grundläggande metod för att bestämma repeterbarhet och reproducerbarhet hos en standardiserad mätmetod.”

V-PDB: Vienna-Pee-Dee Belemnite (RPDB = 0,0112372).

Metod 8 i bilagan till denna förordning: ”Detektion av berikning av must, koncentrerad must, rektifierad koncentrerad must och av vin med hjälp av kärnmagnetisk resonans hos deuterium (SNIF-NMR).”

3. TERMER OCH DEFINITIONER

13C/12C: Kvoten mellan isotoperna kol-13 (13C) och kol-12 (12C) i ett givet prov.

δ13C: Halten av kol-13 (13C) uttryckt i promille (‰).

SNIF-NMR: Site-Specific Natural Isotope Fractionation studied by Nuclear Magnetic Resonance (lokalitetsspecifik naturlig isotopfraktionering undersökt genom kärnmagnetisk resonans).

V-PDB: Vienna-Pee-Dee Belemnite. PDB är primärstandard för mätning av naturliga variationer i halten av isotopen kol-13 och utgörs av kalciumkarbonat från rostrum hos belemniter från krita i formationen Pee-Dee i Syd-Carolina (Förenta staterna). Dess isotopkvot 13C/12C eller RPDB är lika med 0,0112372. Reserverna av PDB är slut sedan länge men PDB är fortfarande primärstandard för att uttrycka naturliga variationer i halten av isotopen kol-13, och mot denna kalibreras de referensmaterial som finns tillgängliga vid Internationella atomenergiorganet (IAEA) i Wien (Österrike). Isotopbestämningar av naturlig förekomst av kol-13 uttrycks därför av konvention i förhållande till V-PDB.

m/z: Kvoten mellan massa och laddning.

4. PRINCIP

Vid fotosyntesen sker växternas koldioxidassimilation genom två principiellt olika typer av metabolism, nämligen C3-metabolism (Calvincykeln) och C4-metabolism (Hatch och Slack). Dessa båda fotosyntesmekanismer har olika isotopfraktionering. De produkter som kommer från C4-växter, såsom sockerarter och alkohol som framställs genom jäsning, har högre halt av kol-13 än motsvarande produkter från C3-växter. De flesta växter, däribland vinranka och beta, hör till C3-gruppen. Sockerrör och majs hör till C4-gruppen. Genom att mäta halten kol-13 kan man alltså påvisa och uppskatta tillsatser av socker med C4-ursprung (rörsocker eller isoglukos från majs) i produkter som kommer från druvor (druvmust, vin m.fl.). Genom att kombinera uppgifter om halten kol-13 med uppgifter från SNIF-NMR är det också möjligt att bestämma hur stora kvantiteter som har tillsatts av blandningar av sockerarter eller alkoholer som kommer från C3- och C4-växter.

Halten av kol-13 bestäms på den koldioxid som bildas vid fullständig förbränning av provet. Förekomsten av de viktigaste isotopomererna med masstal 44 (12C16O2), 45 (13C16O2 och 12C17O16O) och 46 (12C16O18O), som kan bildas genom kombination av isotoperna 18O, 17O, 16O, 13C och 12C, bestäms utifrån de jonströmmar som mäts i tre olika kollektorer i en isotopkvotsmasspektrometer. Bidragen från isotopomererna 13C17O16O och 12C17O2 är mycket små och därmed försumbara. Jonströmmen för m/z = 45 korrigeras för bidraget från 12C17O16O som beräknas utifrån strömmens intensitet mätt för m/z = 46 med beaktande av de relativa förekomsterna av 18O och 17O (Craigs korrektion). Genom jämförelse med en standard som är kalibrerad mot den internationella standarden V-PDB kan halten kol-13 beräknas på den relativa δ13C-skalan.

5. REAGENS

Material och förbrukningsartiklar hänger samman med vilken utrustning (6) laboratoriet använder. De mest använda systemen baseras på en elementaranalysator. Den kan vara utformad antingen för införing av prov i förseglade metallkapslar eller för insprutning av flytande prov genom ett membran med hjälp av en injektionsspruta.

Allt efter typ av instrument, kan följande referensmaterial, reagens och förbrukningsartiklar användas:

Referensmaterial

tillgängliga hos IAEA: Namn Material δ13C i förhållande till V-PDB (9) — IAEA-CH-6 sackaros -10,4‰ — IAEA-CH-7 polyeten -31,8‰ — NBS22 olja -29,7‰ — USGS24 grafit -16,1‰

tillgängliga hos IRMM i Geel (B) (Institutet för referensmaterial och referensmätningar): Namn Material δ13C i förhållande till V-PDB (9) — CRM/BCR 656 vinalkohol -26,93‰ — CRM/BCR 657 glukos -10,75‰ — CRM/BCR 660 vatten-alkohollösning (12 volymprocent alkohol) -26,72‰

Standardprov med en känd 13C/12C-kvot kalibrerad mot internationella referensmaterial.

För genomströmningssystem har följande vägledande förteckning upprättats:

Helium för analys (CAS 07440-59-7).

Syre för analys (CAS 07440-44-7).

Koldioxid för analys, använd som sekundär standard för halten kol-13 (CAS 00124-38-9).

Oxidationsreagens till ugnen i förbränningssystemet, t.ex. koppar(II)oxid för grundämnesanalys (CAS 1317-38-0).

Torkmedel för att avlägsna vatten som bildas vid förbränningen, t.ex. anhydrone för grundämnesanalys (magnesiumperklorat) (CAS 10034-81-8). (Detta är inte nödvändigt för apparater med ett system som avlägsnar vatten med hjälp av en kylfälla eller ett kapillärrör med selektiv permeabilitet.)

6. UTRUSTNING OCH MATERIAL

6.1 Isotopkvotsmasspektrometer (IRMS)

Isotopkvotsmasspektrometer (IRMS) som kan bestämma det relativa innehållet av naturligt förekommande 13C i CO2-gas, med en intern noggrannhet på 0,05 ‰ eller bättre, uttryckt som ett relativt värde (9). Den interna noggrannheten definieras här som skillnaden mellan två mätningar av samma CO2-prov. En masspektrometer för mätning av isotopkvoter är i allmänhet försedd med en tredubbel kollektor för samtidig mätning av intensiteter för m/z = 44, 45 och 46. Isotopkvotsmasspektrometern skall antingen ha ett system med dubbla insläpp, för alternerande mätning av det okända provet och ett referensprov, eller ett integrerat system där proven förbränns kvantitativt och där koldioxiden avskiljs från de övriga förbränningsprodukterna före mätningen i masspektrometern.

6.2 Förbränningsapparat

Förbränningsapparat som kan omvandla etanol kvantitativt till koldioxid och avlägsna alla andra förbränningsprodukter, inbegripet vatten, utan någon isotopfraktionering. Apparaten kan vara antingen ett genomströmningssystem som är integrerat i masspektrometern (6.2.1) eller ett separat förbränningssystem (6.2.2). Apparaten skall göra det möjligt att uppnå minst den noggrannhet som anges i punkt 11.

6.2.1 Genomströmningssystem

Ett genomströmningssystem utgörs antingen av en elementaranalysator eller av en gaskromatograf direkt ansluten till ett förbränningssystem.

För system som är utformade för införing av prov i metallkapslar behövs följande laboratorieutrustning:

Kalibrerad mikrospruta eller mikropipett med lämpliga spetsar.

Laboratorievåg med en noggrannhet på 1 μg eller bättre.

Pincett för förslutning av kapslar.

Tennkapslar för flytande provmaterial.

Tennkapslar för fast provmaterial.

Anm.: För att minska risken att etanolproven avdunstar kan ett absorberande material (t.ex. Chromosorb W 45–60 mesh) placeras i kapslarna, efter att ha genomgått ett blindprov för att kontrollera att det inte innehåller kol i så betydande mängd att det kan påverka mätresultaten.

Vid användning av en elementaranalysator försedd med insprutningsenhet för vätskor eller ett system med gaskromatograf och förbränningsenhet behövs följande laboratorieutrustning:

Injektionsspruta för vätskor.

Kolvar med tät förslutning och inerta membran.

Den laboratorieutrustning som anges i ovanstående förteckningar är endast exempel och kan ersättas med annan likvärdig utrustning beroende på vilken typ av förbränningsapparat och masspektrometer som används på laboratoriet.

6.2.2 Separat system för provberedning

Koldioxiden från förbränningen av analysproven och referensprovet samlas upp i ampuller som sedan placeras i spektrometerns båda kanaler för isotopanalys. Flera olika typer av förbränningsapparater som finns beskrivna i litteraturen kan användas:

Slutet förbränningssystem fyllt med cirkulerande syrgas.

Elementaranalysator med helium- och syregenomströmning.

Förseglad glasampull fylld med koppar(II)oxid som oxidationsmedel.

7. BEREDNING AV ANALYSPROV

Etanolen måste extraheras från vinet före isotopbestämningen. Extraktionen sker genom destillering av vin enligt beskrivningen i punkt 3.1 i metod nr 8 (SNIF-NMR).

När det gäller druvmust, koncentrerad druvmust och rektifierad, koncentrerad druvmust måste sockret först jäsas till etanol enligt beskrivningen i punkt 3.2 i metod nr 8.

8. UTFÖRANDE

Alla moment i beredningen måste utföras utan att etanolförlusten genom avdunstning blir så stor att provets isotopsammansättning ändras.

Följande beskrivning bygger på förfaranden som allmänt används vid förbränning av etanolprov i kommersiellt tillgängliga automatiska förbränningssystem. Alla andra metoder som säkerställer en kvantitativ omvandling av etanolprovet till koldioxid utan etanolförlust genom avdunstning kan användas för beredning av koldioxid för isotopanalys.

Tillvägagångssätt vid användning av en elementaranalysator:

a) Inkapsling av proven:

Kapslar, pincett och arbetsbord skall vara rena.

Ta en kapsel av lämplig storlek med hjälp av pincetten.

Tillsätt erforderlig mängd vätska i kapseln med hjälp av mikropipetten.

Anm.: För att få 2 mg kol krävs 3,84 mg absolut etanol eller 4,17 mg destillat med en alkoholhalt på 92 viktprocent. Den erforderliga mängden destillat beräknas på motsvarande sätt och med hänsyn till den mängd kol som masspektrometerns känslighet kräver.

Förslut kapseln med hjälp av pincetten.

Varje kapsel skall vara helt tätt försluten. I annat fall måste den kasseras och ersättas med en ny.

Bered två kapslar för varje prov.

Placera kapslarna på lämpligt ställe på arbetsbordet på elementaranalysatorns automatiska provväxlare. Varje kapsel skall vara noggrant märkt med ett löpnummer.

Placera systematiskt kapslar med standardprov först och sist i provserien.

Gör kontrollprov med regelbundna mellanrum i provserien.

b) Kontroll och justering av instrument för grundämnesanalys och masspektrometri:

Temperaturen i elementaranalysatorns förbränningsenheter samt helium- och syreströmmen ställs in för optimal förbränning av provet.

Kontrollera att det inte finns några läckor i systemet för grundämnesanalys och masspektrometri (exempelvis genom att kontrollera jonströmmen för m/z = 28, vilket motsvarar N2).

Ställ in masspektrometern för mätning av jonströmsintensiteten för m/z = 44, 45 och 46.

Kontrollera systemet med hjälp av kända kontrollprov före mätning av analysproven.

c) Genomförande av en mätserie: Proven på elementaranalysatorns (eller kromatografens) automatiska provväxlare förs in ett i taget. Koldioxiden från förbränningen av de enskilda proven leds vidare mot masspektrometern som mäter jonströmmarna. Datorn som är kopplad till instrumentet registrerar jonströmmarnas intensitet och beräknar δ-värdena för varje enskilt prov.

9. BERÄKNING

Metodens syfte är att mäta isotopkvoten 13C/12C i etanol som har extraherats från vin eller från produkter framställda av druvor efter jäsning. Isotopkvoten 13C/12C kan uttryckas genom avvikelsen från ett standardprov. Avvikelsen för isotopen kol-13 (δ 13C) beräknas sedan på en delta-promilleskala (δ/1000) genom att resultaten för analysprovet jämförs mot resultaten för standardprovet, som dessförinnan har kalibrerats mot den internationella primärstandarden (V-PDB). δ 13C-värdena uttrycks i förhållande till standardprovet enligt följande formel:

δ13Cprov/std ‰ = 1000 × (Rprov-Rstd)/Rstd

där Rprov och Rstd är isotopkvoterna 13C/12C för provet respektive den koldioxid som används som standard.

δ 13C-värdena uttrycks i förhållande till V-PDB enligt följande formel:

δ13Cprov/V-PDB ‰ = δ13Cprov/std δ13Cstd/V-PDB + (δ13Cprov/std × δ13Cstd/V-PDB)/1000,

där δ13Cstd/V-PDB är den isotopavvikelse som tidigare bestämts för standardprovet i förhållande till V-PDB.

Under mätningens gång kan en viss drift förekomma till följd av ändrade förhållanden för instrumenten. I så fall måste δ 13C-värdena för proven korrigeras efter skillnaden mellan det δ 13C-värde som uppmätts för standardprovet och det riktiga värdet, som fastställdes vid den föregående kalibreringen mot V-PDB genom jämförelse med ett internationellt referensmaterial. Mellan två mätningar på standardprovet kan driften, och därmed den korrigering som skall göras av provresultaten, antas vara linjär. Standardprovet skall mätas i början och i slutet av varje provserie. Utifrån detta kan en korrigering beräknas för varje prov genom linjär interpolation.

10. KVALITETSSÄKRING OCH KONTROLL

Kontrollera att 13C-värdet för standardprovet inte avviker mer än 0,5 ‰ från det tillåtna värdet. Om det gör det måste spektrometerns inställning kontrolleras och eventuellt justeras.

Kontrollera för varje enskilt prov att skillnaden i resultat mellan de två kapslar som har mätts efter varandra är mindre än 0,3 ‰. Det slutliga resultatet för ett givet prov är genomsnittet för de båda kapslarna. Om avvikelsen är större än 0,3 ‰ måste mätningen göras om.

Att mätningen fungerar korrekt kan kontrolleras utifrån jonströmmens intensitet för m/z = 44, som är proportionell mot den mängd kol som sprutas in i elementaranalysatorn. Under standardförhållanden torde intensiteten av denna jonström vara praktiskt taget konstant för de analyserade proven. En betydande avvikelse kan tyda på avdunstning av etanol (t.ex. från en otät kapsel) eller instabilitet i elementaranalysatorn eller masspektrometern.

11. METODENS PRESTANDA (NOGGRANNHET)

Olika laboratorier har gjort ett första ringtest (11.1) av destillat som innehåller alkohol från vin, sockerrör och betor samt olika blandningar av dessa tre ursprung. Eftersom denna undersökning inte tog hänsyn till destillationsprocessen, har kompletterande information från andra ringtest avseende vin (11.2) och särskilt provserier för bedömning av lämplighet (11.3) att utföra isotopmätningar också beaktats. Resultaten visar att olika destillationssystem som används under tillfredsställande förhållanden, i synnerhet de som tillämpas vid mätning med SNIF-NMR, inte ger upphov till någon betydande variation vid bestämning av δ13C-värdet hos vinetanol. Värdena på de parametrar för noggrannhet som har observerats för vin är nästan identiska med dem som erhölls i ringtestet (11.1) av destillat.

11.1 Ringtest av destillat

År då interkalibreringen gjordes: 1996

Antal laboratorier: 20

Antal prov: 6 dubbla blindprov

Analyt: δ 13C för etanol

Provkod Alkohol från vin Alkohol från betor Alkohol från sockerrör A & G 80 % 10 % 10 % B & C 90 % 10 % 0 % D & F 0 % 100 % 0 % E & I 90 % 0 % 10 % H & K 100 % 0 % 0 % J & L 0 % 0 % 100 %

Prov A/G B/C D/F E/I H/K J/L Antal laboratorier efter eliminering av laboratorier med avvikande mätresultat 19 18 17 19 19 19 Antal godkända resultat 38 36 34 38 38 38 Medelvärde (δ13C) ‰ - 25,32 - 26,75 - 27,79 - 25,26 - 26,63 - 12,54 Sr2 0,0064 0,0077 0,0031 0,0127 0,0069 0,0041 Standardavvikelse för repeterbarhet (Sr) ‰ 0,08 0,09 0,06 0,11 0,08 0,06 Repeterbarhetsgräns r (2,8 × Sr) ‰ 0,22 0,25 0,16 0,32 0,23 0,18 SR2 0,0389 0,0309 0,0382 0,0459 0,0316 0,0584 Standardavvikelse för reproducerbarhet (SR) ‰ 0,20 0,18 0,20 0,21 0,18 0,24 Reproducerbarhetsgräns R (2,8 × SR) ‰ 0,55 0,49 0,55 0,60 0,50 0,68

11.2 Interkalibrering på två viner och en alkohol

År då interkalibreringen gjordes: 1996

Antal laboratorier: 14 för destillering av vin, varav 7 även för mätning av δ 13C i vinetanol 8 för mätning av δ 13C i alkoholprov

Antal prov: 3 (vitt vin med 9,3 volymprocent alkohol, vitt vin med 9,6 volymprocent alkohol samt alkohol med styrkan 93 viktprocent).

Analyt: δ 13C för etanol

Prov Rött vin Vitt vin Alkohol Antal laboratorier 7 7 8 Antal godkända resultat 7 7 8 Medelvärde (δ13C) ‰ - 26,20 - 26,20 - 25,08 Varians för reproducerbarhet SR2 0,0525 0,0740 0,0962 Standardavvikelse för reproducerbarhet (SR) ‰ 0,23 0,27 0,31 Reproducerbarhetsgräns R (2,8 × SR) ‰ 0,64 0,76 0,87

De deltagande laboratorierna använde olika system för destillation. De isotopbestämningar (δ 13C) som ett enskilt laboratorium utfört på alla de destillat som deltagarna skickade tillbaka uppvisar varken avvikande värden eller värden som skiljer sig signifikativt från medelvärdena. Resultatens varians (S2 = 0,0059) är jämförbar med variansen för repeterbarhet Sr2 i ringtestet av destillat (11.1).

11.3 Resultat av undersökningar för bedömning av lämplighet för isotopanalyser

Sedan december 1994 anordnas regelbundet internationella undersökningar för att bedöma lämplighet att utföra isotopbestämningar på vin och alkohol (destillat med 96 volymprocent alkohol). Resultaten gör det möjligt för deltagande laboratorier att kontrollera sina analysers kvalitet. Genom en statisk behandling av resultaten kan man göra en bedömning av bestämningarnas variation under reproducerbarhetsbetingelser och därigenom göra en uppskattning av parametrarna varians och reproducerbarhetsgräns. De erhållna resultaten för bestämningarna av δ

13

C i etanol från vin och destillat sammanfattas i följande tabell:

N Antal deltagande laboratorier. Datum Vin Destillat N SR S2R R N SR S2R R Dec. 1994 6 0,210 0,044 0,59 6 0,151 0,023 0,42 Juni 1995 8 0,133 0,018 0,37 8 0,147 0,021 0,41 Dec. 1995 7 0,075 0,006 0,21 8 0,115 0,013 0,32 Mars 1996 9 0,249 0,062 0,70 11 0,278 0,077 0,78 Juni 1996 8 0,127 0,016 0,36 8 0,189 0,036 0,53 Sep. 1996 10 0,147 0,022 0,41 11 0,224 0,050 0,63 Dec. 1996 10 0,330 0,109 0,92 9 0,057 0,003 0,16 Mars 1997 10 0,069 0,005 0,19 8 0,059 0,003 0,16 Juni 1997 11 0,280 0,079 0,78 11 0,175 0,031 0,49 Sep. 1997 12 0,237 0,056 0,66 11 0,203 0,041 0,57 Dec. 1997 11 0,127 0,016 0,36 12 0,156 0,024 0,44 Mars 1998 12 0,285 0,081 0,80 13 0,245 0,060 0,69 Juni 1998 12 0,182 0,033 0,51 12 0,263 0,069 0,74 Sep. 1998 11 0,264 0,070 0,74 12 0,327 0,107 0,91 Vägt medelvärde 0,215 0,046 0,60 0,209 0,044 0,59

11.4 Repeterbarhets- och reproducerbarhetsgränser

På grundval av de uppgifter från olika interkalibreringar som presenteras i ovanstående tabeller kan följande repeterbarhets- och reproducerbarhetsgränser fastställas för denna metod, inbegripet destillationsstadiet:

Repeterbarhetsgräns r: 0,24.

Reproducerbarhetsgräns R: 0,6.

1 EGT nr L 84, 27.3.1987, s. 1.

2 EGT nr L 132, 23.5.1990, s. 19.

3 EGT nr L 133, 14.5.1982, s. 1.

4 Varje pyknometer med likvärda egenskaper kan användas.

5 Räkneexempel ges i punkt 6 i detta kapitel.

6 Räkneexempel ges i punkt 6 i detta kapitel.

7 Räkneexempel ges i punkt 6 i detta kapitel.

8 Räkneexempel ges i punkt 6 i detta kapitel.

9 Sockerhaltenär uttryckt som invertsocker).

10 Sockerhalten är uttryckt som invertsocker.

11 (Prov 2000/3 ej medtaget)

13 Exempel: vid en alkoholhalt av 12 viktprocent är p = 0,12.

14 Innan denna beräkning görs skall vinets relativa densitet, bestämd enligt ovan, korrigeras för effekten av flyktiga syror med hjälp av nedanstående formel: dv = d2020 - 0,0000086 a eller pv = ρ20 - 0,0000086 a där a är mängden flyktiga syror, uttryckt i mval/l.

15 Dessa värden anges i avvaktan på att en databank upprättas på gemenskapsnivå för sådana värden.

16 Dessa värden anges i avvaktan på att en databank upprättas på gemenskapsnivå för sådana värden.

17 Ett varumärke är ”norite”.

18 105 pascal (Pa) = 1 bar.

19 1 Pa = 1 N/m2 = 10-5 bar.

20 Härvid bortses från andra gaser som är närvarande O 2 2 m.fl.) i mängder som är för små för att påverka övertrycket.

21 Detta avstånd måste anges i riktning från O till C.

22 Subtrahera korrektionen.

23 Addera korrektionen.

26 För viner med särskilt komplext innehåll kan det vara lämpligt att använda en 50 m kapillärkolonn.

27 För viner med särskilt komplext innehåll kan det vara lämpligt att endast höja temperaturen med 2 °C per minut.